文献类型： 中文期刊

作者： 尤永进 ¹ ; 朱彩珠 ¹ ; 葛艳 ¹ ; 陈波 ¹ ; 张强 ¹ ; 饶忠 ¹ ; 徐泉兴 ¹ ; 卢永干 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所l上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究分室,中国农业科学院兰州兽医研究所,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究分室,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究分室,中国农业科学院兰州兽医研究所,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究分室,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究分室,中国农业科学院兰州兽医研究所 上海,201106 ,甘肃兰州,730046 ,上海,201106 ,上海,201106 ,甘肃兰州,730046 ,上海,201106 ,上海,201106 ,甘肃兰州,730046

关键词： 口蹄疫病毒;非结构蛋白;克隆;表达

期刊名称： 中国病毒学

ISSN： 1003-5125

年卷期： 2003 年 02 期

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus , FMDV)非结构蛋白(NSP)-3ABC可用于注苗与感染动物的鉴别诊断,合成该基因的PCR引物,并在引物5 端和3 端分别加入含BamH I和Hind III限制性酶切位点序列。以FMDV毒株基因组RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增3abc基因,得到的基因片段与T载体连接,转化DH5α。提取重组载体pT-3ABC,经BamH I/Hind III双酶切后与载体pET32a连接,转化宿主菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导表达目的蛋白。SDS-PAGE及Western Blotting检测和鉴定结果表明,在大肠杆菌中成功表达了NSP-3ABC蛋白,分子量约56kDa,且该表达产物可与FMDV感染的动物血清产生免疫反应。ELISA试验结果显示,表达蛋白可用于FMDV注苗与感染动物的鉴别诊断。