文献类型： 会议论文
第一作者： 胡茂志
作者： 胡茂志 1 ; 焦新安 1 ; 潘志明 2 ; 黄金林 2 ; 邵国青 3 ; 刘秀梵 1 ;
作者机构： 1.扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室
2.扬州大学生物科学与技术学院(江苏扬州)
3.江苏省农业科学院兽医研究所(江苏南京)
关键词： 猪肺炎支原体;P36蛋白;单克隆抗体;融合蛋白
会议名称： 第六次人畜共患病学术交流会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 645-647
摘要： 表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀.可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测;同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只).利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了一株能分泌特异性抗体的单克隆细胞株5A7-2.生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1:2.5×10<'6>;免疫球蛋白亚类为IgG<,2a>.免疫印迹结果显示,腹水单抗与GST-P36融合蛋白反应而不与GST蛋白反应,并且在猪肺炎支原体(Mhp)蛋白36 kD位置也有明显的条带,说明细胞株5A7-2所分泌的是针对Mhp P36蛋白的单抗.P36蛋白携带Mhp种特异性抗原表位,并且重组P36蛋白的抗体也不与其它支原体或细菌反应,因此,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础.
分类号： S858.28`S852.62
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