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猪圆环病毒2型ORF1基因的克隆、序列分析与表达

文献类型： 会议论文

第一作者： 徐丽华

作者： 徐丽华 1 ; 王一成 1 ; 逄春泰 1 ; 周永学 1 ;

作者机构： 1.浙江省农科院畜牧兽医研究所(杭州)

关键词： 猪圆环病毒2;基因克隆;序列分析;原核表达

会议名称： 浙江省农业科学院第十二届青年学术论文报告会

主办单位： 浙江省农业科学院

页码： 6-12

摘要： 从临床典型的断乳后多系统衰竭综合征(PMWS)猪病料中取猪圆环病毒2型(PCV2)基因组KNA,根据Genbank所公布的PCV2基因组序列,进行PCR扩增PCV2的ORF1、史隆与测序、并作GST融合表达试验.结果表明,PCV2-ORF1基因长945bp;与10株不同国家及地区PCV2分离株的ORF1进行比较,核苷酸同源性达97.2-98.1％,氨基酸同源性达98.1-99.7％,同源性很高,亲源关系密切.但与PCV1的ORF1核苷酸和氨基酸同源性仅分别为79.0％和84.3％. 从重组质粒将ORF1再亚克隆到pGEX-4T-1中,构建成谷胱苷肽转移酶(GST)融合基因,经IPTG诱导后可表达出相对分子量为61.95KD的融合蛋白.实验结果为进行猪PMWS分子诊断技术和PCV2基因工程苗的研制奠定实验技术基础.

分类号： S852.651

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