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绵羊生长激素(oGH)的分子克隆与序列测定

文献类型: 会议论文

第一作者: 刘守仁

作者: 刘守仁 1 ; 王新华 1 ; 钟发刚 1 ; 沈敏 1 ; 杨华 1 ; 连宏军 1 ; 薄新文 1 ;

作者机构: 1.新疆农垦科学院畜牧兽医所,石河子,832000

关键词: 绵羊;脑垂体;生长激素;基因克隆

会议名称: 中国首届农业生物技术发展论坛

主办单位: 中国科技部

页码: 248-253

摘要: 本文旨在克隆新疆绵羊生长激素(Ovine growth homone,oGH)的基因.我们从阿勒泰×中国美利奴杂交羊脑垂体细胞中提取总RNA,分离得到具翻译活性的mRNA.用RT-PCR方法扩增出编码oGH的基因,长度为671 bp.将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化.采用CLONTECH公司PCR克隆试剂盒将扩增产物连接至pT-Adv质粒上,经PstⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定正反插入后,筛选正向插入阳性克隆,并进行序列分析.结果表明克隆到的oGH基因序列与国外报道的序列有5个碱基差异,但所推导的氨基酸序列完全一致.oGH基因的开放阅读框架共含654个核苷酸,编码217个氨基酸,其中信号肽26个氨基酸,编码碱基为1-78(78 bp);成熟肽191个氨基酸,编码碱基为79-651(573 bp);终止密码子TAG(652-654 bp).其蛋白质的氨基酸序列与牛、人和鱼的序列同源性分别为99.08%、26.7%和5.9%.

分类号: Q785

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