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猪繁殖与呼吸综合征病毒GD株ORF6基因重组腺病毒的构建

文献类型: 会议论文

第一作者: 王旭荣

作者: 王旭荣 1 ; 西北农林科技大学动物科技学院 2 ; 宋长绪 1 ; 杨增岐 3 ; 王贵平 1 ; 张春红 1 ; 祝卫国 1 ; 黄忠 1 ;

作者机构: 1.广东省农科院兽医研究所,广州,广东,510640

2.杨凌,陕西,712100

3.西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,陕西,712100

关键词: 猪繁殖呼吸综合征病毒;ORF6基因;重组腺病毒;PCR检测

会议名称: 中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 435-438

摘要: 根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的美洲株ATCCVR-2332设计并合成针对PRRSVORF6基因的两条引物,通过RT-PCR方法从广东省送检的可疑病料中扩增得到大小为550bpcDNA片段,将此基因片段克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pAdTrack-CMV-ORF6.将重组质粒与腺病毒骨架载体pAdeasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV-ORF6,然后用PacI线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒.通过荧光显微镜观察、PCR检测得知PRRSVORF6重组腺病毒的构建获得成功。

分类号: S852.651`S854.43`Q784

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