文献类型： 会议论文
第一作者： 祝卫国
作者： 祝卫国 1 ; 西北农林科技大学动物科技学院 2 ; 宋长绪 1 ; 王贵平 1 ; 杨增歧 3 ; 王旭荣 3 ; 黄忠 1 ; 张春红 1 ;
作者机构： 1.广东省农科院兽医研究所,广州,广东,510640
2.杨凌,陕西,712100
3.西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,陕西,712100
关键词： 猪圆环病毒2型;ORF1基因;重组腺病毒;基因表达;免疫原性;PCR检测
会议名称： 中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 450-453
摘要： 根据PCV2ORF1基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF1基因(945bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF1.将PCV2ORF1基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ORF1,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV-ORF1,然后用PacI线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒.通过荧光显微镜观察、PCR检测和Westernblot检测证明PCV2ORF1基因在293细胞内获得表达,ORF1多肽具有一定的免疫原性。
分类号： S852.651`S854.43`S852.4
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