文献类型： 会议论文
第一作者： 宋长绪
作者： 宋长绪 1 ; 蒋智勇 1 ; 华南农业大学生命科学院 2 ; 王贵平 1 ; 高向阳 3 ; 赵亚华 3 ;
作者机构： 1.广东省农科院兽医研究所,广州,广东,510640
2.广州,广东,510642
3.华南农业大学生命科学院,广州,广东,510642
关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2基因;重组腺病毒;基因表达;免疫原性;PCR检测
会议名称： 中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 454-457
摘要： 根据PCV2ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF2.将PCV2ORF2基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ORF2,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV-ORF2,然后用PacI线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒.通过荧光显微镜观察、PCR检测和Westernblot检测证明PCV2ORF2基因在293细胞内获得表达,ORF2多肽具有良好的免疫原性。
分类号： S852.651`S854.43`S852.4
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