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猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅣ表达蛋白单克隆抗体的制备

文献类型： 会议论文

第一作者： 袁秀芳

作者： 袁秀芳 1 ; 王一成 1 ; 徐丽华 1 ;

作者机构： 1.浙江省农科院畜牧兽医研究所,杭州,浙江,310021

关键词： 猪传染性胸膜肺炎;胸膜肺炎放线杆菌;单克隆抗体;杂交瘤株;apxⅣ蛋白抗体;抗体制备

会议名称： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 500-502

摘要： 将APP apxⅣ N端基因克隆于pET-28a载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。收获融合表达的apxⅣ蛋白,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/C小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用apxⅣ表达蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,结果获得了3株能稳定分泌抗apxⅣ蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为4H3,1D11和4C1.亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体为IgG1型。经Western blot分析证实,3株杂交瘤细胞上清液能与apxⅣ表达蛋白特异反应。研究获得的融合蛋白单克隆抗体为今后建立该菌的免疫胶体金诊断技术,分析apxⅣ蛋白的抗原表位等提供有益帮助。

分类号： S858.28`S855.12

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