文献类型： 会议论文
第一作者： 张雪寒
作者： 张雪寒 1 ; 周俊明 1 ; 俞正玉 1 ; 茅爱华 1 ; 吕立新 2 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京 210014
2.江苏省农业科学院兽医研究所农
关键词： 出血性大肠杆菌;转位紧密素受体;志贺毒素;融合基因;免疫原性
会议名称： 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 432-441
摘要： 为了更好防治由出血性大肠杆菌O157：H7引起的疾病，尝试研制基因工程疫苗，其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stxb的融合基因，将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-Tir295-stx1b重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS-PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达，目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠，能够诱导高滴度(105)的IgG，鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG，还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHEC O157：H7，相对于对照组，免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时问明显缩短。实验结果表明：该融合蛋白免疫原性良好，并且由Tir、six1b和stx2b三部分抗原组成，可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
分类号： S852.612`S852.4
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