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TGEV和PEDV多重RT-PCR检测方法的建立及其细胞分离培养研究

文献类型: 会议论文

第一作者: 李霞

作者: 李霞 1 ; 张春红 2 ; 赵亚华 3 ; 张建峰 2 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室 广东广州 510640 华南农业大学生命科学学院,广东广州 510642

2.广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室 广东广州 510640

3.华南农业大学生命科学学院,广东广州 510642

关键词: TGEV;PEDV;多重RT-PCR

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 429-432

摘要: 根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的ORF2(s基因)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777株的ORF6(N基因)核酸序列,经DNA sis 2.0比较分析,分别筛选出TGEVS基因和PEDVN基因相对保守区,利用PrimerPremier=5.0软件设计两对引物。多重RT-PCR得到与预期大小相一致的约858bp和511bp的产物,特异性试验表明,多重RT-PCR不与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒和猪轮状病毒反应,特异性良好;敏感性试验表明多重RT-PCR能检测10 TVID50/mL疫苗毒。将猪传染性胃肠炎、轮状病毒二联活疫苗和疑似腹泻猪粪便分别在ST细胞和Vero-E6细胞上进行增殖,经RT-PCR和金标试纸条检测,分别盲传5代、10后成功分离出TGEV和PEDV病毒。

分类号: S858.28`S856.4

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[1]Short communication: antiviral activity of porcine IFN-lambda 3 against porcine epidemic diarrhea virus in vitro. Shen, Haiyan,Zhang, Chunhong,Liu, Zhicheng,Sun, Minhua,Sun, Junying,Li, Linlin,Dong, Jiawen,Zhang, Jianfeng,Guo, Pengju.

[2]柑橘黄龙病、裂皮病和衰退病病原的多重RT-PCR检测. 丁芳,曹庆,王国平,易干军,钟云. 2006

[3]柑橘衰退病、裂皮病和碎叶病的多重RT-PCR检测方法研究. 肖远辉,曾继吾,张秋明,周碧容. 2007

[4]小反刍兽疫病毒、A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立. 黄元,袁淑英,黄武,廖任如,王晓虎,陈晶,向华. 2019

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