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大肠杆菌O157:H7菌毛hcpA基因产物的小鼠免疫保护试验

文献类型: 会议论文

第一作者: 张雪寒

作者: 张雪寒 1 ; 周俊明 1 ; 俞正玉 1 ; 茅爱华 1 ; 吕立新 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014

2.江苏省农业科

关键词: 大肠杆菌;菌毛;免疫原性;动物试验

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

主办单位: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会;中国免疫学会兽医免疫分会;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

页码: 264-268

摘要: 克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHZC)0157:H7 IV型菌毛(hcpA)基因,并研究其免疫原性。选用pET32原核表达载体,体外构建hcpA原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,western blot分析其免疫原性。选用Balb/c小鼠进行免疫试验,并对临床分离多株EHEC 0157:H7进行hcDA基因检测和电镜观察菌毛的表达。成功获得高效表达重组HcpA蛋白,并制备了兔源HcpA多克隆抗体,westem blot分析此抗体能与提取的HCP发生特异性抗原抗体反应。重组HcpA经二免后,Balb/c小鼠较对照小鼠排菌量降低,而且排菌时间缩短。在大肠杆菌中成功克隆表达了hcpA基因,所获重组HcpA蛋白具有良好的免疫原性,可作为研制肠出血性大肠杆菌0157:H7基因工程疫苗或者检测试剂的候选抗原。

分类号: S852.6

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