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新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

文献类型： 会议论文

第一作者： 李兆龙

作者： 李兆龙 1 ; 陈仕龙 1 ; 林锋强 1 ; 王劭 1 ; 程晓霞 1 ; 朱小丽 2 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福州,350013

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研

关键词： 鸭呼肠孤病毒;病毒检测;逆转录;环介导等温扩增技术

会议名称： 第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

主办单位： 中国畜牧兽医学会禽病学分会

页码： 388-394

摘要： 目的：根据环介导等温扩增技术(LAMP)，建立了一种适用于新型鸭呼肠孤病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法。方法：根据新型鸭呼肠孤病毒(NDRV-NP03)S3基因序列，设计了一套针对新型鸭呼肠孤病毒S3基因特异片段的8个区域6条特异性引物，并对反应条件进行优化。结果：结果表明该方法对MDRV、DHV、ARV、GPV、MPV、DPMV、禽新型黄病毒均无扩增反应，并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化观察；扩增反应只需要在常规水浴锅中进行，45min之内可完成反应;该方法对新型鸭呼肠孤病毒RNA的最小检测限为1pg，灵敏度是一步法RT-PCR方法的100倍。结论：本研究建立的RT-LAMP方法简便、快速、灵敏、特异，适合在基层进行新型鸭呼肠孤病毒的快速检测。

分类号： S858.32:S852.65

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