您好，欢迎访问广东省农业科学院 机构知识库！
广东省农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备

文献类型： 会议论文

第一作者： 王洪星

作者： 王洪星 1 ; 龚殿 1 ; 孙玉娟 1 ; 张雨良 1 ; 王健华 2 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口 571101

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口 57

关键词： 甘蔗;高粱花叶病毒;外壳蛋白;原核表达;抗血清制备

会议名称： 中国作物学会甘蔗专业委员会第15次学术研讨会

主办单位： 中国作物学会甘蔗专业委员会

页码： 204-210

摘要： 高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大.本研究根据SrMV外壳蛋白(coatprotein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987bp的目的片段.将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP.然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带.融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达.通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1mmol/L,诱导时间为4h,诱导温度为30℃.用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清.通过酶联法(ID-ELISA)测定本实验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1:1000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应.对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测.

分类号： S435.661

  • 相关文献

[1]高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备. 龚殿,孙玉娟,张雨良,王健华,刘志昕. 2013

[2]感染高梁花叶病毒甘蔗叶片cDNA文库构建及评价. 张雨良,张树珍,王健华,熊国如,王俊刚,余乃通,刘志昕. 2012

[3]感染高粱花叶病毒甘蔗叶片cDNA文库构建及评价. 张雨良,张树珍,王健华,熊国如,王俊刚,余乃通,刘志昕. 2012

[4]水稻瘤矮病毒S9基因的生物信息学分析及原核表达蛋白的抗血清制备. 赵芹,邓永枢,阮小蕾,李华平. 2010

[5]水稻瘤矮病毒S11基因沉默抑制子的原核表达及抗血清制备. 赵芹,沈文锦,张翼翔,刘福秀,李华平. 2010

[6]广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备. 赵芹,李华平,何自福,佘小曼,谢大森,何晓明,彭庆务. 2011

[7]番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用. 赵芹,李华平,谢大森,何晓明,张曙光,罗少波. 2012

[8]香蕉束顶病毒Haikou 2分离物DNA2编码框原核表达及抗血清制备. 谭老喜,王洪星,张雨良,王健华,章绍延,周朋,余乃通,刘志昕. 2012

[9]槟榔植原体膜蛋白基因的克隆及其抗血清制备. 杨文君,余乃通,张雨良,王健华,刘志昕. 2014

[10]感染高粱花叶病毒甘蔗叶片cDNA文库构建及评价. 张树珍,王健华,熊国如,王俊刚. 2014

[11]高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证. 张雨良,黄启星,张树珍,王健华,余乃通,刘志昕. 2014

[12]高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证. 张雨良,黄启星,张树珍,王健华,余乃通,刘志昕. 2012

[13]番木瓜畸形花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及序列分析. 汪倩,谭德冠,吴丽娟,孙雪飘,张家明. 2012

[14]重组小麦静息巯基氧化酶的表达、酶学特性及其对面包品质的影响. 杜念,邓媛元,魏振承,张雁,唐小俊,李萍,周鹏飞,刘光,张名位. 2021

[15]非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 姜林林,宋帅,蔡汝健,蒋智勇,李艳,勾红潮,楚品品,李春玲. 2021

[16]黑芝麻多酚氧化酶的重组表达及其酶学特性. 叶彩燕,刘光,杜念,张瑞芬,刘磊,贾栩超,张名位. 2021

[17]1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性. 齐冬梅,袁建丰,覃宗华,吴彩燕,谢明权. 2011

[18]柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆、原核表达及酶活性分析. 廖申权,吴彩艳,戚南山,李娟,吕敏娜,张健騑,谢明权,孙铭飞. 2015

[19]绿色木霉TvALP-linker-TvRBL融合基因的构建与原核表达. 徐杨玉,温世杰,李海芬,李玲,梁炫强. 2015

[20]锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达. 柯浩,刘振兴,林敏,孟轩,陈棠堂. 2010

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：广东省农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台