文献类型： 会议论文
第一作者： 林裕胜
作者： 林裕胜 1 ; 江锦秀 1 ; 张靖鹏 1 ; 游伟 1 ; 胡奇林 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建福州 350013
关键词： 丝状支原体山羊亚种;实时荧光定量PCR;检测体系
会议名称： 福建省科协第十七届学术年会畜牧业分会场——福建省畜牧兽医学术年会
主办单位： 福建省畜牧兽医学会`福建省畜牧业协会
页码： 00000173-00000179
摘要： 为建立一种检测丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,本研究根据Mmc的MLC_1770基因序列设计特异性引物,以构建的Mmc-1770重组质粒为阳性标准品绘制标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏性和重复进行验证.建立的标准曲线相关系数为0.999,扩增效率为101.3％;该方法特异性较好与山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)、大肠杆菌(Escherichia coli,Ec)、巴氏杆菌(Pasteurellamultocida,Pm)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,HPS)、绵酶炎支原体(Myplasma ovipenumoniae,Mo)、羊传染性脓疱毒(orf virus,ORFV)均无交叉反应;最低检测限为226拷贝/uL,比常规PCR高100倍;组内变异系数为0.54％-0.79％,组间变异系数为0.70％-0.96％.表明该方法具有特异性强,重复性好,检测速度快等优点,适用于临床样品中Mmc的快速准确检测.
分类号： S858.27:S852.62
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