文献类型: 会议论文
第一作者: 陈如敬
作者: 陈如敬 1 ; 陈秋勇 1 ; 吴学敏 1 ; 严山 1 ; 车勇良 1 ; 王晨燕 2 ;
作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013
2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治
关键词: 猪;轮状病毒感染;实验室诊断;实时荧光定量RT-PCR方法
会议名称: 福建省第十一届猪病学术研讨会暨猪产业高峰论坛
主办单位: 福建省畜牧兽医学会
页码: 00000076-00000083
摘要: 为建立检测猪轮状病毒(Porcine Rotavirus)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,本研究根据GenBank中登录猪轮状病毒的VP6基因序列特征,设计特异性的引物和探针,建立检测猪轮状病毒的TaqMan实时荧光定量PCR方法.建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法敏感性高,最低可检测19.3拷贝/uL;特异性强,对猪常见病原(如猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒和猪流行性乙型脑炎病毒等)检测均为阴性;重复性好,扩增相关系统为0.999,其组内和组间变异系数分别为0.25%-1.26%和0.31%1.49%.对临床收集的79份猪腹泻病料进行常规RT-PCR检测,结果可见阳性样品4份,阳性率为5.06%(4/79).对这79份进行的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测结果为阳性6份,阳性率为7.59%(6/79).同时,4份经RT-PCR检测为阳性的样品经TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测均为阳性,符合率为100%.本方法的建立为猪轮状病毒病的早期诊断及感染水平的定量分析提供了新的检测手段.
分类号: S858.28:S855.3`S854.43
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