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猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

文献类型： 会议论文

第一作者： ZHANG Yan

作者： ZHANG Yan 1 ; 张艳 2 ; WANG Wen-xiu 3 ; 王文秀 4 ; LIU Hai-long 2 ; 刘海隆 1 ; CAO Zong-xi 2 ; 曹宗喜 1 ; TAN Shu-yi 3 ; 谭树义 5 ;

作者机构： 1.海南省农业科学院畜牧兽医研究所,海口 571100

2.海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海口 571100

3.海南省院士工作站(畜牧兽医),海口 571100

4.山东省滨州畜牧兽医研究院,滨州,山东 256600

5.海南省农业科

关键词： 猪炎性疾病;NLRP3蛋白;原核表达;多克隆抗体

会议名称： 第十八届中南实验动物学会科技交流会

主办单位： 郑州大学`河南省实验动物学会

页码： 00000001-00000007

摘要： 目的：获得猪源NLRP3重组蛋白以及针对猪NLRP3蛋白的多克隆抗体. 方法：采用原核表达技术对猪源NLRP3蛋白的主要抗原区域进行了截短表达与鉴定,并以重组蛋白为免疫原免疫兔制备兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体. 结果：经RT-PCR方法扩增到大小为864bp的NLRP3蛋白的主要抗原区域基因,将目的片段定向克隆至pET-30a原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导获得了大小为50Ku的重组蛋白,重组蛋白经纯化后Western blot检测其可与抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,以纯化蛋白为免疫原制备的兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体的抗体效价达1：25600,Western blot检测其可与NLRP3重组蛋白发生特异性反应. 结论：获得了具有良好反应活性的NLRP3重组蛋白与多克隆抗体,为研究NLRP3蛋白的结构与功能、NLRP3蛋白与猪炎症性疾病的相互作用机制奠定了基础.

分类号： S858.28:S852.43

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[1]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. 张艳,王文秀,刘海隆,曹宗喜,谭树义. 2019

[2]巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达. 王文秀,张艳,王宝琴,谢金文,刘博,沈志强. 2017

[3]海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达. 杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军. 2014

[4]鸡柔嫩艾美耳球虫HN株3-1E基因的原核表达与鉴定. 张艳,刘海隆,曹宗喜,林哲敏,谭树义. 2015

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[6]水芹HSP90基因的原核表达及条件优化. 胡艳平,蔡兴来,周曼,王敏,朱白婢,黄文枫,廖道龙,陈贻诵. 2019

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