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一种检测鱼类精子质膜损伤的方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 中国水产科学研究院东海水产研究所

发明人： 黄晓荣;章龙珍;庄平;江琪;姚志峰;刘鉴毅;张涛;冯广朋;赵峰;闫文罡

专利号： CN200910048126.5

摘要： 一种检测鱼类精子质膜损伤的方法，涉及水产养殖技术，需要提供一种检测鱼类精子质膜损伤的方法，本发明采集鱼类精子，其特征是将精子收集到10mL的离心管中，加入2uL胰蛋白酶消化5min，用缓冲液洗涤重新悬浮精子，使精子细胞浓度为1-2×105·mL-1；取195μL精子悬液，加入5μL Ann-FITC，在室温下孵化，然后加入10μLPI染液，室温下避光孵育10-15min；通过采用荧光双染法对受到不同损伤的精子进行染色，经过前处理后直接用流式细胞分析仪进行检测，可定量区分质膜完整的精子和质膜不完整的精子。

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