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检测猪胸膜肺炎放线杆菌野毒感染的试剂盒

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 江苏省农业科学院

发明人: 何孔旺;彭小华;王芳;邱索平;张雪寒;倪艳秀;郭容利;俞正玉;陆承平

专利号: CN200510038211.5

摘要: 一种检测胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,App)野毒感染的试剂盒,其组成成分如下:细菌毒素ApxIV纯化表达蛋白包被好的酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG抗体、柠檬酸、碳酸氢二钠、EDTA缓冲系统加TMB构成的显色系统、阳性血清、阴性血清和试剂盒说明书。其特征是利用聚合酶链反应(PCR)从App血清1型的ApxIV基因中扩增出目的基因,构建了含目的基因的表达质粒pET32a-ApxIV,该质粒转化入宿主菌BL21(DE3),体外表达蛋白经镍柱纯化后作为抗原,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法并优化反应条件形成了检测试剂盒,该试剂盒在App的诊断、流行病学调查和免疫监测等方面具有重要应用价值。

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