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水稻蔗糖转运蛋白OsSUT4基因的克隆与功能分析

河南农业科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:克隆水稻蔗糖转运蛋白OsSUT4基因,利用酵母异源表达系统验证OsSUT4蔗糖转运功能,并在水稻中过表达,观察转基因植株表型,鉴定其耐盐性和抗旱性,探究OsSUT4基因在水稻抗逆中的作用,为水稻遗传改良提供新的基因资源和理论依据。结果表明,OsSUT4基因主要在拔节期的剑叶中表达;利用酵母异源表达系统首次验证了OsSUT4具有蔗糖转运功能;过表达OsSUT4基因没有明显改变籽粒的形态和千粒质量,但显著提高了株高和盐、干旱胁迫条件下的存活率,增强了水稻的耐盐性和抗旱性。

关键词: 水稻 蔗糖转运蛋白 过表达 株高 耐盐性 抗旱性

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化学发光免疫分析法及其在动物健康养殖中的应用

动物医学进展 2025 北大核心 CSCD

摘要:化学发光免疫分析法(CLIA)作为一种分析技术,以其高灵敏度和操作简便等诸多优点,在生命科学和临床诊断等领域中有着巨大的应用潜力,并在动物疾病诊断中扮演了举足轻重的角色。论文系统性地回顾了CLIA的基本原理和技术特点,以及该技术的技术演进过程;围绕CLIA在动物健康养殖中的实际应用情况、存在的问题以及未来的发展趋势进行了深入探讨,以期为该技术在畜禽养殖生产检测领域的研究和应用提供参考。

关键词: 化学发光免疫分析法 动物健康养殖 应用

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miR-665靶向BCL2L11调控武安山羊成肌细胞增殖

畜牧兽医学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:旨在利用分子生物学方法探究miR-665靶向调控BCL2L11对山羊成肌细胞增殖的影响。本研究选取1月龄和9月龄的健康山公羊各3只,各年龄段体重均接近且饲养环境相同。本试验通过RT-qPCR分析BCL2L11在武安山羊不同组织中的表达情况;利用RT-qPCR检测了不同月龄武安山羊背最长肌组织中BCL2L11和miRNA-665的表达情况;构建了BCL2L11 3′UTR野生型和突变型载体,以及miR-665 mimics和对照组,将其共转染到HEK293T细胞,通过使用双荧光素酶报告基因检测系统鉴定了miR-665与BCL2L11存在靶向性关系。在山羊成肌细胞转染miR-665 mimic及阴性对照,采用RT-qPCR检测了细胞凋亡标志因子XIAP和Fas表达水平,同时利用EdU试验分析miR-665过表达对山羊成肌细胞增殖的影响。结果表明,BCL2L11在背最长肌组织中高表达;miR-665和BCL2L11在9月龄和1月龄山羊背最长肌组织中表达情况存在差异,miR-665在1月龄的表达量高于9月龄,而BCL2L11则相反,两者存在负调控现象;通过双荧光素酶报告分析显示,当转染过表达miR-665 mimic后,显著抑制了BCL2L11荧光素酶的活性,同时靶基因BCL2L11的mRNA表达水平也明显降低。为进一步验证miR-665的功能,转染miR-665 mimic后发现细胞凋亡标志基因XIAP与Fas的表达量也显著降低;EdU试验分析显示,过表达miR-665后促进了成肌细胞的增殖。综上所述,在山羊背最长肌组织中miR-665作为BCL2L11的调控元件,能够显著抑制山羊成肌细胞中BCL2L11的表达水平,当miR-665过表达后,能够促进成肌细胞的增殖情况。

关键词: miR-665 BCL2L11 肌肉 武安山羊 成肌细胞

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哺乳动物卵泡发育阶段颗粒细胞增殖与分化的研究进展

畜牧兽医学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:在哺乳动物的繁殖过程中,精子和卵子的发生以及受精卵的发育都至关重要。目前,有关哺乳动物卵母细胞成熟发育的研究不在少数,但对其保卫细胞-颗粒细胞是如何对卵母细胞发育产生作用的还有待深入探索。在雌性哺乳动物中,早期卵巢颗粒细胞是由卵巢网和卵巢表皮细胞发育而来的;此后的前体颗粒细胞阶段就围绕于卵母细胞周围,通过间隙连接方式为卵母细胞提供营养物质并进行信息交流,并依赖繁殖激素(如AMH、FSH、LH)调节作用进而对卵母细胞成熟进行调控。本文通过综述哺乳动物卵巢颗粒细胞的来源、颗粒细胞在卵泡各发育阶段的分化及其在卵母细胞成熟过程的功能机制,以期为进一步研究哺乳动物卵巢颗粒细胞的生物学功能提供帮助,并为体外卵母细胞成熟培养体系提供优化思路。

关键词: 卵巢 颗粒细胞 卵母细胞 哺乳动物 增殖与分化

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拮抗菌复合保鲜纸的制备及其对苹果保鲜中的应用

食品工业科技 2025 北大核心 CSCD

摘要:为研究拮抗菌复合保鲜纸的性能及其在室温下对嘎啦苹果的生理品质及保鲜效果的影响,同时解决拮抗菌在应用中难于萌发、受环境影响大等局限性,本研究以膜醭毕赤酵母为拮抗菌,添加至1.16%明胶和2%的海藻糖混合液中,结合纸基材料制备成拮抗菌复合保鲜纸,并对复合保鲜纸进行表征、物理性能和热稳定性能分析,分析其对嘎啦苹果自然发病率、病斑直径、失重率、硬度、褐变度、还原糖、可滴定酸、维生素C和可溶性固形物的影响,综合评价复合保鲜纸对嘎啦苹果的保鲜效果。结果表明,含菌保鲜基液使链格孢霉菌孢子表面皱缩变形,形态破坏。含菌浓度为108 CFU/mL的保鲜液与纸基材料紧密结合。复合保鲜纸的吸水率为768.94%±38.05%,有较高吸水率;厚度为0.232±0.008 mm,抗张强度为13.88±0.59 N/mm2,断裂伸长率6.33%±0.58%,表明复合保鲜纸具有良好的物理性能;在320~450℃范围内存在主要的质量损失,800℃时残留率为5.31%,具有良好的热稳定性。活体应用表明,复合保鲜纸可以有效延缓接种果实的病斑扩展,降低了果实的失重率和褐变度并保持了果实的硬度,延缓了果实维生素C、还原糖和可溶性固形物含量的降低,维持了果实良好的感官品质和生理品质,延长了贮藏时间。该复合保鲜纸具有较好的物理性能和热稳定性能,较好维持了采后嘎啦苹果的贮藏品质,不仅为拮抗酵母的抑菌保鲜提供了新思路,也为新型生物保鲜纸的开发与保鲜应用提供了参考。

关键词: 拮抗酵母 含菌保鲜基液 复合保鲜纸 苹果 保鲜效果

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植物基因组DNA的高效提取方法

分子植物育种 2025 北大核心 CSCD

摘要:为获得适于大白菜、萝卜等十字花科植物基因组的高效提取方法,提高十字花科植物分子标记辅助育种工作的效率,本试验对植物中5种常规的DNA提取方法进行优化并以DNA质量、保存时间进行评估。结果发现常规提取方法中改良后的快提DNA释放法兼具安全、环保的优点,能极大限度地缩短提取时间,简化提取步骤,提取96个样本的DNA最快仅需15 min,若同时配套高通量设施更可显著提高实验效率,DNA保存时间建议控制在30 d内。此外,利用该方法对植物种子、胚根、胚芽、叶片进行提取比较试验,发现该方法对植物样本的状态要求低,催芽1~2 d的种子即可满足PCR扩增实验的要求,可适用于大样本量的规模化基因型鉴定。本研究不仅为DNA提取方法的选择提供了科学的参考依据,还对加速分子育种研究的发展具有重要意义。

关键词: 大白菜 萝卜 DNA提取方法 高效

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中国花椰菜育种50年回顾与进展

园艺学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:系统回顾了中国花椰菜育种50年来的研究进展与成果,在花椰菜种质资源的搜集、鉴定、评价、利用与创制、重要基因挖掘与功能鉴定、现代分子育种、新品种选育等领域取得的重要突破。通过搜集、引进和创制国内外种质资源,逐渐形成了中国福建、广东、温州、上海等地方特色品种及欧洲、日本类型品种,显著丰富了我国花椰菜的遗传资源多样性。单倍体育种、基因组学、分子标记辅助育种等技术取得突破性进展,创制了抗病、抗逆、优质及雄性不育等关键种质资源,推动了花椰菜主栽品种的培育。品种选育经历了常规育种、自交不亲和系利用、雄性不育系应用等阶段,逐步构建了现代商业化育种体系,选育一批优良品种,实现了种源的自主可控。目前,我国的花椰菜育种仍面临着优异种质资源匮乏、核心基因挖掘不足、品种同质化、抗逆性不足等问题。未来应聚焦功能化与优质化、多抗广适性、宜机化轻简化栽培、小型化与多样化品种培育等,同时加强种质资源共享与分子育种技术应用,以应对气候变化与产业升级的挑战。

关键词: 花椰菜 育种 种质资源 品种 发展趋势

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辣椒炭疽病病原菌中分泌蛋白的预测及特性分析

江苏农业学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:由辣椒炭疽病病原菌引起的辣椒炭疽病严重危害着中国辣椒产业的健康发展。分泌蛋白作为炭疽病病原菌中重要的致病因子,能帮助病原菌侵入寄主组织、分解寄主细胞壁,为病原菌生存和繁殖提供条件。然而,学术界尚缺乏对辣椒炭疽病病原菌中分泌蛋白的深入解析和研究。本研究基于前期获得的辣椒炭疽病病原菌强致病菌株TJNH1全基因组序列,充分利用SignalP、ProtComp等生物信息学分泌蛋白预测软件,对该病菌中13 419条蛋白质氨基酸序列进行预测,同时,基于转录组测序数据,对上述分泌蛋白的功能及特性展开研究。结果表明,辣椒炭疽病病原菌菌株TJNH1中含有388个分泌蛋白,占总蛋白质数量的2.89%,分泌蛋白氨基酸序列长度介于55 aa至730 aa,非极性氨基酸丙氨酸(Ala)在分泌蛋白里使用频率最高,分泌蛋白信号肽长度集中于17 aa至21 aa,信号肽切割位点为A-X-A型。分泌蛋白均为亲水性蛋白,高亲水性氨基酸和高疏水性氨基酸数量最多的分别是天冬酰胺(Asn)和丙氨酸(Ala),分泌蛋白大多为稳定、酸性蛋白。同时运用SMART、eggNOG、STRING V11.5等软件对上述分泌蛋白的保守结构域、COG功能分类、蛋白质互作关系等进行分析,有152个分泌蛋白具有明显的保守结构域,163个分泌蛋白获得了功能注释,32个分泌蛋白存在互作关系。该研究结果为明确分泌蛋白的功能和辣椒炭疽病病原菌的致病机理提供了理论支撑,也为筛选以分泌蛋白为靶标的新型农药和辣椒炭疽病绿色防控提供了理论依据。

关键词: 辣椒炭疽病病原菌 分泌蛋白 生物信息学分析

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低蛋白饲粮中添加丁酸梭菌对肉鸡生长性能、肠道发育及免疫功能的影响

中国畜牧杂志 2025 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究低蛋白饲粮中添加丁酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)对肉鸡生长性能、肠道发育及免疫功能的影响.选取 720 只 1 日龄健康、初始体重相近的 817 肉鸡,随机分为 3 组,每组 6 个重复,每个重复 40 只鸡.对照组(CON组)饲喂基础饲粮(蛋白质水平 20.62%),低蛋白组(LP组)饲喂低蛋白饲粮(蛋白质水平18.63%),丁酸梭菌组(CB组)饲喂低蛋白饲粮并添加5×108 CFU/kg CB.试验期共42 d.结果表明:LP组肉鸡29~42 d平均日增重(ADG)低于CON组(P<0.05),15~28 d与29~42 d耗料增重比(F/G)高于CON组(P<0.05),与LP组相比,CB组肉鸡 15~28 d与 1~42 d F/G降低(P<0.05),29~42 d ADG升高(P<0.05);LP组肉鸡 14、28、42 日龄血清免疫球蛋白(Ig)A、28 日龄IgG和IgM、42 日龄IgM含量均低于CON组(P<0.05),与LP组相比,CB组肉鸡 14、28、42 日龄IgA、28 日龄IgG和IgM、42 日龄IgM含量均升高(P<0.05);LP组肉鸡 28 日龄十二指肠绒毛高度(VH)与绒隐比(VH/CD)、28日龄回肠VH、42 日龄十二指肠VH均低于CON组(P<0.05),与LP组相比,CB组肉鸡 28 日龄各肠段的VH与VH/CD、42 日龄肉鸡十二指肠和空肠的VH以及回肠VH/CD均升高(P<0.05),十二指肠VH/CD升高(P<0.01);与CON组相比,LP组肉鸡 14、28、42 日龄空肠肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达量均升高(P<0.05),与LP组相比,14、28、42 日龄时,CB组肉鸡空肠TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA相对表达量均降低(P<0.05),空肠Toll样受体(TLR)2(P<0.01)、TLR4(P<0.01)、核因子-κB(NF-κB)(P<0.05)mRNA相对表达量升高,42 日龄空肠ZO-1、Claudin-1以及Occludin mRNA相对表达量均升高(P<0.05).由此可见,在低蛋白饲粮中添加CB可改善肉鸡生长发育,同时可缓解低蛋白饲粮造成的肠道炎症反应和屏障损伤.

关键词: 低蛋白饲粮 丁酸梭菌 生长性能 肠道健康 肉鸡

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基于极端混合池全基因组重测序的茄子果实硬度基因定位

华北农学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为系统研究果实硬度相关基因,通过基因组重测序BSA方法定位果实硬度关联区间,并根据其对应的参考基因组共线性区段和基因注释信息预测候选基因,为下一步基因克隆奠定基础。以稳定遗传的软肉自交系C18与硬肉自交系LE4杂交,F2后代的果实硬度分离呈正态分布。在F2群体中分别选取30株软肉和30株硬肉单株构建极端混合池,对混合池样本和双亲材料分别开展30×和10×覆盖度的全基因组重测序。重测序共获得1 891 040个单核苷酸多态性(SNPs)标记及376 603个插入缺失(InDels)标记,用于果实硬度性状的全基因组定位。BSA定位峰值位于茄子第6号染色体,从72 610 411到75 329 951 bp,共计2.71 Mb。根据通路富集和基因功能注释,筛选到候选基因Smechr0601726.1和Smechr0601735.1。综上,通过基因组重测序BSA分析可知,茄子果实硬度可能由2个重要的候选基因进行调控,Smechr0601726.1编码多聚半乳糖醛酸酶基因,与果实硬度直接相关;Smechr0601735.1与抗坏血酸和阿糖二酸代谢密切相关,编码抗坏血酸过氧化物酶,与果实发育和硬度形成有关,可以延缓果实软化。

关键词: 茄子 极端混合池 全基因组重测序 果实硬度 基因定位

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