科研产出
铁皮石斛DoSMT2基因的克隆与表达分析
《热带亚热带植物学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了解SMT2基因在铁皮石斛(Dendrobium officinale)甾醇代谢过程中的作用,利用RACE技术克隆到1个DoSMT2基因,开放阅读框为1089 bp,编码362个氨基酸,DoSMT2相对分子量为40.345 kD,理论等电点为8.13,属于稳定的亲水性蛋白.经BLAST P检索,DoSMT2蛋白属于AdoMet-MTases超级家族,含有4个S-腺苷蛋氨酸结合位点、1个甲基转移酶保守结构域和1个甾醇甲基转移酶C末端保守结构域.系统进化分析表明,DoSMT2与深圳拟兰(Apostasia shenzhenica)的SMT2亲缘关系最近,确定其属于SMT2家族.qRT-PCR分析结果表明,DoSMT2基因在茎和叶都能表达,10月份的表达量最高,叶片的表达量显著高于茎,推断叶片的甾醇代谢比茎活跃.构建了pET-29a-DoSMT2原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达出预期大小的蛋白.这为铁皮石斛DoSMT2的甲基化机制及甾醇化合物代谢研究奠定基础.
关键词： 铁皮石斛 甾醇C-24甲基转移酶 原核表达 荧光定量PCR
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基于环介导等温扩增技术的玫烟色棒束孢可视化检测
《中国生物防治学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea是一种重要的虫生真菌,已成为微生物源农药的一个要资源.由于缺乏有效手段,无法对罹病害虫中玫烟色棒束孢进行大量、快速、准确的检测,严重制约了该生防菌株防治效果的科学评价.本研究通过环介导等温扩增(LAMP)技术的引物设计和体系优化,建立了玫烟色棒束孢菌株可视化的LAMP检测方法.该检测方法特异性强,准确率高,与其他常见生防菌株和病原菌无交叉反应;检测时间短,60min可得到阳性结果;灵敏度高,是常规PCR方法的100倍.该方法的建立为田间条件下玫烟色棒束孢菌株的毒力测定与安全性评价提供了新技术.
关键词： 虫生真菌 玫烟色棒束孢 环介导等温扩增 可视化检测
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不同生长阶段墨瑞鳕脂肪酸组成及主成分分析
《核农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为比较不同生长阶段墨瑞鳕肌肉中脂肪酸组成的变化,本研究通过气相色谱技术测定墨瑞鳕幼鱼、成鱼、亲鱼肌肉中脂肪酸含量,并对脂肪酸组成进行主成分分析。结果表明,3个不同生长阶段墨瑞鳕的不饱和脂肪酸(UFA)总量分别为52.2%、58.2%、60.1%;在高度不饱和脂肪酸(HUFA)中DHA含量均最高。随着鱼体生长,墨瑞鳕棕榈油酸、油酸、亚油酸、亚麻酸含量均呈上升趋势,从高到低依次为亲鱼>成鱼>幼鱼;肉豆蔻酸、花生一烯酸、花生四烯酸、EPA、DHA含量呈下降趋势,从高到低依次为幼鱼>成鱼>亲鱼;UFA总量和单不饱和脂肪酸(MUFA)含量呈上升趋势,从高到低依次为亲鱼>成鱼>幼鱼;多不饱和脂肪酸(PUFA)总量和必需脂肪酸(EFA)总量含量呈先升后降趋势,从高到低依次为成鱼>亲鱼>幼鱼。墨瑞鳕不同生长阶段脂肪酸含量大部分存在显著差异,特别是幼鱼与成鱼的脂肪酸含量(除二十碳三烯酸外)均存在显著差异;肉豆蔻酸、花生一烯酸、花生四烯酸、EPA和DHA等5种脂肪酸是墨瑞鳕的主要特征脂肪酸,这5种主要特征脂肪酸之间均互呈强正相关。随着墨瑞鳕的生长发育应及时提高相应阶段功能性脂肪酸的比例,降低相应阶段呈强负相关的主要特征脂肪酸的比例。本研究结果为墨瑞鳕的开发利用以及饲料营养需求等提供了理论参考。
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不同温度下圆叶决明降解过程红壤可溶性氮及氮水解酶动态变化研究
《草地学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了探明圆叶决明(Chamaecrista rotundifolia)降解过程果园红壤供氮水平的变化规律,本研究采用模拟培养试验,研究15℃和25℃培养果园红壤硝态氮、铵态氮、可溶性总氮、可溶性有机氮含量的变化及脲酶、蛋白酶、天冬酰胺酶活性的变化。结果表明,圆叶决明降解过程果园红壤4种可溶性氮含量均显著提高,且在培养140 d达到最大值,25℃培养的效果更佳。其中,可溶性总氮、可溶性有机氮和硝态氮含量随时间的动态变化可用三次曲线方程来拟合。圆叶决明降解过程还能显著提高脲酶、蛋白酶和天冬酰胺酶的活性,其中蛋白酶活性和脲酶活性的变化可用指数方程和三次曲线方程来拟合。本研究认为圆叶决明降解过程可提高果园红壤可溶性氮含量,因此可通过翻压圆叶决明提高土壤的供氮水平。
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中国普通野生稻重要农艺性状的遗传多样性研究
《植物遗传资源学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是水稻(O.sativa L.)的野生近缘种,是水稻遗传改良的重要资源.本研究以覆盖除云南外的中国普通野生稻分布区的1777份种质资源为对象,进行抽穗期、花药长度、粒长、粒宽和粒重5个重要农艺性状的遗传多样性、主成分和方差分析.结果 表明,中国普通野生稻具有丰富的遗传多样性,抽穗期、花药长度、粒长、粒宽和粒重的变异系数分别是6.36%、17.10%、7.32%、8.86%和15.90%,多样性指数分别是1.30、1.47、1.45、1.39和1.33.主成分分析表明第1和第2主成分主要与产量性状有关,累计贡献率达到83.31%;第3主成分主要与抽穗期有关,前3个主成分的累积贡献率约为95.46%.主成分分析结合聚类分析,发现普通野生稻群体可以分成3个类群,类群1主要来自江西和湖南,类群2主要来自于广西和广东大部分区域和福建,类群3主要来自于海南和广东南部区域的湛江市,样品的聚类关系和地理位置成正相关.以地理群为因素对5个重要农艺性状进行方差分析,结果显示花药长度、抽穗期和粒长变异在不同地理群间的变异占总变异的比例分别为69.09%、57.98%和77.56%,而粒宽变异所占比例为6.20%,花药长度、抽穗期和粒长变异在普通野生稻地理群间差异起决定作用.
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中国野生稻种质资源调查收集与保护
《植物遗传资源学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：野生稻是水稻基础研究与育种的战略性资源,野生稻的保护与利用直接关系到国家的粮食安全.我国是世界上野生稻种质资源分布最丰富的国家之一,由于经济的高速发展,野生稻栖息地遭到严重破环,一些重要居群濒临灭绝.自1996年开始,农业农村部设立专项对我国野生稻种质资源进行系统调查和收集,并实施了异位保存和原生境保护项目.本文全面总结了全国野生稻种质资源调查、取样、异位保存与原生境保护的技术、方法和成效,并通过对我国野生稻种质资源现状评估和未来水稻育种和生物技术研究发展趋势的分析,提出了我国野生稻保护与利用的建议.
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利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白
《昆虫学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子.[方法]利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况.再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系.[结果]构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性.序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC).酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作.GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用.[结论]通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作.这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础.
关键词： 西花蓟马 酵母双杂交 番茄环纹斑点病毒 NSs蛋白 VDAC
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镉胁迫对姬松茸菌丝生理指标与镉吸收的影响
《农业环境科学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了比较镉胁迫对不同姬松茸菌株(J1、J77)菌丝生长与镉吸收的影响,通过室内培育试验,设立0~75 mg·kg-1的不同镉胁迫浓度梯度,测定其对姬松茸菌丝生理指标与镉含量的影响.结果显示,不同镉浓度胁迫处理对J77和J1菌丝抗氧化系统的影响各异.当镉浓度为5 mg·L-1时,J1与J77菌丝SOD酶活性分别增加121.5%、157.5%;当镉浓度高于5 mg·L-1时,两个菌株菌丝SOD酶活性均开始降低.在10~75 mg·L-1中高镉浓度胁迫范围,J77、J1菌丝的POD酶活性分别减少92.7%、95.3%.在5~50 mg·L-1镉浓度胁迫范围,J77、J1菌丝的CAT酶活性分别减少40.9%、60.4%,随着镉胁迫浓度增加,J1的镉毒害更为严重.在0~2 mg·L-1镉浓度范围内,J1与J77菌丝的APX酶活性分别增加7.9、13倍,两菌株相差近5倍,J77菌丝APX酶活性反应大于J1菌丝.不同浓度镉胁迫处理条件下(0~75 mg·L-1),J1菌丝丙二醛(MDA)显示了较大幅度的提升,氧化程度比较剧烈,而J77在整个过程则提升幅度较缓,氧化应激程度相对较低.当镉胁迫浓度为10 mg·L-1时,J1菌丝MDA含量比对照高1.6倍并达到最大值;当镉浓度为15 mg·L-1时,J77菌丝MDA含量比对照高60%并达到最大值,J1、J77的MDA最大值相差近1倍,J1菌丝细胞膜过氧化反应比J77更为强烈.在0~75 mg·L-1浓度范围内,J77与J1菌丝中镉含量的浓度均随着外源镉含量的提高而增加.当镉浓度在2.5~50 mg·L-1范围内,J1、J77菌丝镉含量分别增长了17.2、19.1倍;但就镉吸收累积量而言,J1菌丝比J77菌丝镉含量高近2.3倍;J77不仅对高镉胁迫的耐受程度高于J1,而且J77抵制镉吸收能力高于J1.结果表明,姬松茸J1和J77菌丝SOD、POD、CAT、APX酶活性及MDA含量随镉含量变化均表现为"低促高抑"的现象,J77菌丝镉含量低于J1,J77具有抵制镉吸收的潜力.
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树形改造对'巨峰'葡萄叶片光合特性和果实品质的影响
《北方园艺 》 2020 北大核心
摘要：以设施栽培条件下的'巨峰'葡萄为试材,比较"一"字形和高干倒伞形2种树形对葡萄叶片光合特性、果实品质的影响,以期为葡萄栽培中树形选择提供参考依据.结果表明:"一"字形能显著提高设施葡萄植株叶片光合特性,糖酸比显著提高,果实风味更佳,改善了果实品质.树形改造第2年产量降低明显,改造第3年产量大幅度提高但仍低于高干倒伞形,由于果实品质改善,出园单价提高,总体效益与对照差异不大.树形改造后第3年,与对照相比,"一"字形促进了巨峰葡萄叶片叶绿素合成,在花后76 d改造树形叶绿素总含量显著高于对照,提高了叶片光合性能,对照在11:00时午休现象较严重,"一"字树形增加了PSⅡ实际光化学量子产量Y(Ⅱ)和电子传递效率(ETR);增强了光合活性和光保护能力,提高了光化学淬灭系数(qP)和非光化学淬灭系数(NPQ);显著提高了果实可溶性固形物含量和可溶性糖含量;糖酸比2年分别比对照提高了23.8%和47.4%;单粒质量和果皮花色苷含量差异不显著;改造树形显著降低了果实可滴定酸含量,2年分别比对照降低了13.6%和30.8%,抗坏血酸含量略有降低.
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不同蛋白质水平日粮对妊娠后期母猪产仔性能、血清生化指标和氮排泄量的影响
《畜牧与兽医 》 2020 北大核心
摘要：探讨在理想氨基酸模式下日粮蛋白质水平对妊娠后期母猪产仔性能、血清生化指标和粪氮排泄量的影响.选用3~7胎次、体况相似、预产期相近的60头长*大二元杂交母猪,随机分成4个处理组,日粮组蛋白(CP)水平分别为:15.0%、14.0%、13.0%和12.0%,通过添加赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸和苏氨酸保证4个处理组饲料中可消化赖氨酸∶可消化苏氨酸∶可消化蛋氨酸∶可消化色氨酸的比值(100∶72∶27∶16)一致.每组15头母猪.试验期始于配种后80 d,终于产仔结束.结果:日粮粗蛋白质水平降低1~2个百分点,对妊娠后期母猪产仔性能无显著影响(P>0.05);13.0%CP组的初生窝重比12.0%CP组显著增加7.42%(P<0.05),低蛋白组(13.%CP组和12.0%CP组)的血清尿素氮浓度比高蛋白组(15.0%CP组和14.0%CP组)显著降低(P<0.05);13.0%CP组的血清肌酐浓度比12.0%CP组显著降低7.02%(P<0.05);13.0%CP组血清游离赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸和总氨基酸浓度显著低于15.0%CP组(P<0.05);随着日粮蛋白质水平的降低,粪氮排泄量显著减少(P<0.05).
关键词： 妊娠母猪 低蛋白日粮 产仔性能 血清生化指标 氮排泄量
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