草鱼养殖池塘蓝藻暴发时水体细菌群落特征分析

李建松; 王广军; 龚望宝; 谢骏; 余德光; 郁二蒙; 魏南; 夏耘; 《上海海洋大学学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为了解蓝藻暴发池塘中细菌群落特征,采集3个地区(广东、云南、贵州)4个淡水养殖场的蓝藻暴发池塘和非蓝藻暴发池塘(对照池塘)水样,并检测其理化因子及生物指标,采用PCR-DGGE技术分析其细菌群落结构差异。依据PCR-DGGE指纹谱带的丰度对养殖水体细菌群落多样性进行了分析,并对水体细菌群落结构进行了UPGMA聚类分析。结果发现:蓝藻暴发池塘水体的PO_4-P含量均显著高于对照池塘(P<0.01);线性回归分析表明,PO_4-P与代表蓝藻暴发程度的叶绿素a存在正相关关系(R~2=0.869,P<0.01);而且理化因子与细菌群落的RDA分析表明,PO_4-P与蓝藻暴发池塘细菌群落关系密切。蓝藻暴发池塘与对照池塘水体的细菌群落结构间存在显著差异;进一步测序分析显示,蓝藻暴发池塘特定的细菌为Flexibacter,其可能对蓝藻有裂解作用;而Synechococcsus在蓝藻暴发池塘的含量明显低于对照池塘,可能是Microcystis的大量暴发抑制了Synechococcsus的生长。

关键词： 蓝藻暴发池塘 细菌群落 PCR-DGGE PO4-P

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尼罗罗非鱼肌肉蛋白质双向电泳体系的建立

赵永强; 李娜; 李来好; 杨贤庆; 郝淑贤; 魏涯; 岑剑伟; 张红杰; 《水产学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为建立1种尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质的双向电泳体系,实验将尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质提取后,用双向电泳(2-DE)分离蛋白质,分别对蛋白质样品的制备方法、IPG胶条长度及p H范围、SDS-PAGE凝胶浓度及染色方法4个关键因素进行了探索和优化。结果显示,采用液氮研磨-丙酮沉淀法制备样品蛋白质,使用24 cm p H 4~7的IPG胶条进行第一向等电聚焦电泳,第二向SDS-PAGE电泳采用浓度为12.5%的凝胶进行,双向电泳后的凝胶采用硝酸银染色法进行染色处理,该条件下扫描所得尼罗罗非鱼肌肉蛋白质二维电泳图谱具有蛋白质分离程度好、斑点清晰、分辨率高及横纹少等优点。研究表明,技术体系适用于尼罗罗非鱼肌肉蛋白质的分离,可用于后续罗非鱼肌肉蛋白质组学研究。

关键词： 尼罗罗非鱼 肌肉蛋白质 双向电泳 蛋白质组学

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重金属镉胁迫对尼罗罗非鱼抗氧化酶系统的影响

王小娇; 胡国成; 张丽娟; 李建柱; 郭庶; 刘芸; 甘炼; 崔科; 《海洋环境科学 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为评估重金属镉(Cd2+)对鱼类抗氧化酶活性的影响,本文采用静水生物测试的方法,将尼罗罗非鱼暴露于不同浓度水平(0、0.5、1.5、3.0和6.0 mg/L)的Cd2+溶液中,21 d后测定尼罗罗非鱼肌肉、肝脏、肾脏、脾脏和鳃5种组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果表明:重金属镉对尼罗罗非鱼抗氧化酶活性产生影响。尼罗罗非鱼肝脏组织的SOD、CAT活性和GSH含量显著高于其他4种组织,具有组织特异性。肝脏组织的SOD、CAT活性和GSH含量随着镉浓度的升高呈下降趋势,高浓度组(3.0 mg/L)和极高浓度组(6.0 mg/L)尼罗罗非鱼肝脏组织的SOD活性显著低于对照组(P<0.05)。肝脏组织中SOD、CAT活性和暴露水体中镉的浓度水平呈现明显的剂量-效应关系。与对照组相比,暴露组尼罗罗非鱼肾脏组织中SOD、CAT活性及GSH含量均处于诱导状态;对于鳃组织而言,SOD、CAT活性呈现低浓度(0.5 mg/L)时被诱导,高浓度时被抑制。不同暴露组尼罗罗非鱼肌肉和脾脏组织中SOD、CAT活性与对照组没有显著性差异(P>0.05)。

关键词： 镉 尼罗罗非鱼 抗氧化酶系统

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脊尾白虾C-型凝集素基因cDNA全长的克隆和表达分析

王有昆; 刘萍; 李吉涛; 李健; 《海洋科学 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：本研究利用本实验室构建的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血细胞c DNA文库中的C-型凝集素基因EST序列,采用c DNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA end,RACE)技术克隆获得脊尾白虾C-型凝集素基因c DNA全长,命名为Ec CTL。该基因全长1285 bp,包含1041 bp的开放阅读框,编码346个氨基酸组成的蛋白质,分子量为38.56 k Da,为甘露糖型凝集素。同源性分析表明,脊尾白虾Ec CTL基因氨基酸序列与秀丽白虾(Palaemon modestus)的同源性最高,达到91%。荧光定量PCR分析结果表明,Ec CTL基因在血细胞、肝胰腺、肌肉等组织中均有表达,其中在肝胰腺当中的相对表达量最高。感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)后6~12 h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中Ec CTL的表达量较对照组均显著增加(P<0.05),且具有明显的时间差异性。本研究证明脊尾白虾C-型凝集素在其免疫反应中起到重要作用,为进一步探索脊尾白虾免疫系统打下基础。

关键词： 脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda) C-型凝集素 基因克隆 基因表达

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阿维菌素对水生动物的毒性效应及残留检测研究进展

许玉艳; 刘巧荣; 付晓苹; 李强; 孟娣; 宋怿; 《食品安全质量检测学报 》 2016

摘要：阿维菌素类药物(avermectins,AVMs)是一组大环内酯类化合物,因具有广谱、高效等特点而被广泛应用于农牧业中。阿维菌素(abamectin,ABM)是该类药物中最为常用的药物之一,近年来多被用于水产养殖中。然而ABM对水生动物的毒性较大,如若使用不当,会对水生生物及渔业生态环境造成不利影响。本文综述了ABM对水生动物的毒性作用,以及在水生动物中的富集代谢、检测方法与最大残留限量(MRL)等,建议进一步加强ABM对水生动物的毒性机制研究,并结合ABM在环境的降解规律,探讨ABM及其降解产物对水生动物的影响,为在水产养殖中合理使用该种药物和深入开展相关研究提供参考。

关键词： 阿维菌素 水生动物 毒性效应 残留检测

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半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Nramp基因克隆与表达分析及SNP筛选

邢贺飞; 高峰涛; 张永珍; 董忠典; 陈松林; 《渔业科学进展 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Natural resistance-associated macrophage protein,Nramp)属于膜整合转运蛋白,具有抑制胞内寄生菌侵染、调节巨噬细胞的抗菌活性等作用。本研究对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Nramp基因进行了克隆和表达分析,并对其与抗鳗弧菌感染相关的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点进行了筛选。该基因c DNA序列全长3717 bp,其中开放阅读框(Open reading frame,ORF)1677 bp,所编码蛋白含有558个氨基酸,该蛋白具有Nramp家族的典型特征,包括10个跨膜区(Transmembrane,TM)、1个由20个氨基酸残基组成的胞质内转运蛋白特征结构域(Consensus Transport Motif,CTM)。半滑舌鳎Nramp的ORF末端有1个类似于脊椎动物Nramp2中的铁反应控制蛋白结合位点(Iron-responsive regulatory protein-binding site,IRE)。半滑舌鳎Nramp与其他14个物种的Nramp氨基酸序列同源性在63%-91%之间,系统进化分析表明,半滑舌鳎Nramp和所有鱼类Nramp聚集为一簇,与其他物种Nramp2的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析显示,Nramp基因在半滑舌鳎脾脏和肾脏中的表达量最高,而在肌肉和性腺中的表达量最低;在哈维氏弧菌感染的半滑舌鳎肾脏、脾脏和肝脏中表达量呈升高趋势,而在鳃中则表现为下调趋势。利用直接测序法检测感染鳗弧菌后同一家系的233个个体(抗病个体165个,感病个体68个),共检测到15个SNP位点,对其中3个SNP位点即SNP-g.3113(T→C)、SNP-g.3125(A→G)和SNP-g.3164(A→T)进行测序分型后发现,SNPg.3125(A→G)的等位基因(G)频率和基因型(GG)频率与半滑舌鳎抗鳗弧菌疾病呈极显著相关(P<0.01)。研究结果表明,Nramp基因不同基因型对半滑舌鳎的抗病能力有着极其重要的影响,SNP-g.3125(A→G)可作为潜在的抗性遗传标记位点。本研究将为半滑舌鳎抗性品系培育提供技术支持。

关键词： 半滑舌鳎 天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Nramp) 基因克隆 RT-PCR 单核苷酸多态性(SNP)

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固相萃取-石墨炉原子吸收法测定海水中铅、镉和铜

王许诺; 王增焕; 陈瑛娜; 《分析试验室 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：采用C8固相萃取柱,建立了固相萃取-石墨炉原子吸收测定海水中Pb,Cd,Cu的方法,优化了固相萃取的吸附和解析条件。测定Pb,Cu线性范围为0~100μg/L,Cd线性范围为0~4μg/L,相关系数(r)不低于0.9993。Pb,Cd,Cu检出限(3σ,n=11)分别为0.66,0.023和0.48μg/L;标准偏差分别为4.0%,0.84%和4.4%;加标回收率分别为102%,96%和97.3%。方法能有效克服海水中复杂基体干扰问题,已用于海水样品中痕量Pb,Cd,Cu的测定。

关键词： 固相萃取 C8 海水 铅 镉 铜

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渔用抗菌药临床使用效果的影响因素分析

房文红; 王元; 王松刚; 《科学养鱼 》 2016

摘要：细菌性疾病是我国水产养殖的重要疾病之一,其危害种类多,鱼虾蟹贝等海淡水养殖动物都有发病;流行性广,不分季节、不分养殖模式,因此往往造成巨大的经济损失,长期威胁着水产动物养殖的健康发展。细菌性疾病的防控措施已成为水产养殖生产的重要环节。然而,在我国水产动物疫苗研究和产品应用远远滞后于产

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四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)受精卵和仔鱼对不同盐度的耐受性

谢木娇; 区又君; 温久福; 李加儿; 王鹏飞; 周慧; 刘奇奇; 《生态学杂志 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：本文观察了11个盐度梯度(5、7、9、11、13、15、20、25、28、30、35、40、45,28作为对照组)下四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)不同发育阶段的受精卵的沉浮性质和孵化情况以及初孵仔鱼在不投饵条件下的存活情况,并测定不投饵存活系数(survival activity index,SAI)。结果表明:第一次分裂前和原肠期两发育阶段的受精卵在盐度低于25的海水中均呈沉性,盐度为25时则悬浮在水层中部,盐度28及以上呈浮性;第一次分裂前的受精卵对盐度改变较敏感,而原肠期受精卵对盐度胁迫产生一定的耐受性;盐度的改变对初孵仔鱼的存活率和SAI值影响比较大。综合分析孵化率、仔鱼畸形率以及SAI值,推测四指马鲅受精卵孵化的适宜盐度范围为25~35,最适孵化盐度为35。

关键词： 四指马鲅 受精卵 仔鱼 盐度

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收获期内不同品种鲜海带中岩藻多糖含量、组成及其抗氧化活性研究

张加幸; 苗钧魁; 冷凯良; 《应用化工 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：测定了收获期内不同品种鲜海带中岩藻多糖的含量、结构及其对DPPH自由基、羟基自由基清除能力和铁还原能力活性的变化情况。结果显示,在7月29日批次中,新奔牛物种含有最高的多糖含量,干重比达到0.69%。岩藻多糖产品中,早熟种样品多糖同时存在最高的多糖、岩藻单糖含量,分别达到51.14%和31.92%;海科1号样品多糖含有最高的硫酸基团含量,达到37.82%。与市售多糖样品相比,各品种鲜海带岩藻多糖样品均表现出良好的抗氧化能力。

关键词： 鲜海带 岩藻多糖硫酸酯 岩藻单糖 抗氧化活性

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