科研产出
利用PLDMV/Twin-Strep侵染性克隆纯化HC-Pro病毒蛋白
《热带作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)是一种新的潜在威胁番木瓜种植业的病毒,其辅助成分蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)是PLDMV编码参与病毒复制、运动、寄主植物症状表现的多功能蛋白,因此纯化获得具有功能活性的HC-Pro蛋白,研究其多功能性具有重要意义.本研究利用In-Fusion拼接策略和E.coli Cell-Free快速构建植物病毒侵染性克隆法,一步快速地将28个氨基酸组成的蛋白标签Twin-Strep插入到PLDMV HC-Pro氨基端,成功获得了基于农杆菌的携带Twin-Strep标签的PLDMV侵染性克隆pPLDMV-Strep.通过农杆菌渗透注射接种番木瓜植株,从感染PLDMV-Strep的番木瓜叶片总蛋白中,利用Twin-Strep蛋白标签亲和层析分离纯化获得PLDMV HC-Pro蛋白,并通过LC/ESI-MS/MS(liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometric)对其进行蛋白N端和C端序列测序,证明了纯化获得完整的PLDMV HC-Pro蛋白.研究结果为后续解析PLDMV HC-Pro在病毒侵染过程中的功能及与寄主蛋白相互作用奠定了基础.
关键词： 番木瓜畸形花叶病毒;HC-Pro;马铃薯Y病毒;蛋白纯化
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菠萝蜜果酒分批发酵动力学模型研究
《食品与发酵工业 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了研究菠萝蜜果酒分批发酵过程中酵母菌体生长、还原糖基质消耗和乙醇产量生成的动力学变化规律,每隔24 h测定菠萝蜜果酒发酵过程中的酵母菌数、还原糖含量和酒精度,采用经典的Logistic、SGompertz、Boltz-mann和DoseResp模型进行非线性拟合,构建菠萝蜜果酒的分批发酵动力学模型.结果 表明,在酵母菌体生长动力学模型中,采用Boltzmann模型拟合效果最佳,拟合系数R2为0.99396;在乙醇产量生成动力学模型中,SGompertz和Boltzmann模型的R2分别为0.99905和0.999,2种模型均能产生很好的拟合效果;在还原糖基质消耗动力学模型中,DoseResp和Boltzmann模型的R2都为0.98705,拟合系数一致,说明2种模型均可用于较好地描述发酵过程还原糖的消耗情况.所选模型拟合发酵过程是可行的,为菠萝蜜果酒工业化发酵工艺控制提供理论基础.
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菠萝蜜多糖流变学特性研究
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本文研究了菠萝蜜多糖(Artocarpus heterophyllus Lam.Pulp Polysaccharide,JFP-Ps)的流变学特性,分析浓度、剪切速率、温度、加热时间、pH、冻融变化和盐离子等因素对JFP-Ps溶液的表观粘度和粘弹性的影响.结果表明,JFP-Ps溶液的表观粘度与浓度呈正相关;JFP-Ps溶液的表观粘度与剪切速率呈负相关,出现剪切稀释的现象,为"非牛顿流体",呈现假塑性行为;JFP-Ps溶液表观粘度与温度呈负相关;随加热时间的延长,JFP-Ps的表观粘度先上升后下降;JFP-Ps溶液在pH4~10范围内表观粘度值变化不大;冻融变化可使JFP-Ps溶液表观粘度增大;5%NaCl溶液使JFP-Ps溶液的表观粘度减小,5%KCl溶液使JFP-Ps溶液的表观粘度增大;在粘弹性测试中,JFP-Ps的储能G′和损能G″随着频率的增大而增大,且G′始终高于G″,另外,JFP-Ps溶液的储能模量G'和损耗模量G'随着溶液浓度的增大而上升,呈现凝胶性质.研究结果可为菠萝蜜果肉多糖在食品工业中的应用提供一定的理论借鉴.
关键词： 菠萝蜜多糖;表观粘度;剪切速率;粘弹性;流变学特性
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甘蔗螟虫综合防治研究进展
《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：介绍了我国蔗区主要甘蔗螟虫种类及甘蔗螟虫在甘蔗生长周期内的田间危害情况。根据国内外对甘蔗螟虫防治的研究成果,重点综述了甘蔗螟虫的农业防治、物理防治、生物防治、化学防治和绿色防治技术集成及利用研究进展,指出甘蔗螟虫各单项防治措施效果的优缺点。提出各单项防治措施的研究方向:加大抗螟虫甘蔗品种的选育工作;加大田间试验以验证生物防治的实际防治效果,并挑选出适合大规模田间防治甘蔗螟虫的生物防治方法和生物防治剂;筛选高效、低毒、环境友好的杀虫剂;研究基于雌虫的诱杀技术和引诱剂;加强甘蔗螟虫行为及化学生态学的研究,并将各单项防治技术有机结合,建立预防为主、综合防治的绿色、可持续发展的甘蔗螟虫防控技术体系等防治策略。
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茶多酚对油梨果实保鲜效果的评价
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探明茶多酚对油梨采后贮藏期间品质和生理变化的影响.以国内油梨品种桂研10号为试材,研究了不同浓度茶多酚对油梨贮藏期间营养品质和抗氧化酶的变化.结果表明,2.0%茶多酚处理可有效延长油梨的保鲜期,贮藏12 d后,2.0%茶多酚处理油梨腐烂率为14.86%,比CK低81.90%;贮藏20 d后,2.0%茶多酚处理的油梨失重率为10.46%,硬度为2.9 kg/cm2,可溶性固形物含量7.45%,维生素C含量42.88 mg/100 g,可溶性蛋白含量6.52 mg/g,保持油梨果实硬度和重量,控制溶性固形物、维生素C、可溶性蛋白的下降,促进超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性,降低腐烂率,有效延长了保鲜时间,同时保持了良好的营养品质.综上所述,2.0%茶多酚处理对油梨的保鲜效果最好,是一种安全、高效、低成本油梨保鲜药剂.
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木薯MePYL12基因克隆及采后生理性变质过程的表达分析
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】脱落酸受体PYL家族基因为ABA信号通路的重要成员。研究PYL基因在木薯块根的采后生理性变质（post-harvest physiological deterioration, PPD）和非生物胁迫中的功能,能够为进一步研究ABA信号在木薯抗逆和PPD过程中的功能奠定基础。【方法】本研究从木薯品种SC124中通过RT-PCR技术克隆得到了MePYL12基因,对它的蛋白质进行相关生信分析,如遗传进化关系、结构域、蛋白质结构预测、理化性质及基因的启动子元件分析,同时对MePYL12基因在相关处理和木薯PPD过程中的表达量进行分析。【结果】（1）克隆得到的MePYL12长度为567 bp,氨基酸数量为188,理论等电点为5.55,三级结构预测显示含有典型PYL螺旋手柄结构,与蓖麻和橡胶树中PYL蛋白序列的相似性较高,达到了86.77%和94.68%。MePYL12基因的蛋白序列含有PYL蛋白家族的保守结构域,特别是ABA结合的区域"Latch"和"Gate"序列100%一致,这些结果表明MePYL12基因编码的蛋白质属于PYL家族成员并且高度保守。（2）10个木薯组织中的MePYL12基因表达分析显示,该基因在分生组织和叶片中的表达水平最高。（3）MePYL12基因主要的启动子元件为光应答元件（Light-responsive motifs）、干旱诱导元件（Drought-inducedmotif）、 ABA应答元件（ABAresponsivemotif）等元件。（4）MePYL12基因的表达水平显著受到干旱胁迫和ABA处理诱导。在木薯块根的PPD过程也被显著诱导,在6 h达到最高,随后慢慢下降。【结论】MePYL12基因具有提高植物应对非生物胁迫能力的潜能,同时可能参与了木薯块根的PPD过程,也为后续研究相关功能奠定了基础。
关键词： ABA MePYL12 非生物胁迫 采后生理性变质 表达分析
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通过转化脂肪酸去饱和酶基因AcoFAD2提高菠萝植株的抗寒能力
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为培育抗寒菠萝新品种,本研究通过比较菠萝脂肪酸去饱和酶基因序列和拟南芥脂肪酸去饱和酶基因序列,筛选获得目标基因AcoFAD2;通过农杆菌转化菠萝‘台农17’获得过表达AcoFAD2转基因植株TN17FAD2-3;转基因植株和对照在低温条件下进行培养,鉴定转基因植株和对照的不饱和脂肪酸含量及抗寒能力。结果发现组培苗在7℃条件下处理5 d然后转入26℃生长一周,TN17FAD2-3第四片叶坏死比例为（5±1）%,只转化空载体的对照TN17-EV第四片叶坏死比例为（97±2）%。组培苗在7℃条件下生长5 d,然后转入26℃生长15 d。TN17FAD2-3第二片叶叶面积为（2.15±0.2） cm2,TN17-EV第二片叶叶面积为（0.06±0.01） cm2。TN17FAD2-3的叶片不饱和脂肪酸含量（16:3+18:3）为（77.5±0.7）%,对照TN17-EV叶片不饱和脂肪酸（16:3+18:3）含量为（58.6±0.8）%。TN17FAD2-3的叶片不饱和脂肪酸含量高于只转化空载体的对照TN17-EV。低温条件下,TN17FAD2-3比TN17-EV生长快,TN17FAD2-3株系比TN17-EV具有更高的抗寒性,载体UBI-pCAMBIA1301不能提高菠萝植株的抗寒能力,通过转化脂肪酸去饱和酶基因AcoFAD2能够提高菠萝植株的抗寒性能,本研究为快速培育抗寒菠萝新品种提供理论基础。
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粤西地区不同甜高粱和高丹草品种比较试验
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选适宜粤西地区种植的甜高粱和高丹草品种.[方法]以引进的甜高粱和高丹草为试材,对8个甜高粱品种(牛魔王、海牛、百战、大力士、得胜、大卡、绝佳、绿巨人)和5个高丹草品种(宝百饲、标兵渔草、杰宝、得力、乐食)的物候期、农艺性状、常规营养成分(粗蛋白、粗纤维和粗脂肪)进行分析,并计算有机物质消化率.[结果]不同品种的物候期、株高、茎粗和茎叶比存在一定差异.甜高粱干草产量7.13~18.22 t/hm2,粗蛋白含量5.97%~8.99%,粗纤维含量22.91%~33.01%,粗脂肪含量1.67%~3.00%.高丹草干草产量5.63~19.99 t/hm2,粗蛋白含量6.39%~7.04%,粗纤维含量25.30%~30.44%,粗脂肪含量1.51%~2.40%.得胜在8个甜高粱品种中干草产量最高,显著高于其他品种,干草产量排名前3名的甜高粱品种中,得胜的粗蛋白含量显著高于绿巨人和大力士,但有机物质消化率显著低于大力士.宝百饲在5个高丹草品种中干草产量最高,显著高于其他品种,干草产量排名前2位的高丹草品种中,宝百饲和乐食的粗蛋白含量和有机物质消化率无显著差异.[结论]得胜、大力士和宝百饲在粤西地区生产性能较好,适宜在该地区牧草生产中推广种植.
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菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库及AcSERK1启动子相关诱饵载体的构建
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为筛选与菠萝AcSERK1启动子中胚性细胞特异性表达调控区段（-983～-881 nt）的结合蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold Yeast One-Hybrid System构建菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库以及胚性细胞特异性表达调控区段（SE103）的诱饵载体。建立的菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库库容量为1.25×107CFU,其插入片段平均长度约1.5 kb,重组率为100%。通过检测,AbA最低浓度为600 ng/mL时,构建的诱饵载体pAbAi-SE103在Y1HGold酵母菌株中的自激活活性被有效抑制,表明该菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库以及诱饵酵母菌株Y1HGold （pAbAi-SE103）,可用于AcSRKE1启动子中胚性细胞特异性表达调控区段互作蛋白的筛选实验,为胚性细胞特异性转录因子的分离鉴定提供数据参考。
关键词： 菠萝（Ananas comosus） AcSERK1 体细胞胚 酵母单杂交
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剑麻EST-SSR在丝兰麻和中美麻中的通用性分析
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对剑麻‘H.11648’中的100对SSR引物在丝兰麻和万年兰中的通用性进行分析,同时构建DNA指纹图谱。结果表明100对SSR引物,在龙舌兰属、丝兰麻属、中美麻属中分别有68对、52对和52对SSR引物扩增出目标产物条带,扩增产物所占比例分别为68%、52%和52%,多态性引物分别为18对、12对和9对,多态性引物所占比例分别为29.51%、23.08%和17.31%。检测位点数分别为76、44和40个,平均每对引物多态位点数分别为2.67、2.42和2.22个。引物C67656和C61418可将龙舌兰属的6份种质区分开来,引物C65059可将丝兰麻属的5份种质区分开,引物C24110可将中美麻属的4份种质区分开。以上研究结果表明,从‘H.11648’开发的SSR引物在龙舌兰及其近缘属中是可以通用的,筛选出的SSR引物可用于龙舌兰及其近缘属种质资源的鉴定和遗传多样性分析等研究。
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