科研产出
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CS27液体发酵条件优化
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：从提高细胞生物量并降低发酵生产成本的目的出发,本文采用单因素试验和正交试验方法,对已筛选出的枯草芽孢杆菌CS27菌株进行液体发酵培养基和工艺条件优化.得到最佳培养基配方为:1.5%黄豆粉、0.5%糖蜜、0.8%氯化铵、1.0%氯化钠、0.1%柠檬酸钠、0.5%碳酸钙、0.1%七水合硫酸镁;最佳发酵条件为:发酵温度32℃,最佳装液量50 mL/250 mL,最适接种量10%,初始pH7.0.在优化后的培养基发酵条件下细胞生物量可以达到1.75*10~9 cfu/mL,为枯草芽孢杆菌CS27菌株规模化生产及应用提供科学依据.
关键词： 枯草芽孢杆菌 发酵条件优化 微生物菌剂 氮源 碳源 无机盐
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地毯草黄单胞菌分泌黄原胶的电镜观察
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了研究地毯草黄单胞菌(Xanthomonas axonopodis)FJAT-10151产黄原胶的分泌行为,采用比浊法测定地毯草黄单胞菌的生长曲线,干重法测定黄原胶产量,2,4-二硝基苯肼显色法测定黄原胶中丙酮酸含量变化,通过扫描电子显微镜镜(SEM)和透射电子显微镜镜(TEM)观察地毯草黄单胞菌产黄原胶的分泌行为。FJAT-10151在发酵时间0～26 h为对数期,26～72 h为稳定期。菌株FJAT-10151为短杆状(约2μm),端生鞭毛(约7.9μm),菌体外面形成了一层较厚的荚膜,且许多菌体通过黄原胶连在一起,分泌的黄原胶呈棒状和网状2种形态,聚集或缠绕在细胞表面,其含量随发酵时间的延长而增加。菌株FJAT-10151发酵72 h可获得高品质黄原胶,其产量及丙酮酸含量最高。
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西葫芦CpActin内参基因的分离及其作为内参基因的初步应用
《植物遗传资源学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究分子生物学中基因表达的一种新型核酸定量技术,具备快速高效、特异性强、重复性好、灵敏度高和自动化程度高等优点,因而根据相应的实验材料选择适宜的内参基因对于提高qRT-PCR分析的准确性显得尤为重要.Actin基因表达范围广且表达稳定,常常作为内参基因应用于qRT-PCR表达分析中.前期利用转录组测序(RNA-seq)技术获得了西葫芦低温弱光转录组数据库,本研究从中筛选到1条长达2543bp的cDNA,并对其进行了序列分析.生物信息学分析结果表明,该序列包含1个开放读码框(ORE),大小为2064 bp,预测编码氨基酸数为682个,理论分子大小约为79.67kD,蛋白质等电点为6.28.Wolf Psort分析发现,CpActin蛋白亚细胞定位于细胞核中.Motif Scan分析显示,CpActin蛋白质的氨基酸序列207~406位和558~682位分别为Actin的中端和C端保守区域.同源性分析表明,基因编码的蛋白质与同为南瓜属的中国南瓜和印度南瓜同源蛋白的相似性达到99%,具有高度的保守性.基于所获得的基因全长cDNA序列,设计了基因ORF全长引物对CpActin-F、CpActin-R,经PCR扩增得到一条特异、明亮的条带,经测序验证,序列与RNA-seq数据库的cDNA序列一致,基因命名为CpActin,GenBank登录号为MH211008.在此基础上,设计了一对荧光定量PCR引物CpActin-Fq、CpActin-Rq,分析显示,该引物具有较高的特异性和扩增效率,且在西葫芦不同组织(根、茎、花和果)和不同胁迫处理[正常(25℃,300μmol/m2·s)、低温处理(4℃,300 μmol/m2·s)、弱光处理(25℃,80μmol/m2·s)、低温弱光处理(4℃,80μmol/m2·s)、强光处理(25℃,2000μmol/m2·s)和高温处理(38℃,300μmol/m2·s)]叶片中均能稳定表达,适合在西葫芦基因qRT-PCR表达分析的研究中作为候选内参基因.
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基于Illumina HiSeq 2500测序技术对高温胁迫下苦瓜叶片转录组特性分析
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：高温胁迫时影响苦瓜作物产量及地域分布的重要限制因子,但由于其在非生物胁迫逆境方面的生物学信息研究进展较慢,这在一定程度上制约了苦瓜分子育种及品种改良工作。利用Illumina HiSeqTM2500高通量测序平台对高温胁迫处理前后的苦瓜叶片进行转录组测序,结果组装获得平均长度为700.75 bp共89 757条有效Unigene,N50长度达到1 239 bp;有48 662条Unigene获得注释信息,占全部Unigene的54.2%,与未处理的对照相比,共有2 254差异表达基因,其中672个上调,1 582下调表达。有27 116条Unigene能够注释到GO数据库,获得包含于细胞组分、分子功能和生物学过程三大类内共135 967个GO的功能注释,并且差异表达基因的GO功能注释分类情况大致与之相似。进一步筛选到可能与高温胁迫相关的基因,包括HSP,HSF等家族基因。本研究是首次对高温胁迫下的苦瓜叶片转录组进行分析,为进一步开展苦瓜耐高温分子生物学层面研究提供大量参考信息。
关键词： 苦瓜 高温胁迫 Illumina HiSeq 2500测序 差异表达基因
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基于可培养方法分析云南腾冲小空山火山谷芽胞杆菌分布特征
《微生物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为了解云南腾冲小空山火山谷土壤中可培养芽胞杆菌种类分布特征.[方法]采用可培养手段对小空山火山谷阳坡、谷底和阴坡土壤中的芽胞杆菌进行分离培养,根据16S rRNA基因序列同源性对分离菌株进行鉴定,并分析系统发育地位.利用Canoco5软件分析采样点芽胞杆菌种类分布特征与土壤样品理化性质的相关性.[结果]从火山谷土壤样品中共分离获得180株芽胞杆菌,16S rRNA基因测序鉴定结果表明分离菌株隶属于芽胞杆菌纲2个科(芽胞杆菌科和类芽胞杆菌科)、6个属、34个种,其中芽胞杆菌属(Bacillus) 11个种,类芽胞杆菌属(Paenibacillus) 14个种,短芽胞杆菌属(Brevibacillus)3个种,赖氨酸芽胞杆菌属(Lysinibacillus)4个种,嗜冷芽胞杆菌属(Psychrobacillus)1个种和绿芽胞杆菌属(Viridibacillus)2个种,其中7个菌株与其最近模式菌株16SrRNA相似性低于种的界定阈值(98.65%),为芽胞杆菌潜在新物种.优势属为芽胞杆菌属和类芽胞杆菌属,优势种为蕈状芽胞杆菌(Bacillusmycoides),图瓦永芽胞杆菌(Bacillustoyonensis),蜡状芽胞杆菌(Bacilluscereus),解木糖赖氨酸芽胞杆菌(Lysinibacillusxylanilyticus),蜂房类芽胞杆菌(Paenibacillusalvei)和沙地绿芽胞杆菌(Viridibacillus arenosi).其中16个种分离自阳坡,29个种分离自阴坡,9个种分离自谷底,三者共同种类为6种.阳坡、谷底和阴坡的芽胞杆菌种群分布Bray-Curtis相似性为62.4%,多样性分析结果表明,Shannon指数(H′)大小次序为阴坡>阳坡>谷底.环境因子分析发现,芽胞杆菌种群分布多样性特征与其土壤的海拔高度、碳氮比和硫含量呈负相关,而和碳源和氮源含量呈正相关.[结论]从以上结果得出,云南腾冲火山谷有着较为丰富的芽胞杆菌资源,且还存在可分离培养的芽胞杆菌的潜在新物种,为利用火山微生物资源提供了保障.
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海鲜菇渣复合基质对黄瓜生长、果实品质和产量的影响
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：以津福99号黄瓜为供试材料,选用海鲜菇渣、珍珠岩、蛭石、树皮为栽培基质,在薄膜温室内,研究10种不同基质配比对黄瓜生长的影响。结果表明,利用海鲜菇渣进行黄瓜栽培在生产上完全可行,随着海鲜菇渣使用比例的增加,黄瓜栽培效果呈现下降趋势,且与珍珠岩搭配效果优于树皮基质。综合考虑黄瓜的生长指标、果实产量、果实品质以及基质成本的多方面指标,得出海鲜菇渣在黄瓜栽培应用上最佳的使用比例为33%,海鲜菇渣∶珍珠岩∶蛭石=1∶1∶1为黄瓜栽培的最佳复合基质配方。将海鲜菇渣作为基质进行开发,不仅能够解决目前大量堆积造成的环境污染,还能够降低基质成本,实现农业的可持续发展。
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橄榄种质资源花序表型性状遗传多样性研究
《热带亚热带植物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了解橄榄[Canarium album(Loureiro)Raeuschel]花序表型性状的遗传多样性,对90份橄榄种质资源的花序性状进行观测分析。结果表明,橄榄花序的类型、支轴紧密度、着生位置和花性等表现出较丰富的多样性;从数量性状看,花序花朵数的变异系数最大,其次为支轴花朵数,变异系数最小的是花蕾直径,此外橄榄雄花花序的多样性较雌花丰富。花蕾直径与花瓣长度呈极显著正相关关系,与花序长度、花序支轴数、花序花朵数和支轴花朵数呈极显著负相关。聚类分析结果表明,橄榄种质资源的花序类型可分为3类,大部分雄花和雌花类群间差异较明显。因此,橄榄花序表型性状存在多样性和复杂性,且花序重要单一性状可能影响整体表型。
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杂交水稻新组合赣香优858高产制种技术
《杂交水稻 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：赣香优858是福建省农业科学院水稻研究所利用自育的早熟优质恢复系东南恢858和江西省农科院水稻研究所育成的不育系赣香A配组育成的中早熟三系杂交晚稻新组合,2017年通过江西省农作物品种审定委员会审定.介绍了赣香优858亲本的主要特征特性,总结其高产制种技术.
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生物炭添加对猪粪堆肥氮素形态和损失的影响
《福建农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探讨生物炭添加下猪粪堆肥过程氮素形态的变化,为堆肥过程中氮素损失控制提供科学依据。【方法】本研究利用强制反应箱研究在猪粪堆肥中添加0%、3%、6%和9%的生物炭(重量比,干基计)对氮素形态变化以及氮素损失的影响。【结果】各处理在堆肥过程中全氮和硝态氮含量呈上升趋势,至堆肥结束全氮含量增加了3.68%～5.43%;可溶性总氮和铵态氮呈先上升后下降的趋势,随着生物炭添加量的提高堆料中铵态氮降幅减小。不同堆肥处理氮素损失率介于20.69%～28.18%,3%和6%生物炭添加处理的氨挥发量分别比未添加生物炭处理的高8.98%和46.30%,而9%生物炭添加处理的氮素损失率和氨挥发量最低。【结论】猪粪堆肥过程中添加生物炭可使堆体快速升温,并延长高温期,堆料中铵态氮向硝态氮转化。硝态氮含量随生物炭添加量呈增加的趋势,氮素损失率随着发酵时间延长呈增加的趋势。
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辣木多糖酶促提取技术优化及不同部位含量研究
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为研究辣木多糖的酶促提取工艺和辣木不同部位的多糖含量,在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,选择纤维素酶用量、提取温度、提取时间、液料比为试验因素,采用二次回归正交旋转组合设计对纤维素酶辅助提取辣木多糖的工艺参数进行优化,并在此基础上研究辣木不同部位的多糖含量差异。4种因素对辣木多糖提取率的影响顺序依次为:纤维素酶用量>提取温度>液料比>提取时间。建立辣木多糖提取率(Y)与纤维素酶用量(X1)、提取温度(X2)、提取时间(X3)、液料比(X4)的二次正交回归模型:Y=18.6602+0.8134X1+0.7572X2–0.4312X3+0.6909X4–0.5181X12–0.4935X22–0.6277X42,该模型拟合度好,4个因素均对多糖提取率有显著影响(p<0.05)。通过回归模型获得优化的提取工艺为:纤维素酶用量1.60%,提取温度53℃,提取时间68 min,液料比52∶1,在此条件下辣木多糖提取率为19.83%,实际值与预测值一致。辣木不同部位的多糖含量结果表明,辣木根、花、嫩叶、茎中均含有丰富的多糖,其中根中含量最高且极显著高于其他部位(p<0.01),可进一步开发利用。采用二次回归正交旋转组合设计优化得到的辣木多糖酶促提取工艺条件准确可靠,可有效提高辣木多糖提取率并可在生产中推广应用。
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