科研产出
猪圆环病毒2型和3型双重PCR方法的建立及在藏猪猪圆环病毒检测中的应用
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：为同时并快速检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV-2)与猪圆环病毒3型(PCV-3),并调查西藏林芝地区猪圆环病毒的感染情况,根据笔者所在实验室PCV-2和PCV-3单重PCR方法,建立检测PCV-2和PCV-2双重PCR的方法,构建标准质粒并经优化反应条件和反应体系后进行特异性和灵敏性的测定,并对西藏林芝周边地区藏猪粪便进行检测.结果显示,建立的PCV-2和PCV-3双重PCR检测方法对PCV1、CSFV、PRRSV、PRV、PPV、PEDV等常见猪源病原的检测结果均为阴性;并且建立的PCV-2和PCV-3双重PCR的灵敏度与PCV-2和PCV-3单一PCR的灵敏度一致,均能达到101拷贝数/μL;利用建立好的双重PCR方法对西藏藏猪临床样品进行检测,PCV-2、PCV-3的阳性率分别为38.3%(18/47)、12.8%(6/47),混合感染率为10.6%(5/47),与单一 PCR的符合度为100%.由此可见,本研究建立的PCR方法方便、特异、准确,并有很高的敏感度,适于临床样品的检测,为PCV-2与PCV-3的诊断和防控提供理论依据.
关键词： 猪圆环病毒2型;猪圆环病毒3型;双重PCR方法;藏猪;临床应用
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长江下游典型稻麦轮作农田作物生产的限制养分分析
《南京农业大学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]通过分析氮、磷、钾不同养分限投对稻麦产量和养分吸收的影响,明确土壤养分的持续供应能力,为长江下游稻麦轮作农田精确施肥策略的制定提供参考.[方法]选择当地主推稻麦品种,以常规施肥模式为对照,设置不施氮肥、不施磷肥、不施钾肥和氮磷钾肥均不施4种周年养分限投模式,开展多年定位试验,研究稻麦轮作农田作物生产的限制养分.[结果]氮是水稻、小麦产量和养分吸收的最主要限制养分,不施氮肥和氮磷钾肥均不施处理的作物产量及氮、磷、钾吸收量均较低.水稻产量及氮、磷、钾吸收量均随氮肥限投年限增加而下降,并可分别用多项式方程(y=a-bx+cx2,P<0.01)进行描述;而受田间气候条件不确定性的影响,小麦产量及氮、磷、钾吸收量并不随氮肥限投年限增加而规律性下降.水稻养分吸收受钾肥限投的影响,但不受磷肥限投影响.钾肥限投处理的水稻钾吸收量显著低于磷肥限投和常规施肥处理(分别降低32%和28%),同时水稻钾吸收量随钾肥限投年限增加呈增加趋势(y=0.61+0.89lnx,P<0.05).与水稻表现不同,磷肥限投影响小麦产量,而钾肥限投不影响小麦产量;磷肥、钾肥限投均降低了小麦磷和钾吸收量,磷肥限投使磷和钾吸收量分别减少27%和23%,钾肥限投分别减少17%和38%.小麦产量和养分吸收量随磷、钾肥限投年限增加未表现出规律性变化.[结论]氮肥投入在作物施肥管理中不可或缺;在一定年限内,土壤养分供应可以缓冲磷、钾限投对作物生产的不利影响,但具体限投养分应针对不同作物区别对待.
关键词： 稻麦轮作 养分限投 土壤基础生产力 作物产量 养分吸收
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江苏省主推及新育成小麦品种抗赤霉病评价及毒素积累分析
《麦类作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为明确江苏省小麦主推和新育成品种对赤霉病的抗性水平,2018年至2020年采用单花滴注接种和自然发病方法,对280个江苏省小麦品种进行赤霉病抗性鉴定,并对部分自然发病鉴定品种进行了籽粒DON毒素积累分析.结果表明,85个品种对赤霉病达到中抗及以上水平,其中淮南品种60个,淮北品种25个.经连续3年重复鉴定,筛选出18个抗性水平高且稳定的小麦品种,包括16个淮南品种和2个淮北品种.自然发病条件下,病穗率在10%以上的品种中,90%以上表现为中感及感病.不同小麦品种籽粒中DON毒素积累水平差异较大,毒素水平与小麦品种的病情指数呈正相关.综上所述,淮南较淮北品种的赤霉病抗性高,籽粒DON积累量低;人工接种鉴定可以较准确地反映小麦品种的赤霉病抗性;不同小麦品种发病严重程度与DON毒素积累量呈显著正相关.
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具毒死蜱降解功能的水稻内生菌降解特性及应用
《农业环境科学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为挖掘毒死蜱降解内生菌资源、强化功能内生菌在农业生产中的应用,通过微生物梯度驯化技术,从农药池周边生长的水稻根组织中分离纯化获得一株能以毒死蜱为唯一碳源的降解内生菌CP40,研究了该菌株的毒死蜱降解特性及对作物中残留毒死蜱降解的影响.基于16S rRNA和细菌形态学特征,将菌株CP40鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.CP40).菌株CP40含有机磷降解酶基因opd,异源表达该基因后毒死蜱的降解率达58.4%.降解条件优化实验表明,毒死蜱初始浓度为10 mg·L-1、温度为30℃、pH为7时,菌株CP40对毒死蜱的降解效果最佳.此外,发现菌株CP40具有促生能力,接种菌株CP40可显著促进水稻生长,并能将水稻体内毒死蜱含量降低30.9%.研究表明,功能内生菌在调控水稻体内毒死蜱的降解过程中可发挥重要作用.
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渗透方式对真空冷冻干燥芒果细胞结构及品质的影响
《食品工业科技 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探索渗透方式对冻干芒果细胞结构及品质的影响,本实验以玉芒为原料,在环境温度(20、30℃)下采用蔗糖固态渗透(SSD)、液态渗透(LOD)方式处理芒果后再进行真空冷冻干燥,通过测定渗透方式处理后芒果鲜样可溶性固形物、细胞形态以及分析冻干芒果的弹性模量、孔隙度、细胞壁结构、色泽以及VC、总酚、β-胡萝卜素保留率指标的变化.结果表明:固态渗透芒果可溶性固形物增加量高于液态渗透,液态渗透处理的芒果细胞形态与鲜样(CK)无明显差异,固态渗透随蔗糖添加量的增加可溶性固形物含量和细胞形态皱缩程度增加;固态渗透减少细胞间孔隙度提高芒果弹性模量;傅里叶变换红外光谱结果表明O-H的伸缩震动吸收峰,随着蔗糖添加量的增加,吸收峰强度逐渐增加;低蔗糖固态渗透有利于维持芒果色泽;在环境温度20和30℃条件下固态渗透处理的真空冷冻芒果VC和总酚的保留率高于液态渗透,其中固态渗透SSD20的VC和总酚保留率最高分别为37.75%、33.37%;固态渗透SSD20处理的真空冷冻芒果的β-胡萝卜素保留率高于液态渗透LOD30,但固态渗透随蔗糖添加量的增加,β-胡萝卜素的保留率逐渐下降.本研究结果发现低蔗糖固态渗透可以有效提高真空冷冻芒果的综合品质,为改善芒果干燥制品品质提供理论参考.
关键词： 芒果;固态渗透;液态渗透;细胞结构;品质
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基于CRISPR/Cas9系统筛选猪流行性腹泻病毒复制相关基因及其验证
《微生物学通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【背景】成簇规律间隔的短回文重复序列相关蛋白（clusteredregularlyinterspacedshort palindromic repeats/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas9）已被广泛证实是高效、强大的第三代基因编辑工具，在发现功能基因等领域取得了重要进展，但至今尚无利用该方法挖掘猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）宿主基因的报道。【目的】利用CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选PEDV复制相关基因，并进行候选基因的初步验证，为培育抗PEDV种猪提供科学参考。【方法】通过CRISPR/Cas9技术构建人肝癌细胞系（Huh-7）全基因组敲除文库，利用PEDV感染Huh-7文库细胞，随后经过高通量测序筛选影响PEDV复制的关键宿主因子，结合基因干扰和检测病毒效价等相关试验对影响PEDV复制的候选基因进行初步验证。【结果】构建了CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选PEDV复制相关基因的方法，将富集程度排名靠前的整合素α11 （integrin α11,ITGA11）、哺乳动物复制蛋白A2 （replication protein A2,RPA2）、驱动蛋白家族成员2A （kinesin family member 2A,KIF2A）、诱导髓系白血病细胞分化蛋白1 （induced myeloid leukemia cell differentiation protein 1,MCL1）、多聚ADP核糖化酶1 [poly （ADP-ribose） polymerase1,PARP1]和囊泡单胺转运蛋白（vesicular monoamine transporter,SLC18A1）基因进行了验证；采用siRNA对上述基因分别进行干扰后，结果与对照组相比，干扰ITGA11可显著降低PEDV猪源靶向细胞IPEC-J2中PEDV-N mRNA、蛋白表达水平及子代病毒滴度。【结论】基于CRISPR/Cas9系统的全基因组敲除文库可作为挖掘PEDV复制相关功能基因的有效工具，ITGA11基因可作为一种制备抗PEDV猪种潜在的靶基因。
关键词： 成簇规律间隔的短回文重复序列相关蛋白（CRISPR/Cas9） 猪流行性腹泻病毒 遗传筛选 整合素α11
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复合菌制剂和复合酶制剂对柠条锦鸡儿青贮发酵品质和有氧稳定性的影响
《动物营养学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在探讨复合菌制剂和复合酶制剂对柠条锦鸡儿青贮发酵品质和有氧稳定性的影响，以期为改善柠条锦鸡儿青贮品质、科学开发和利用荒漠地区饲料资源提供科学依据。以宁夏荒漠地区盛花期柠条锦鸡儿为青贮原料，设4个组，分别为对照组（CK组）、添加0.05%复合菌制剂组（F组）、添加0.1%复合酶制剂组（X组）和添加0.05%复合菌制剂+0.1%复合酶制剂组（FX组），每组3个重复。青贮60 d后，测定柠条锦鸡儿青贮的营养成分、发酵特性、微生物数量及有氧稳定性。结果表明：1)FX组青贮饲料中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和可溶性碳水化合物含量显著低于其他各组（P<0.05）,X和FX组青贮饲料总可消化养分含量显著高于CK组（P<0.05）。2)F、X和FX组青贮饲料pH、丙酸含量和氨态氮/总氮显著低于CK组（P<0.05），乳酸含量和乳酸/乙酸显著高于CK组（P<0.05）。X组青贮饲料乙酸含量显著高于其他各组（P<0.05）。F、X和FX组青贮饲料V-Score评分总分均在90分以上，等级均为良好。3)F、X和FX组青贮饲料乳酸菌数量显著高于CK组（P<0.05）,FX组青贮饲料酵母菌数量显著低于其他各组（P<0.05）。4)X和FX组青贮饲料有氧稳定性显著高于CK组和F组（P<0.05）。综上所述，单独添加复合菌制剂和复合酶制剂均可改善柠条锦鸡儿青贮发酵品质，二者联用效果更好。
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低温冷藏对桃砧木Nemaguard种子萌发及幼苗生长的影响
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：以桃砧木品种Nemaguard为试验材料,采收七成熟至十成熟4个成熟度的果实后取种,研究4℃冷藏处理对不同成熟度桃砧木种子在常温(25℃)下萌发及对幼苗生长的影响.结果表明,随冷藏时间延长,不同成熟度果实种子的发芽率、发芽势、发芽指数均提高,种子的萌发速度和整齐度显著提高,当冷藏时间为60 d时,不同成熟度果实种子的发芽率达最大值,为73.33%至100.00%;在相同冷藏时间下,九成熟果实种子的各发芽指标总体高于其他成熟度,低温冷藏30 d发芽率即可达100.00%;低温冷藏对播种后幼苗的营养生长有较大影响,不同成熟度果实种子萌发后的幼苗总体表现为株高与茎粗随冷藏时间延长而缓慢增加,在低温60 d时达到最大值,其中九成熟果实种子萌发后的幼苗株高总体高于七成熟与十成熟;种子低温冷藏时间同时影响幼苗叶片发育,当种子冷藏时间少于30 d时,不同成熟度果实种子播种后幼苗莲座叶现象明显,冷藏时间达50 d后,幼苗莲座叶现象消失.
关键词： 桃砧木;种子;低温冷藏;成熟度;发芽率
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稻麦轮作体系下抗除草剂稻麦种质资源的挖掘与利用
《中国农业科技导报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：随着我国稻麦轮作区直播稻面积迅速扩大，直播连作田块杂草猖獗，田间除草剂与适播品种的应用需求愈发急迫，抗除草剂稻麦种质资源的开发与利用成为我国稻麦轮作区种业与农化企业联合发展的新方向。抗除草剂稻麦的配合轮作不仅降低了全年杂草的防除成本，增加了作物产量，同时也减少了除草剂对当茬和后茬作物的副作用，特别是安全、低残留选择性除草剂与抗性种质材料的配合使用，将显著降低除草剂滥用对生态环境的破坏以及野生稻和田间顽固性杂草的发生量，为助力实现稻麦轮作区稳产、优质、绿色、生态、安全的生产目标发挥重要作用。综述了农药市场主要的除草剂种类，并且从转基因与非转基因2个角度介绍了与其对应相关的抗除草剂稻麦种质资源的研究进展，为稻麦轮作区直播稻种植背景下抗除草剂品种（系）种药一体化栽培体系的构建提供理论依据。
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