科研产出
西花蓟马几丁质合成酶UAP基因克隆及功能分析
《福建农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】阐明几丁质合成通路中的关键基因UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(UDP N-acetylglucosamine pyrophosphorylases, UAP)对西花蓟马Frankliniella occidentalis生长发育的影响。【方法】基于西花蓟马转录组数据,克隆验证了UAP基因的开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)全长序列,命名为FoccUAP。利用RT-qPCR方法分析FoccUAP在各个组织和不同龄期的表达情况。最后通过向西花蓟马蜕皮24 h的2龄若虫显微注射ds UAP,检测沉默效率,观察其对西花蓟马生长发育的影响。【结果】FoccUAP基因开放阅读框全长1 545 bp,编码514个氨基酸,预测蛋白分子量为56.738 kDa,具有Glyco-tranf-GTA-type Super family家族的保守结构域,与等翅目、蜚蠊目、直翅目和半翅目昆虫的UAP基因亲缘关系较近。FoccUAP基因在西花蓟马各个组织都有表达,在头部和腹部相对表达量最高,触角、胸部和足相对表达量较低。该基因在虫体生长发育的各个阶段均有表达,其中2龄幼虫、蛹以及羽化后24、48、168、240 h的成虫表达量分别是1龄幼虫的1.30、2.50、1.56、2.0、2.43和2.56倍。RNAi结果表明,注射ds UAP的西花蓟马羽化率(36.3%)和注射后120 h的存活率(5.0%)均显著低于ds GFP对照组,且注射ds UAP的西花蓟马成虫出现翅膀发育不完整、胸腹部皱缩不规则等畸形现象。【结论】FoccUAP基因对西花蓟马生长发育具有重要的作用。
关键词： 西花蓟马 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶 几丁质合成 RNAi
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杏鲍菇菇头多糖的结构鉴定及生物活性评价
《食品科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：采用热水浸提法从杏鲍菇菇头中提取粗多糖,采用凝胶渗透色谱-示差折光指数-十八角激光散射联用技术测定粗多糖的分子质量分布,气相色谱法测定单糖组成,气相色谱-质谱联用法测定糖苷键链接方式,2,2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonicacid),ABTS)法测定抗氧化性,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法测定体外抗肿瘤活性,动物实验法检测体内抗肿瘤活性.结果表明:该粗多糖主要由葡萄糖组成(占84.4%);其分子质量分布较广,4个主峰分子质量分别为3.816*10~7、2.010*10~6、4.572*10~5 Da和1.849*10~5 Da;糖苷键主要链接方式为1,3-糖苷键(占42.7%)和1,6-糖苷键(占35.5%);当质量浓度为5 mg/mL时,粗多糖对ABTS阳离子自由基的抑制率为70.9%.动物实验表明,以200 mg/(kg·d)剂量连续灌胃12 d后,粗多糖对荷瘤小鼠(宫颈癌U14)的抑瘤率可达39.84%.
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文心兰FT同源基因的克隆及其表达分析
《西北植物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：FT(Flowering LocusT)及其同源基因被认为是植物开花、花发育相关的重要基因.为了深入研究FT同源基因的功能以及文心兰开花的分子机理,该研究以文心兰品种‘金辉’为试验材料,基于转录组测序结果,克隆获得‘金辉’FT同源基因,命名为OnFT(GenBank登录号为MK967676).OnFT基因编码区长度为537 bp,共编码178个氨基酸;生物信息学分析表明,该蛋白质分子量约为19.99 kD,可能是一种亲水性不稳定蛋白质,属于PEBP家族蛋白;基于FT的系统进化分析表明,文心兰与同科植物桃红蝴蝶兰的亲缘关系较近.qRT-PCR分析结果显示,OnFT在文心兰不同组织的表达差异较大,在花中表达量最高,在根中几乎不表达;OnFT基因在幼嫩花芽中的表达量较低,并且在花的成熟过程中逐渐增加;OnFT基因在叶片和假鳞茎中的表达量随成熟度的增长均呈先上升后降低的变化趋势,在中苗期的叶片和抽芽期的假鳞茎中表达量较高.
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逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒
《福建农业学报 》 2019 CSCD
摘要：[目的]齿兰环斑病毒Odontoglossum ringspot virus(ORSV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要.[方法]本研究根据ORSV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP(Reverse Transcription-Loop-mediated Iisothermal Amplification)检测方法.[结果]结果显示该方法能特异扩增ORSV,与其他4种侵染兰花的病毒(建兰花叶病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍.田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致.在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察即可判断样品是否感染ORSV,省去电泳分析的时间,并且增加了在田间的应用价值.[结论]该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点.
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茶树连作障碍形成机制及调控措施研究进展
《生态科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：茶树多年宿根连作后茶园土壤退化严重,茶叶产量和品质大幅下降,严重制约了我国茶叶的可持续生产.面对如何维持茶树高产高质这一科学难题,连作障碍机制及其调控措施成为当前茶树栽培中急待解决的科学问题.据此文章从土壤养分失衡、土壤酸化、自毒作用、土壤微生物群落结构失衡、根际微生态等方面概述了茶树连作障碍形成机制的研究进展,同时从化学改良、增施有机肥、生物质材料、生物菌肥、茶园多样性栽培等方面介绍缓解茶树连作障碍的主要措施,并对今后茶树连作障碍形成机制的进一步研究及防控技术的发展方向提出展望,以期为解决茶树连作障碍问题提供一些科学依据.
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山茶花品种观赏性状的主成分分析与观赏价值综合评价
《福建农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为山茶花科学引种和育种目标性状的选择提供参考。【方法】运用相关性分析和主成分分析法提取影响山茶花观赏性的关键因子,对28个山茶花品种进行观赏价值的综合评价与观赏品种的筛选,构建观赏价值综合评价模型。【结果】山茶花各观赏性状之间存在显著相关性,花量、瓣数与花期呈极显著正相关,花色与新叶色呈极显著正相关;13个性状可综合为花量因子、花期因子、花径因子、色彩因子和叶形因子等5个主成分,累积贡献率达85.48%,具有生物学意义;28个品种评为3个等级,筛选出金碧辉煌、花宝珠、花鹤翎、花芙蓉、正黄旗、黄的旋律、小桃红、红叶贝拉、杰作等9个观赏价值Ⅰ级的品种,评价结果与实地观测效果基本一致。【结论】山茶花观赏价值主要受花量、花期、花径、色彩和叶形等因子的综合影响,花量和花期是最关键的影响因子,要重点选择花大色艳、花量丰富、花期长,或具彩叶特征,整体观赏性强的品种作为推广栽培或育种的优良亲本材料。
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利用分子标记辅助选择改良闽恢3301稻瘟病抗性
《南方农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：[目的]改良三系杂交籼稻强势恢复系闽恢3301的稻瘟病抗性,以提高其在生产中的应用价值.[方法]以75-1-127和C101A51为稻瘟病主效基因Pi9和Pi2的供体亲本,以闽恢3301为受体亲本,通过杂交、多代回交和自交,结合分子标记辅助选择和田间选择的方法,将供体亲本的Pi9和Pi2基因导入闽恢3301中,改良其稻瘟病抗性.利用21个福建近年流行的稻瘟菌菌株及其混合菌液对闽恢3301改良系进行人工接种抗性鉴定,并连续两年在上杭茶地病圃进行田间自然诱发抗性鉴定.将闽恢3301改良系和闽恢3301分别与三系不育系荟丰A和广8A及两系不育系GRD-7S进行测配,考察其农艺性状,以闽恢3301为父本的杂交组合为对照.[结果]通过利用Pi2/9分子标记对抗病基因进行跟踪选择,最终获得含Pi9和Pi2的闽恢3301改良系(闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2)各20份.除闽恢3301-Pi9对SH17004菌株表现为中感外,闽恢3301-Pi9对其他20个稻瘟病菌株及于2016和2017年在田间自然诱发鉴定中均表现出抗病,且闽恢3301-Pi2对21个稻瘟病菌株及于2016和2017年在田间自然诱发鉴定中均表现出抗病或高抗,二者抗性达到甚至超过两供体亲本75-1-127和C101A51的抗性水平,但闽恢3301对7个稻瘟病菌株表现感病,对1个菌株表现中感,对其他菌株则表现中抗或抗病,且田间自然诱发鉴定中均表现高感,说明闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2抗性水平得到有效提高.除RGD-7S×闽恢3301-Pi9和RGD-7S×闽恢3301-Pi2组合的单株产量分别极显著(P<0.01)高于相应的对照组合外,其他以闽恢3301改良株系为父本的杂交组合在株高、穗长、分蘖数、千粒重、单株产量和结实率上无显著差异(P>0.05),表明闽恢3301-Pi2和闽恢3301-Pi9在培育稻瘟病抗性杂交水稻组合上具有广阔的应用前景.[结论]闽恢3301-Pi9和闽恢3301-Pi2抗性得到有效提高的同时在农艺性状和配合力等方面保持了闽恢3301及其组合的主要特性,说明利用Pi9和Pi2基因可有效改良闽恢3301的稻瘟病抗性,不仅拓宽了稻瘟病抗谱,还不影响闽恢3301的配合力,二者可作为新的水稻材料进行推广应用.
关键词： 闽恢3301 稻瘟病 抗性 分子标记辅助选择 Pi9 Pi2 农艺性状
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刺葡萄愈伤组织UFGT基因克隆及表达分析
《核农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为从细胞水平上揭示刺葡萄3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶(UFGT)基因调控花青素合成的功能,以刺葡萄愈伤组织为试验材料,根据刺葡萄愈伤组织转录组UFGT序列片段,利用RT-PCR结合RACE技术克隆得到VdUFGT基因,并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表明,VdUFGT基因cDNA和DNA开放阅读框(ORF)分别为1 371 bp和1 448 bp,包含2个外显子和1个内含子,编码456个氨基酸,为带负电荷的不稳定的亲水性蛋白,具有一个UDPGT结构域,是UDPGT超家族成员,包含UDP-黄酮糖基转移酶特征区域。由UFGT同源基因编码蛋白所构建的系统发育树,与植物进化的关系相一致,6个葡萄属植物聚为一支。RT-qPCR分析表明,刺葡萄红色愈伤组织VdUFGT转录水平极显著高于白色愈伤组织,培养25 d的2个细胞培养物差异可达79倍;在刺葡萄愈伤组织连续培养过程中,红色愈伤组织中Vd UFGT转录水平变化幅度较大,在愈伤组织快速生长中期和衰老初期分别出现峰值,而刺葡萄白色愈伤组织VdUFGT转录水平与红色愈伤组织相比变化幅度不大,且始终维持在一个较低的水平。说明VdUFGT对刺葡萄红色愈伤组织细胞培养物中的花青素生物合成有重要的调控作用,这种调控作用主要发生在刺葡萄愈伤组织细胞快速生长中期和细胞衰老初期。本研究结果为进一步阐明VdUFGT调控刺葡萄细胞花青素合成的机制奠定了理论基础。
关键词： 刺葡萄 愈伤组织 3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶基因(UFGT) 基因克隆 基因表达
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蓟马类害虫在不同品种芒果上的种群动态及寄主选择性
《福建农业学报 》 2019 CSCD
摘要：[目的]蓟马是芒果的主要害虫,明确不同品种芒果上蓟马的种群发生动态和消长规律,探讨蓟马类害虫对不同芒果品种的选择性,为有效防控芒果蓟马奠定基础.[方法]采用目测和抖网法对4种芒果品种上的蓟马发生情况进行连续一年的田间种群动态调查,并采用叶蝶法进行蓟马对不同芒果品种的室内选择性研究.[结果]在芒果园调查到的蓟马种类主要有花蓟马Frankliniella intonsa Trybom、黄胸蓟马Thrips hawaiiensis Morgan和茶黄蓟马Scirtothrips dorsalis Hood.芒果蓟马种群发生数量先逐渐上升后下降,发生高峰期集中在4月中旬到6月下旬.芒果园3种主要蓟马均在凯特芒果上发生种群数量较大,季芒品种上发生量最低.室内选择性试验也表明,蓟马喜食凯特芒果叶片,而对季芒芒果叶片的选择性较低.[结论]芒果蓟马发生高峰期在4月中旬到6月下旬,且在凯特芒果上发生严重,在季芒上发生量轻,说明芒果品种影响芒果蓟马发生,不同品种芒果的抗虫性水平存在差异.研究结果为芒果品种对蓟马类害虫的抗性评价以及芒果蓟马的预测预报和综合防治提供依据.
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嘉宝果叶片总多酚提取工艺优化及其体外降糖活性
《福建农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】优化嘉宝果叶片总多酚的提取工艺,检测优化提取后的嘉宝果叶片提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。【方法】利用超声波辅助与乙醇提取相结合的方法,以总多酚提取量为考察指标,采用单因素及正交试验,研究功率、时间、乙醇体积分数、料液比和温度对嘉宝果叶片总多酚提取量的影响,并采用酶动力学及紫外可见吸收光谱法探讨叶片提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性。【结果】嘉宝果叶片总多酚的最佳提取工艺为:功率120W,时间10min,乙醇体积分数40%,料液比1∶160 (g∶mL),温度40℃,在此条件下,嘉宝果叶片总多酚质量分数可达33.84%。优化提取后的嘉宝果叶片提取物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,半数抑制浓度IC_(50)为0.003 1mg·mL~(-1),阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC_(50)为8.110 8 mg·mL~(-1);Lineweaver-Burk双倒数作图显示嘉宝果叶片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为反竞争性抑制。【结论】正交实验法优化嘉宝果叶片总多酚提取具有可行性,嘉宝果叶片总多酚对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,可作为降血糖功能因子进行开发利用。
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