科研产出
嵌合O型口蹄疫病毒多表位基因猪细小病毒VLPs载体疫苗的构建
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPVVP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDVVPl蛋白上多表位基因(VPl:21-40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDVVPl:PPVVP2,用脂质体法转染Sf9细胞.对rBac.FMDVVP1:PPVVP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒.红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV:VP2-FMDV:VPl具有与全病毒类似的血凝活性.
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基于染色体单片段代换系的水稻芒性QTL定位
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：水稻的芒性是一个与驯化相关的重要性状,是由多基因控制的数量性状,遗传基础复杂,且易受环境因素影响。染色体单片段代换系由于减少了个体间遗传背景的干扰,已经成为鉴定复杂性状QTL的新型遗传材料。以籼稻品种广陆矮4号为受体和粳稻品种日本晴为供体构建而成的119个染色体单片段代换系为材料,对芒长性状进行了调查分析。结合2011,2012年的调查结果,通过代换作图共鉴定出15个与芒性相关的QTL,这些QTL分布在除1,10,12外的9条染色体上,第3染色体上检测到的QTL最多为3个。15个QTL中效应最大的QTL是qAN4-1,2年平均芒长为4.7 cm;效应最小的QTL是qAN11-2,2年平均芒长为0.7 cm。这些QTL的定位,为进一步克隆芒性相关基因以及研究芒性的分子机理提供了重要的依据。
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甘薯β-胡萝卜素含量相关AFLP分子标记的开发
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了提高高β-胡萝卜素食用型甘薯品种的选育效果,本试验利用徐薯25(低胡萝卜素品种)和徐22-5(高胡萝卜素品系)及其杂交F1代分离群体,开发与甘薯β-胡萝卜素合成基因相关的AFLP分子标记。采用Logis-tic向前逐步回归法(P<0.05)引入AFLP标记,建立Logistic回归模型,检验41个甘薯杂交后代是否符合根据β-胡萝卜素含量高低进行的表型分组,并利用5个高胡萝卜素含量和5个低胡萝卜素含量甘薯品种(系)验证Logistic回归模型的可靠性。检测结果显示,41个杂交后代中仅有2个供试材料不符合预期分组,准确率高达95.1%,10个验证材料完全符合预期分组。表明在甘薯生长发育早期,可以通过该模型对高β-胡萝卜素性状进行辅助选择。
关键词： 甘薯 β-胡萝卜素含量 AFLP分子标记 Logistic回归模型
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猪肺炎支原体气溶胶富集检测技术的建立(英文)
《农业科学与技术(英文版) 》 2013
摘要：[目的]建立一个高效的猪肺炎支原体气溶胶富集和检测技术,以弥补临床上猪肺炎支原体气溶胶检测技术的空白.[方法]结合液体冲击式采样器和过滤式采样器的原理,自行设计一个气溶胶双重富集装置,并在密闭环境下采集人工制备的猪肺炎支原体气溶胶,荧光定量PCR检测以确定该装置的采集效率.再通过收集不同猪群中的气溶胶进行检测以确定该装置临床应用的可行性.首先,收集人工感染Mhp阴性仔猪后不同时间猪舍内的气溶胶;其次,收集1个猪支原体肺炎发病猪场和1个阳性未发病猪场的产房、保育舍和育肥舍共11个猪舍的气溶胶,荧光定量PCR或套式PCR检测所收集的气溶胶.[结果]实验室模拟采样的采集效率达到(37.04±6.43)%,人工感染猪肺炎支原体后7天即在饲养房间的气溶胶中检到猪肺炎支原体;2个猪场共11个不同猪舍气溶胶中猪肺炎支原体检测结果均为阳性,检出率100%.[结论]成功建立了一个高敏感性的猪肺炎支原体气溶胶富集检测技术,适用于临床上猪肺炎支原体气溶胶的检测.
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固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定食用调味油中的罗丹明B
《理化检验(化学分册) 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：食用调味油样品经丙酮提取后,所得提取液经MCX阳离子固相萃取柱提取,用氨水甲醇(5+95)溶液洗脱,洗脱液在45℃氮吹至近干后用2mL甲醇定容.以ACQUITYBHEC18色谱柱为分离柱,以不同体积比的0.1%(体积分数)甲酸溶液和甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子源多反应监测模式检测.罗丹明B的质量浓度在1.00~100μg·L^-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为0.003mg·kg^-1.在0.01,0.05,0.20mg·kg^-1 3个浓度水平下进行加标回收试验,所得方法的回收率在82.1%~97.2%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于9%.
关键词： 固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱法 罗丹明B 食用调味油
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水稻重组自交系分子遗传图谱构建及分蘖角的QTL检测(英文)
《农业科学与技术(英文版) 》 2013
摘要：利用株型差异显著的特大粒粳稻品系TD70和籼稻小粒品种Kasalath为亲本配制组合,以单粒传方法构建含240个株系的重组自交系(RIL)群体选用838对SSR引物进行亲本多态性筛选,共检测到302对具有多态性的引物,频率为36.04%从中选择带型清晰且在基因组中均匀分布的141个SSR标记对RIL群体进行基因型分析,结果表明:群体中父母本基因频率分别为53%和47%,群体结构平衡性好构建的水稻分子连锁图谱共包含141个标记座位,总图距约1832.47cM,标记间平均图距为12.7cM,标记间图距范围为0.43~36.11cM,符合QTL作图的基本要求除第1、第8染色体个别标记位置外,其他染色体上标记顺序和位置与已公布的日本晴遗传图谱序列基本一致以该群体为材料,对分蘖角度进行了QTL检测,共检测到控制分蘖角度的3个QTL位点,分别是qTA8、qTA9和qTA11,贡献率分别为4.10%、26.08%和4.35%,其中qTA9包含控制水稻分蘖角度基因TAC1.该图谱的构建为研究籼粳交后代各种性状的遗传规律及QTL定位打下了基础.
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NO和采收成熟度对冷藏水蜜桃品质的协同影响(英文)
《农业科学与技术(英文版) 》 2013
摘要：研究了硝普钠(SNP)处理对不同成熟度'随缘'桃果实采后品质及褐变水平、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果表明,在30d的贮藏过程中,SNP处理可维持不同成熟度桃果实的硬度,但其对可溶性固形物的影响不显著.在贮藏10天和30天时,SNP处理可减缓低成熟度桃果实可滴定酸含量的下降,但在高成熟度中,SNP处理果实的可滴定酸含量较对照低.然而,高成熟度结合SNP处理可提高桃果实的SOD活性,降低PPO和POD活性,并抑制其褐变水平.因此,高成熟度结合SNP处理可作为维持水蜜桃果实品质的有效方法.
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