科研产出
2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】制备无色孔雀石绿(LMG)单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立LMG残留的免疫学检测方法奠定基础。【方法】通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿-牛血清白蛋白偶联物(LMG-BSA)与副品红-牛血清白蛋白偶联物(PA-BSA),用紫外扫描、质谱法方法鉴定偶联物。利用制备的LMG-BSA与PA-BSA作为免疫原,免疫4~5周龄Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备LMG单克隆抗体,并对其效价、亲和力、灵敏度和特异性等进行分析。【结果】LMG-BSA与PA-BSA的偶联比率分别为7∶1和37∶1;经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,由LMG-BSA和PA-BSA抗原各获得1株杂交瘤细胞,分别命名为L-1、P-1。这2株细胞株分泌的单克隆抗体纯化后,经测定效价分别为1.25×105和6.25×106,亲和力常数分别为4.92×109和1.44×108L/mol,半抑制质量浓度(IC50)分别达8.03和10.5μg/L。L-1分泌的单克隆抗体仅与孔雀石绿存在交叉反应,交叉反应率为100%;P-1分泌的单克隆抗体与孔雀石绿及副品红均存在交叉反应,交叉反应率分别为80%与100%。【结论】成功获得了2株LMG单克隆抗体,其均可用于水产品中LMG残留的快速检测。
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盐度变化对斜带石斑鱼生理生化因子的影响
《水产学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用生化分析方法研究了盐度变化(24、14、4及对照34)对斜带石斑鱼幼鱼[体质量(19.59±0.25)g]相关生理生化因子的影响,不同盐度处理后1、3、6和9 d检测鳃丝Na+/K+-ATP酶、血清中血糖、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、溶菌酶,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)含量及H.E染色观察鳃丝氯细胞的变化。结果显示,各盐度试验组斜带石斑鱼幼鱼的Na+/K+-ATP酶活性变化基本一致,均在第3天达到最高值,随后下降,至第6天达到稳定。鳃丝氯细胞数量在盐度24试验组中变化不大,在盐度14试验组中则略有减少,在盐度4试验组中鳃丝氯细胞6 d后出现变化,氯细胞数量减少,胞核较大,H.E染色较深,细胞处于较原始的状态。各盐度试验组斜带石斑鱼幼鱼的血糖水平变化趋势相一致,均在第6天到达峰值,随后呈下降趋势。AST水平在盐度24、盐度4试验组随时间的延长呈上升趋势,在第9天后到达各自的最高值,盐度14试验组则呈现持续下降趋势。SOD活性随时间的延长呈现先降低后上升的趋势,在第3天时各试验组达最小值,但试验组间SOD活性差异显著(P<0.05)。溶菌酶活性随时间的延长呈上升趋势,试验组在第6天达到的峰值,随后下降并趋于稳定,试验组间差异显著(P<0.05)。结果表明,斜带石斑鱼幼鱼通过盐度驯养,由盐度34水体逐渐淡化至盐度为24、14、4的水体中,能较快适应盐度低至4的水环境。
关键词： 斜带石斑鱼 盐度胁迫 Na+/K+-ATP酶 氯细胞 血糖 天门冬氨酸氨基转移酶 超氧化物歧化酶 溶菌酶
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大口黑鲈溃疡综合征病毒TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立
《华南农业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：根据大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,LBUSV)的甲基转移酶(MTase)基因核苷酸序列设计引物及TaqMan-MGB探针,优化荧光定量PCR反应条件和反应体系,建立了LBUSV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法.用含有MTase基因的质粒pDNA-MT系列稀释作为标准品模板,在荧光定量PCR仪上进行PCR反应,绘制标准曲线,斜率为-3.24,R2=0.999,呈现很好的线性关系,扩增效率1.04.灵敏度检测结果表明,PCR反应24个循环时可以检测到的质粒最小浓度是102拷贝数/μL.选用107、106、105、104拷贝数/μL 4个浓度梯度质粒做模板,变异系数在1.1%~3.4%范围内,说明该方法具有良好的重复性和稳定性.利用该方法可以准确地检测出感染LBUSV的病鱼,特异性强.
关键词： 大口黑鲈溃疡综合征病毒 TaqMan-MGB探针 定量PCR 病毒检测
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淀山湖主要放流鱼种鲢和鳙生长的研究
《海洋湖沼通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：本文根据2006-2008年淀山湖鲢鳙标记回捕数据以及刺网调查数据,研究了淀山湖鲢鳙的生长,根据鱼类体长推算公式分别推算出鲢鳙的生长指标;并计算出淀山湖鲢鳙的体长体重关系和肥满度。体长和体重关系分别为鲢:W=6×10-5L2.8371,(n=216,R2=0.8886);鳙:W=5×10-5L2.8609,(n=55,R2=0.9747)。鲢鳙夏季肥满度分别为鲢:K2006=0.001913±0.000142、K2007=0.002165±0.000218、K2008=0.002115±0.000306、K2009=0.001966±0.000112;鳙:K2006=0.002129±0.000239、K2007=0.002346±0.000262、K2008=0.002382±0.000247、K2009=0.002436±0.000282。与其他水域相比,淀山湖鲢和鳙生长速度较慢。
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尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及其杂交后代微卫星标记鉴别和种质纯度分析
《上海海洋大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：从罗非鱼微卫星遗传图谱前6个连锁群上随机选取43个微卫星位点,对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)、尼罗罗非鱼吉富品系(GIFT)、奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)以及尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼杂交后代的DNA进行PCR扩增,筛选出7个位点(UNH995、GM066、GM166、UNH162、GM017、GM440、UNH948)在不同罗非鱼中扩增的条带差别明显,具有特异性,可作为罗非鱼鉴定的分子标记,用其中任意一个位点都可以将尼罗罗非鱼或吉富罗非鱼、奥利亚罗非鱼、杂交罗非鱼区别开来。这7个标记位点在尼罗罗非鱼、吉富罗非鱼和奥利亚罗非鱼中平均每个位点检测到等位基因个数分别为3.1、2.3、1.7,等位基因大小在130～316 bp。这7个标记位点上,尼罗罗非鱼与奥利亚罗非鱼PCR扩增的条带大小相差在20 bp以上,对其中2个位点扩增的条带进行测序分析,结果表明是由于微卫星重复次数的差异而造成的。用这7个位点对尼罗罗非鱼、吉富罗非鱼和奥利亚罗非鱼群体的种质纯度进行检测,结果表明,这3个罗非鱼群体中分别有8%、4%、4%的个体在有些位点上的谱带与杂交罗非鱼的相似,可能存在基因污染。
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夏季南奥克尼群岛西部水域南极磷虾资源时空分布及其与表温之间的关系
《海洋环境科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：根据2010年1月31日～2月13日在南极南奥克尼群岛西部水域开展的南极海洋生物资源调查期间收集的数据及卫星获取的水温数据(海水表温和表温距平),对南极磷虾时空分布及其与表温之间的关系进行了分析。结果表明:(1)02:00～18:00为南极磷虾群出现频率较高的时段,随后南极磷虾群出现概率开始下降,至22:00～02:00时间段降至最低。(2)越靠近南奥克尼群岛,南极磷虾的丰度越高,而外洋水域的丰度相对较低;磷虾群主要出现在60°00'～60°30'S,46°30'～47°30'W范围内。(3)磷虾群主要出现在表温在1.4～1.5℃或表温距平为-0.1～-0.2℃范围内,而表温在1.2℃或表温距平在-0.2℃以下时,磷虾群出现的概率较低。本研究结果可为开发南极磷虾资源提供基础数据,并为海上生产提供指导性参考。
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剑尾鱼卵黄蛋白原C(Vg C)全长cDNA的克隆及表达
《水产学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法,克隆获得剑尾鱼卵黄蛋白原C(Vg C)基因的全长cDNA序列。剑尾鱼Vg C基因cDNA序列全长4 011 bp,其5'非编码区包含12 bp和3'非编码区包含246 bp;含有一个3 753 bp的开放阅读框(ORF),编码1 250个氨基酸,推测其编码氨基酸分子量大小为141.7 ku,编码氨基酸序列与其他鱼类卵黄白原C编码氨基酸序列相似性在44%～85%。荧光定量PCR结果显示,Vg C在剑尾鱼肝脏中表达量最高,脾、肾、卵巢中有微量表达,脑、肌肉、鳃中几乎没有检测到表达;对不同时间暴露在雌激素中剑尾鱼肝脏进行实时荧光定量PCR表达分析的结果表明,Vg C在剑尾鱼肝脏中第5天表达量最高,随后降低,第9天后维持相对较低的表达量。研究首次克隆了剑尾鱼Vg C基因全长cDNA序列,并对Vg C在剑尾鱼体内表达组织器官分布及雌激素诱导后不同时间表达谱进行了初步研究,为剑尾鱼生殖生理及环境污染物监测应用等不同领域研究打下重要基础。
关键词： 剑尾鱼 卵黄蛋白原C 克隆 表达 荧光定量PCR 17β-雌二醇
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几种有机氯杀虫剂对鱼的毒性和残留效应
《环境化学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：硫丹、氯丹、五氯苯酚、三氯杀螨醇等有机氯杀虫剂,只允许在特殊场合使用,禁止在动物养殖业使用,但在世界上普遍存在限而不严、禁而不止的状况,威胁渔业环境安全和水产品质量.中国是水产品的生产大国和重要输出国,鱼类是中国主要的水产品.本文概述这几种杀虫剂的用途、水环境行为、渔业生产中的来源、对鱼类的毒性、对渔业的影响、中国渔业相关标准.寻找作物丰收、公共卫生、蚁害防治与鱼类健康养殖的平衡点,必须多管齐下,控制硫丹、氯丹、五氯苯酚、三氯杀螨醇的负面影响就是其中的一项重要任务.
关键词： 硫丹 氯丹 五氯苯酚 三氯杀螨醇 毒性效应 残留效应
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2010年春季长江口鱼类群落空间分布特征
《中国水产科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为探索长江河口生境条件改变对重要生物的影响状况,揭示生境条件对生物资源影响的机理,根据2010年5–6月在长江口进行的渔业资源与生态环境调查数据与历史资料,用根据扫海面积计算的栖息密度研究了鱼类群落结构的变动状况,以及5–6月鱼类群落结构及其与环境因子的关系。结果显示,2010年5–6月共记录鱼类40种。种类数目较多的科分别是鳀科和虾虎鱼科(均为5种),其次为石首鱼科(4种)及舌鳎科(3种);鱼类栖息密度以当年卵化幼鱼为主,矛尾虾虎鱼、棘头梅童鱼、凤鲚和刀鲚为栖息密度最大的4种鱼类,占调查区域鱼类栖息密度的94.11%。聚类分析和非度量多维测度分析发现,春季鱼类有明显的空间分布差异,除趋势典范对应分析的9个环境因子中,水深、表层盐度和底层盐度对河口内部鱼类丰度和栖息密度影响最大,而底层pH值、表层盐度和底层温度则对河口外部鱼类群落影响最大。与历史资料相比,目前记录的鱼类物种数目(40种)少于1985年5月或6月(69种,62种),而栖息密度(5.20×104ind/km2)高于1985年5月或6月(1.72×104 ind/km2,2.29×104 ind/km2)。本研究表明虽然长江口仍为棘头梅童鱼、刀鲚、凤鲚等重要经济鱼类的产卵场和肥育场,但是鱼类群落结构已经发生了较大的变化。
关键词： 长江口 鱼类群落结构 栖息密度 环境因子 多元分析
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