哈维氏弧菌胞外蛋白酶基因的表型克隆与序列分析

潘晓艺; 沈锦玉; 曹铮; 尹文林; 郝贵杰; 徐洋; 姚嘉赟; 《生物技术通报 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：哈维氏弧菌是引起大黄鱼疾病的主要致病菌之一,胞外蛋白酶是哈维氏弧菌GYC1108-1的主要致病因子。利用表型克隆技术,用Sau3AⅠ将提取的哈维氏弧菌基因组DNA酶切成短片段,纯化回收1-5 kb的片段与BamH I酶切的pUC118在T4连接酶的作用下进行连接,并转化感受态细胞TG1,在含0.5%脱脂奶和100μg/mL氨苄青霉素的LB平板上筛选胞外蛋白酶阳性株,命名为YZ。测定阳性株YZ的胞外蛋白酶活性,并对阳性株的重组质粒的插入片段进行序列测定,分析开放阅读框,确定胞外蛋白酶基因编码区。发现蛋白酶基因的ORF编码531个氨基酸,在起始密码子ATG上游存在一个核糖体结合位点(SD),其上游的启动区与大肠杆菌的σ70启动区和枯草芽孢杆菌的启动区高度同源。在终止子(TAG)下游,存在两个反向重复序列,为推导的2个转录终止子。哈维氏弧菌胞外蛋白酶基因的克隆与诠释为哈维氏弧菌致病机理和疫苗的开发奠定了基础。

关键词： 哈维氏弧菌 大黄鱼 胞外蛋白酶 表型克隆

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团头鲂对营养需求的研究进展

张媛媛; 刘波; 周传朋; 戈贤平; 谢骏; 徐跑; 《安徽农业科学 》 2010 北大核心

摘要：综述了团头鲂对蛋白质和氨基酸、脂肪和脂肪酸、碳水化合物、维生素、矿物质的需要量,及其在配合饲料中的适宜含量、影响团头鲂营养需求的因素,展望了其研究前景。

关键词： 团头鲂 营养需求 饲料 研究进展

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温度变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率的影响

徐东; 张继红; 王文琪; 杜美荣; 任黎华; 王忠; 《中国水产科学 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：为探索虾夷扇贝(Datinopecten yessoensis)夏季大量死亡的生理原因,模拟虾夷扇贝筏式养殖区夏季水温变化情况,采用室内控温实验,研究了温度剧烈和缓慢变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率的影响及其影响的差异性。实验设置10℃、15℃、20℃、25℃4个温度梯度,设计温度骤变(每小时升温5℃)和温度缓变(每天升温1℃)2种温度处理方式,测定升温前后耗氧率和排氨率。结果显示,温度变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率影响显著(P<0.05)。温度缓变组耗氧率变化范围为1.910～2.722mg(/g·h),排氨率变化范围为1.499～5.003μm/(g·h),耗氧率(OR)和排氨率(NR)与温度(T)之间的相关方程为OR=2.303+0.425T-0.133T(2R2=0.941)和NR=-1.536+4.384T-0.893T(2R2=0.435)。温度骤变组耗氧率和排氨率大于温度缓变组,且温度骤变组耗氧率在15℃、20℃和25℃,排氨率在20℃和25℃与温度缓变组差异显著(P<0.05)。

关键词： 虾夷扇贝 温度骤变 温度缓变 耗氧率 排氨率

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中药诃子的主要成分没食子酸在异育银鲫体内药物代谢动力学研究

仇登高; 郑曙明; 张洪玉; 郑宗林; 聂鲡蓉; 《淡水渔业 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：在(20±1)℃的水温条件下,以77 mg/kg的单剂量,给异育银鲫(Carassius auratus gibelio)口灌诃子(Fructus chebulae)水剂,以诃子中的主要成分没食子酸为检测目标,用高效液相色谱法(HPLC)检测给药后各个时间点的血药浓度。结果显示:最低检测限为0.01μg/mL,线性范围为0.01～84.00μg/mL。诃子在异育银鲫体内的药动学过程符合一级吸收二室开放房室模型(1/C/C),其药物动力学方程为C=39.237e-0.320t+4.814e-0.006t,主要药动学参数为:吸收速率常数(Ka)为0.56 h-1,吸收半衰期(t1/2ka)为1.238 h,分布半衰期(t1/2α)为2.164 h,消除半衰期为(t1/2β)为119.369 h,达峰时间(Tmax)为4 h,最大血药浓度(Cmax)为11.024μg/mL,血药浓度-时间曲线下面积(AUC(0-∞))=674.89μg.h/mL,延滞时间(TL)为0.286 h,药物平均滞留时间(MRT(0-∞))=113.626 h,总体消除率(CLs)为0.112 L/(kg.h),表观分布容积(Vd)为13.713 L/kg。这些参数表明,异育银鲫口灌诃子后,能比较迅速被吸收,并且在血浆中维持较长的时间,具有较好的应用价值基础。

关键词： 诃子(Fructus chebulae) 没食子酸 异育银鲫(Carassiusauratus gibelio) 药物代谢动力学 高效液相色谱法(HPLC)

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高效液相色谱法对鱼体肌肉组织中喹烯酮及其代谢物残留量的同时检测

杨莉; 艾晓辉; 袁科平; 汪开毓; 《分析测试学报 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：以斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)、鲤(Cyprinus carpio Linnaeus)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验材料,建立了一种用高效液相色谱法同时检测鱼体肌肉组织中喹烯酮及其代谢物脱二氧喹烯酮残留量的方法。样品经乙腈、正己烷脱脂,旋转蒸发浓缩,乙酸乙酯洗脱,50℃氮气吹干及流动相定容后,采用Wa-ters 515高效液相色谱仪在320 nm波长处检测,流速为1.0 mL/min,外标法定量。喹烯酮在0.08~2.50mg/L范围内呈线性,相关系数r=0.999 7,加标回收率为75%~84%,检出限为3.48~7.35μg/kg;脱二氧喹烯酮在0.02~0.50 mg/L范围内呈线性,相关系数r=0.999 7,加标回收率为74%~83%,检出限为5.67~16.23μg/kg。

关键词： 斑点叉尾鮰 鲤 草鱼 喹烯酮 脱二氧喹烯酮 残留量 高效液相色谱

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瓦氏雅罗鱼达里湖群体和乌苏里江群体的遗传多样性和遗传结构分析

池炳杰; 常玉梅; 闫学春; 曹顶臣; 高玉奎; 柳玉海; 李勇; 梁利群; 《中国水产科学 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：选用5个瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii Dybowski)微卫星标记和13个草鱼微卫星标记,对分别采自内蒙古境内的达里湖和乌苏里江抚远江段的各15尾野生瓦氏雅罗鱼个体进行STR-PCR分析。结果显示,18个微卫星标记共检测到111个等位基因,平均每个基因座扩增得到6.1667个等位基因,观测杂合度(H o)0.1000～0.9333,平均为0.5315;期望杂合度(H e)0.0966～0.9328,平均为0.6298;多态信息含量(PIC)0.0905～0.9113,平均为0.5774;乌苏里江群体的平均等位基因数和平均观测杂合度分别为5.5556和0.5778,达里湖群体的平均等位基因数和平均观测杂合度均低于乌苏里江群体的平均等位基因数和平均观测杂合度,分别为4.3889和0.4852。2个群体间的遗传距离(D c)为0.2550。个体聚类结果显示,达里湖雅罗鱼所有个体聚为一簇,乌苏里江雅罗鱼所有个体聚为一簇。群体间的遗传分化指数(F st)为0.0855,数值介于0.05～0.15,N m值为2.6749,表明这2个群体处于中等分化,存在一定程度的基因交流。对2个群体的基因型进行了Hardy-Weinberg平衡的卡方检验,结果表明两群体均在一定程度上偏离了平衡。

关键词： 瓦氏雅罗鱼 微卫星标记 遗传多样性 遗传结构

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雨生红球藻中虾青素提取方法研究现状

孟春晓; 高政权; 王依涛; 罗韬; 叶乃好; 《水产科学 》 2010 北大核心

关键词： 雨生红球藻 虾青素提取

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牙鲆抗鳗弧菌病家系筛选及其分析

徐田军; 陈松林; 田永胜; 王磊; 《中国水产科学 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：2007年以从养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)中筛选出的抗病选育群体、从日本引进的日本群体以及从黄海捕捞的野生群体为基础,进行各种组合方式的交配,建立了63个牙鲆家系;2008年又建立了30个家系。对2007年培育的59个家系和2008年培育的30个家系进行了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染实验,结果表明,不同家系间的抗病力存在极显著的差异(P<0.01)。从2007年培育的59个家系中筛选出4个抗病家系,鳗弧菌感染后存活率达到50%以上;2008年的30个家系中5个家系抗病力较强,鳗弧菌感染后的存活率达到60%以上。2008年培育的30个家系其4月龄和6月龄的感染后存活率的相关系数为0.403(P<0.05),表明不同生长时期的感染结果具有一致性。230d的体长和体质量与对鳗弧菌的抗病力存在显著的相关关系(P<0.05),皮尔森相关系数分别为0.282和0.237。研究发现,日本群体与抗病选育群体的杂交后代抗病性能表现优异,可以通过日本群体与中国群体间的杂交进行遗传改良,达到培育出高产、抗病牙鲆新品种的目的。

关键词： 牙鲆 杂交组合 家系 鳗弧菌 抗病力

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胶州湾浮游动物的时空分布

黄凤鹏; 孙爱荣; 王宗灵; 杨玉玲; 黄景洲; 《海洋科学进展 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：根据2003年1—12月在胶州湾所获得的浮游动物样品,鉴定出浮游动物71种,幼虫、幼体34类。分析了该海域浮游动物的分布﹑时空变化及其与生态环境因子的关系,同相关历史资料进行了比较,结果表明,浮游动物的种类多样性符合中纬度海湾水域浮游动物分布的一般规律,生态属性以暖温带、近岸低盐种类为主。浮游动物生物量和丰度的分布具明显的季节性变化,生物量平均为84.28mg/m3,饵料生物丰度平均为531.76个/m3,非饵料生物为72.08个/m3。浮游动物生物量和饵料生物丰度的分布季节变化与海水平均温度的季节变化节律基本一致,相关回归分析亦证实与温度的关系更为密切。浮游动物生物量的时空分布﹑种类多样性的变化趋势,近20a来基本相同,高峰出现时间的差异,主要是受温度年季和季节变化差异因素的影响。

关键词： 浮游动物 时空分布 胶州湾

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南非发展淡水养殖业需要关注的几个问题

于瑞; 李应仁; 王佳迪; 《中国渔业经济 》 2010 北大核心

摘要：2006年以来,中国与南非双方签署了多项合作协议和谅解备忘录,开启了中国与南非以农业领域为重点的全面合作。就渔业而言,南非共和国捕捞业发达,养殖业薄弱。本文基于中国援助南非渔业技术示范中心项目的双方座谈、实地考察和收集资料,就南非水产养殖业发展中需要关注的水资源、气候、市场、水产养殖技术、环境保护等问题进行了分析,希望对有志于南非水产养殖业研究的专家学者提供一定的参考。

关键词： 南非 淡水养殖业 发展 问题

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