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海洋侧孢短芽孢杆菌S-12-86溶菌酶的分离纯化与冻干技术研究

渔业科学进展 2010 北大核心 CSCD

摘要:海洋微生物溶菌酶发酵液经低温离心、超滤浓缩、乙醇提取、Superdex 75 10/300凝胶层析和反相高效液相色谱层析纯化得到电泳纯海洋溶菌酶,分子量为17.1 kD,比活达到3 987.7 U/mg,纯度提高41.98倍,活力回收率为21.7%。对该酶冷冻干燥过程的研究结果表明,海藻糖、蔗糖和麦芽糖对该酶均有一定的冻干保护作用。其中,以海藻糖的保护效果最佳。0.5 mol/L海藻糖与20 mg/ml吐温80复合作为冻干保护剂,使冻干后的溶菌酶活性维持在95%以上,为该酶进一步研究和应用提供了稳定的酶制剂。

关键词: 海洋微生物 溶菌酶 分离纯化 冷冻干燥

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长江草鱼群体MHC Class ⅡB的多态性和进化分析

淡水渔业 2010 北大核心 CSCD

摘要:克隆及测序草鱼(Ctenopharyngodon idella)长江3个群体的主要组织相容性复合体(MHC)Class II B基因编码β1和β2区的第2和第3个外显子及两个外显子之间的内含子,分析了草鱼MHC的进化模式和种群遗传结构。结果显示:实验共定义了34个等位基因,每条序列包括长为130~136 bp的第2个外显子,长为218 bp的第3个外显子以及长81~371 bp的内含子。序列分析揭示,第2个外显子有106个核苷酸变异位点(78%)和40个氨基酸变异位点(88%),而第3个外显子有100个核苷酸变异位点(45%)和41个氨基酸变异位点(56%),β1变异要大于β2区。用β1和β2区序列分别构建的邻接(NJ)系统树均显示5个具有高支持率的谱系,结合序列变异特点和内含子长度,推测草鱼至少存在5个MHC Class II座位。分别计算β1的肽结合位点(PBR)、非肽结合位点及β2的非同义替换率(dN)和同义替换率(dS),PBR的dN/dS为2.03(P<0.05),非肽结合位点和β2则小于1,表明草鱼MHC受到歧化选择作用。根据等位基因在群体中的分布频率作分子方差分析(AMOVA),得出FST为0.37%,提示长江草鱼MHC没有遗传分化。

关键词: 草鱼(Ctenopharyngodon idella) 主要组织相容性复合体(MHC) 遗传变异 进化模式

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鲤TRAP分子标记反应体系的建立与优化

动物学杂志 2010 北大核心 CSCD

摘要:针对鲤(Cyprinus carpio)这一主要水产养殖品种设计了靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)分子标记的反应体系,对影响TRAP反应体系的各参数,包括Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA和引物浓度进行了优化,建立了适合鲤的、稳定、可重复的TRAP-PCR反应体系。在15μlPCR反应体系中,Mg2+浓度为1.5mmol/L、dNTPs浓度为0.35mmol/L、两个随机引物浓度均为3pmol/L、固定引物浓度为10pmol/L、含DNA模板60ng、TaqDNA聚合酶1.0U。鲤的TRAP反应程序为:94℃4min,1个循环;94℃45s,35℃45s,72℃1min,5个循环;94℃45s,53℃45s,72℃1min,35个循环;72℃10min,1个循环。这一优化体系的建立为今后进行鲤群体遗传多样性、种质鉴定、遗传连锁图谱及亲缘关系分析等方面的研究提供了新的分子标记。

关键词: TRAP标记 体系 优化

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超声波遥测在水生动物生态学研究中的应用

生态学杂志 2010 北大核心 CSCD

摘要:超声波遥测应用于水生动物是基于海洋生物学家对自然环境中海洋动物的行为和生理研究的迫切需求而诞生的。目前已发展成为包括鱼类、甲壳类、豚类以及海龟等水生动物生态学研究的主要手段之一。本文回顾了超声波遥测应用于水生动物近50年来的发展历程,介绍了该技术的系统组成和使用方法,阐述了该技术的应用范围,分析了其应用于水生动物遥测所面临的问题,提出了相应建议和应用前景。

关键词: 超声波遥测 行为 栖息地 生态环境 水生动物

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淡干海参和糖干海参-干海参的市场暗战

科学养鱼 2010 北大核心

摘要:海参是目前海水养殖业中的一支新军,形成了海水养殖的第五次浪潮,辽宁、山东两省养殖海参产量达到全国的95%以上,2009年全国海参增养殖面积已达150多

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我国主要水产养殖模式能耗调查研究

渔业现代化 2010 北大核心

摘要:为了解我国水产养殖能耗现状,对我国水产养殖主产区进行了养殖能耗调研,并对主要养殖模式和养殖种类的能耗进行了统计分析。结果表明:养殖模式和养殖种类显著影响水产养殖的耗电量,耗电量与养殖单产的相关性不显著。主要的养殖模式存在不同程度的能源浪费现象,从整体上看,养殖技术装备水平比较落后,养殖户的节能意识不强,高排放高污染的养殖方式、技术、设备仍在使用。能源利用和管理还存在许多问题和薄弱环节,节能潜力巨大。工厂化循环水养殖方式具有显著的节能减排效果,但其研究仍处于起步阶段,尚未形成较为有效的实用技术。

关键词: 水产养殖 能耗水平 节能减排 调查

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牡蛎壳丙酸钙的非煅烧法制备工艺及其抑菌活性研究

食品工业科技 2010 北大核心 CSCD

摘要:以牡蛎壳为钙源,不经过高温煅烧,经粉碎、水飞法处理后直接用于制备丙酸钙。为了获得最佳工艺条件,考察了反应温度、丙酸量、反应时间等因素对产率的影响。结果表明,在60℃、丙酸过量75%条件下转化反应进行2h,丙酸钙产率可达87.9%,且产品纯度大于99.5%。同时,研究还发现丙酸钙对大肠杆菌、志贺氏菌和荧光假单胞菌三种革兰氏阴性菌均有一定的抑制效果,并具有显著延缓面包片霉变的效果。

关键词: 牡蛎壳 非煅烧法 丙酸钙 抑菌活性

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养殖仿刺参霉菌病的病原初探

水产科技情报 2010 北大核心

摘要:2007年4~8月,对山东威海地区两家养殖场发生霉菌病的多个仿刺参样品进行镜检,在病灶处发现大量霉菌,但未发现数量明显的细菌和寄生虫。霉菌的形态特点为:菌丝有隔,分枝较多而复杂,孢子囊呈圆形,成簇生长,且孢子囊内的分生孢子多于10个。对病原进行分离培养,未得到任何优势细菌。在常规培养基(高氏I号培养基)上没有霉菌生长,而在自制的培养基(HA)上得到霉菌HA-1,其形态特征与病灶处的霉菌基本一致,但也存在一定差异,这可能与霉菌的生长条件以及基质营养不同相关。

关键词: 仿刺参 养殖 疾病 霉菌

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鲢AFLP和微卫星标记连锁图谱构建

中国海洋大学学报(自然科学版) 2010 北大核心 CSCD

摘要:以一对分别来自长江中、下游野生鲢及其90尾杂交后代为作图群体,分别构建了鲢雌、雄亲本AFLP和微卫星混合标记连锁图谱和鲢性别平均连锁图谱。鲢性别平均连锁图谱含254个标记(包括46个微卫星标记和208个AFLP标记),由23个连锁群、8个三联体及9个连锁对组成,图谱总长1 146.6 cM,覆盖率74.6%,249个座位间平均间隔15.5 cM。鲢性别平均图谱标记分布不均匀,在不同连锁群间以及同一连锁群上的不同区域,都存在标记密度显著差别。比较雌、雄图谱座位同线性关系,发现1个可能与性别决定相关的重组抑制区。该图谱是构建高密度微卫星标记图谱的起点,其分布清楚的微卫星标记为鲢及其近缘物种遗传资源评价等研究奠定了基础。

关键词: 连锁图谱 微卫星 AFLP 性别决定

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海洋微生物酶反应器智能控制系统的研制

农业工程学报 2010 EI 北大核心 CSCD

摘要:生物发酵过程具有严重非线性、高度时变性、高阶多变量和大型不确定的特点,为了实现生物发酵过程的自动化控制,提高生物技术产品的生产水平,使得发酵过程的参数检测、操作监视、自动控制等智能化,分析了影响发酵过程的主要因素以及各变量之间的耦合关系,综合应用传统的PID控制方法、模糊神经网络技术,构建了一种多变量模糊神经控制系统的前馈解耦算法并将其应用在发酵过程的思想,同时采用了冷凝、回收、利用发酵尾气技术,解决了尾气排放、罐体泄漏染菌的问题。模糊神经控制器和解耦部分独立设计,在模糊控制器中引入神经网络,解耦网络采用一层隐层,利用简化的学习算法,根据系统输出误差,在线调整网络权值,从而实现动态解耦而无需辨识被控对象的模型。该方法结构简单且计算量小,经实际应用结果表明这种控制算法具有很好的控制效果。

关键词: 发酵 溶解氧 环保 通气量 耦合 解耦控制

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