科研产出
利用胞嘧啶碱基编辑器高效制备奶牛BLG基因敲除胚胎的研究
《南京农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]β-乳球蛋白是由BLG基因编码的蛋白质，是牛乳中主要的过敏原。本试验旨在使用优化后的单碱基编辑器（CBE）YE1-BE3-FNLS和YE1-AncBE4max对牛胚胎BLG基因进行单碱基编辑，同时对2种单碱基编辑器在牛胚胎BLG基因敲除效果进行评价。[方法]在奶牛的BLG基因的第一外显子上设计sgRNA序列，通过胞嘧啶碱基编辑器将BLG基因第21位密码子CAG突变为TAG,实现c*.61C>T（p.Q21*）的转变，获得终止密码子，使蛋白质翻译提前终止，达到基因敲除的目的。通过体外转录获得sgRNA以及YE1-BE3-FNLS和YE1-AncBE4max的mRNA,显微注射到奶牛胚胎中，收集囊胚，分别检测20枚YE1-BE3-FNLS编辑囊胚和24枚YE1-AncBE4max编辑囊胚，进行胚胎基因组PCR扩增，扩增BLG基因目标序列并进行测序验证编辑效率。根据sgRNA的序列，全基因组选择错配碱基最少的5个潜在脱靶位点进行脱靶检测。[结果]囊胚靶向编辑效率检测结果表明，YE1-AncBE4max对牛胚胎BLG基因的靶向编辑效率为83.3%（20/24）高于YE1-BE3-FNLS的靶向编辑效率60%（12/20）,而前者存在较大的编辑窗口（C1-C9）,可对sgRNA序列上的多个胞嘧啶进行编辑，后者具有较小的编辑窗口C2-C4;另外，YE1-BE3-FNLS具有较高的靶位点双链编辑效率35%（7/20）,而YE1-AncBE4max只有2枚编辑胚胎发生双链编辑，纯合编辑率较低；2种单碱基编辑器制备的编辑胚胎均未出现插入缺失和脱靶效应。[结论]本文使用的2种胞嘧啶碱基编辑器均能高效制备奶牛BLG基因编辑胚胎，为进一步获得BLG基因单碱基敲除奶牛储备技术方法。
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中国肉用绵羊粗饲料营养价值评定研究进展
《畜牧产业 》 2024
摘要：研究以“羊”“粗饲料”“牧草”“秸秆”“树叶”“糟”“渣”“羊饲料营养价值”“feed”“roug hage”“stover”“nutrient”“rumen”“intestine”“digestibility”“sheep”和“CNCPS(Cornell Net Carbohydrate and Protein System)”关键字组合开展文献检索，检索文献应用的数据库包括中国知网、Pubmed、百度学术，共检索到相关文献137篇，经过对文献的筛选，去除未标注饲料营养成分计算基础(风干、绝干)、饲料来源、未测定饲料的干物质以及开展瘤胃尼龙袋试验未按照1.3倍维持需要和未开展空白校正测定瘤胃降解率的相关文献，最终获得30篇高质量参考文献。本文将肉用绵羊粗饲料分为干草类、秸秆类、糟渣类和其他类，并综述了饲料的常规营养成分、瘤胃降解率、小肠消化率以及CNCPS体系的蛋白质和碳水化合物组分。研究结果旨在为肉羊生产饲料配方配制提供参考借鉴。
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农民合作社的益贫性与现实检视
《安徽农业大学学报(社会科学版) 》 2024
摘要：合作社的益贫性是其获得政策优惠的根本理由之一。然而，理论分析表明，合作社为了追求效率，倾向于排斥小农，因而并不必然益贫，要实现益贫性，必须实行“门户开放”。基于中国合作社实践的实证研究显示，中国的合作社大多只惠及核心社员，大户之间更容易联合，政策扶持落到了理事长更加富裕、政治性社会资本更为丰富的少数合作社的头上，也即中国的合作社大多没有实现益贫性。进一步考察发现，中国的合作社之所以未能实现益贫性，根本原因在于现实中绝大多数“合作社”都不是真正意义上的合作社，这使得合作社实现益贫性的前提不复存在，而现有的物资支持政策则未能引导合作社发挥益贫作用。合作社要实现益贫性，支持政策必须由物资支持转向制度建构。
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植物环状RNA(circRNA)的形成及作用机制研究进展
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：环状RNA(Circular RNA, circRNA)是一类特殊的非编码RNA,其在生物体中广泛存在，是目前RNA领域最新的研究热点。本文通过详细对比分析动植物circRNA,综述植物circRNA的形成机制以及功能作用机理，为进一步深入研究植物circRNA提供基础。
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化学氮肥有机替代下设施菜地可溶性碳氮淋溶特征
《植物营养与肥料学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】土壤可溶性碳氮淋溶是设施菜地碳氮损失的主要形态。研究不同有机物料替代部分化肥降低土壤可溶性碳氮淋溶的效应及其关键影响因子，为设施菜地氮肥科学施用提供理论依据。【方法】田间淋溶试验在江苏省农业科学院六合基地的典型设施菜地开展，共设置5个处理：不施肥（CK）、单施化肥（CF）、秸秆有机肥替代30%氮肥（STR）、鸡粪有机肥替代30%氮肥（CHI）和菇渣有机肥替代30%氮肥（MUS）。分析了可溶性有机碳（DOC）、可溶性有机氮（DON）、硝态氮（NO3-）、铵态氮（NH4+）的淋失动态；采用三维荧光光谱-平行因子分析方法，分析了可溶性有机质（DOM）的光谱结构特征与荧光参数，解析了其与可溶性碳氮淋溶损失的偶联关系。【结果】蔬菜全生育期不同处理可溶性总氮（TDN）淋溶总量为12.63～69.15 kg/hm2，其中NO3-和DON的占比分别为90.0%～92.7%和7.21%～9.72%。与CF处理相比，3个有机替代处理的NO3-淋溶总量显著降低了30.2%～53.4%，以MUS处理的降幅最大，DON淋溶总量也显著降低，以MUS处理的降幅最大，为49.1%。DOC和DON的变化趋势相反，与CF处理相比，有机替代处理的DOC淋溶总量呈现增加趋势，并在CHI处理中达到显著水平（C 6.97 kg/hm2）。DOC和DON淋溶量均与微生物来源的芳香性高、腐殖化程度高的C1组分，以及通常存在于高养分环境中的胡敏酸类C3组分呈显著正相关，而与分子量较小的类富里酸类物质C4组分呈显著负相关；与植物残体导致的类腐殖质C2组分无显著相关性。DOC、DON、TDN和NO3-淋溶量均与DOM的荧光指数（FI）、自生源指数（BIX）、新鲜度指数（β/α）呈显著正相关。【结论】有机肥替代30%化学氮肥条件下，鸡粪有机肥处理显著增加了淋溶液中DOM难分解C1组分的占比，从而促进了DOC的淋溶；菇渣和鸡粪有机肥处理显著减少了淋溶液中C3组分的占比，因而较秸秆有机肥更有利于削减DON的淋溶。上述3种有机肥部分替代化学氮肥处理均降低了化肥氮输入，同时减少了淋溶液DOM中难分解的胡敏酸类C3组分，从而实现对可溶性无机氮和有机氮淋溶的协同阻控。综合考虑不增加可溶性有机碳淋失和减少可溶性氮淋溶两方面因素，推荐采用菇渣有机肥替代30%化学氮肥。
关键词： 有机替代 可溶性碳淋溶 可溶性氮淋溶 平行因子分析 三维荧光光谱
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小麦抗除草剂冻药害的鉴定评价指标研究
《麦类作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：小麦喷施除草剂后，若短时间内遭遇寒潮或0℃以下的低温胁迫，极易发生冻药害，威胁小麦生产安全。为探索小麦除草剂冻药害抗性鉴定评价指标，从15 000份小麦种质资源中，初筛出20份源于国内不同麦区且对除草剂冻药害抗性表现明显差异的小麦种质作为材料，在人工气候室和春化室内，对不同苗龄、药剂处理时间、低温温度、低温处理时间、土壤墒情等条件下麦苗冻药害情况进行分级调查，并统计冻药害指数。结果表明，在小麦3叶1心期、药剂处理3 d、-4℃低温处理5 d和适墒(土壤含水率15%～18%)等条件下，参试材料间相对冻药害指数的变异系数和数值离散度最大，材料间差异显著性水平也最高，能够明显地区分出不同参试材料的抗冻药害特性。依据相对冻药害指数变化范围，将抗除草剂冻药害的特性划分为5种抗性类型，分别为高抗(≤0.10)、抗(0.11～0.30)、中抗(0.31～0.50)、感(0.51～0.70)和高感(>0.70)。该鉴定方法可用于小麦抗除草剂冻药害种质资源筛选和抗性品种选育。
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沿海滩涂不同青贮种植模式下土壤盐分、养分及碳库变化特征
《中国农学通报 》 2024 CSCD
摘要：2021年10月，在江苏沿海滩涂围垦区布置油菜—玉米轮作(R—M)、苜蓿套种玉米种植(A—M)和纯苜蓿种植周年模式(A—A)等不同种植试验，旨在研究沿海滩涂围垦区不同青贮种植模式下土壤盐分、养分及碳库变化特征。结果表明：（1）不同种植模式下0～40 cm土壤盐分8月前均表现出相似的动态变化规律，8月后的R—M下土壤盐分显著高于A-M和A-A;(2)0～20 cm土壤总氮、碱解氮、有机碳和易氧化碳含量均表现为A—A模式最高，且有效养分总库容量在A—M和A—A模式下相比R—M模式分别增加了6.05%和11.64%；同时，不同种植模式下土壤pH、容重和有效磷均没有明显的差异；（3）与种植前田块相比，种植1年后A—M和A—A下碳库指数(CPI)分别提高了3.70%和8.90%，碳库活度指数(AI)分别提高了36.40%和50.50%，碳库管理指数(CPMI)分别提高了41.45%和63.94%;R—M下的AI和CMI分别提高了30.50%和26.37%。可见，沿海滩涂围垦区苜蓿种植或套种苜蓿青贮模式短期内有利于土壤盐分降低和有效养分积累，提高土壤碳库管理指数，改善滩涂土壤质量和肥力，研究结果将为今后发展青贮作物生产研发和大范围推广提供数据支撑。
关键词： 沿海滩涂 活性有机碳 土壤养分库 盐分变化 碳库管理指数
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不同种砂比和行距对机播荠菜农艺性状和产量的影响
《浙江农业科学 》 2024
摘要：为探索机播荠菜优质高效生产的最佳播量，更好地为荠菜种植机械化生产服务，采用双因素随机区组试验，共设置种砂（荠菜种子+黑金砂）混拌比1∶8、1∶11、1∶14和1∶17四个处理和行距14、21和28 cm 3个处理进行机器条播。结果表明，机播荠菜的农艺性状和产量随着种砂比的增加，表现出先增加后减少的趋势；行距与农艺性状和产量间相关性不显著。在12个种砂比和行距互作处理下，以A4B1（种砂比1∶17,行距14 cm）处理下的产量最高，每667 m2产量可达2 230.84 kg。因此，推荐A4B1（种砂比1∶17,行距14 cm）为机播荠菜的最佳播量和行距。
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牛miR-17~92基因簇在牛睾丸中的表达及其生物学功能分析
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：牛miR-17~92 基因簇由 6 个不同的功能miRNAs组成,参与牛睾丸发育与精子发生.本研究从牛基因组中获得miR-17~92 基因簇序列信息进行物种保守性分析,再采用半定量PCR的方法检测miR-17~92 基因簇前体miRNA在睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾及不同活力精子中的表达水平,利用miWalk、TargetScan 7.2及miRTarBase 8.0 等在线网站预测成熟miRNA的靶基因,并利用KOBAS3.0 对预测靶基因进行GO和KEGG通路分析.结果表明,牛miR-17~92 基因簇在哺乳动物进化中具有保守性,该基因簇的 6 个miRNA前体在睾丸组织中呈现高表达,均显著高于附睾组织;而这 6 个miRNA前体在附睾的不同位置也具有表达差异,其中pre-miR-19a在附睾尾中表达显著高于附睾体和附睾头,pre-miR17 和pre-miR20a在附睾中未检测到表达;在不同活力精子中,高活力精子的bta-miR-17-5p、bta-miR-18、bta-miR-20a的表达水平显著高于低活力精子;生物信息学分析结果表明,6 个miRNA一共预测到 2 940 个靶基因,这些靶基因主要通过MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路、FoxO信号通路等参与调控牛睾丸功能.本研究分析了miR-17~92 基因簇在牛睾丸中的表达分布,为miR-17~92 基因簇对牛睾丸发育和调控精子活力的作用机制研究提供参考依据.
关键词： 牛 睾丸 附睾 miR-17~92 基因簇
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