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利用PLDMV/Twin-Strep侵染性克隆纯化HC-Pro病毒蛋白

热带作物学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)是一种新的潜在威胁番木瓜种植业的病毒,其辅助成分蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)是PLDMV编码参与病毒复制、运动、寄主植物症状表现的多功能蛋白,因此纯化获得具有功能活性的HC-Pro蛋白,研究其多功能性具有重要意义.本研究利用In-Fusion拼接策略和E.coli Cell-Free快速构建植物病毒侵染性克隆法,一步快速地将28个氨基酸组成的蛋白标签Twin-Strep插入到PLDMV HC-Pro氨基端,成功获得了基于农杆菌的携带Twin-Strep标签的PLDMV侵染性克隆pPLDMV-Strep.通过农杆菌渗透注射接种番木瓜植株,从感染PLDMV-Strep的番木瓜叶片总蛋白中,利用Twin-Strep蛋白标签亲和层析分离纯化获得PLDMV HC-Pro蛋白,并通过LC/ESI-MS/MS(liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometric)对其进行蛋白N端和C端序列测序,证明了纯化获得完整的PLDMV HC-Pro蛋白.研究结果为后续解析PLDMV HC-Pro在病毒侵染过程中的功能及与寄主蛋白相互作用奠定了基础.

关键词: 番木瓜畸形花叶病毒;HC-Pro;马铃薯Y病毒;蛋白纯化

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巴西蕉果指主要形态参数定量模型研究

中国南方果树 2021 北大核心

摘要:巴西蕉果指形态结构模型是功能—结构香蕉模型的重要研究内容。以巴西蕉为材料,基于2019—2020年大田14个施肥处理的试验数据,采用编号2、4、6、8、10、12、14处理的香蕉果指数据分析了香蕉果指主要形态参数与器官生物量的相关关系及定量关系,利用一次Linear、二次Quadratic、三次Cubic、生长Growth及指数Exponential等5种回归模型构建了巴西蕉果指主要形态结构模型,筛选出的最佳模型为Y=a+bX。经编号1、3、5、7、9、11、13处理的香蕉果指数据检验所建模型可较好地模拟不同施肥水平下果指形态与果指干质量关系,具有一定解释性和普适性。

关键词: 巴西蕉 果指 果指体积 形态参数 干质量

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菠萝蜜果酒分批发酵动力学模型研究

食品与发酵工业 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了研究菠萝蜜果酒分批发酵过程中酵母菌体生长、还原糖基质消耗和乙醇产量生成的动力学变化规律,每隔24 h测定菠萝蜜果酒发酵过程中的酵母菌数、还原糖含量和酒精度,采用经典的Logistic、SGompertz、Boltz-mann和DoseResp模型进行非线性拟合,构建菠萝蜜果酒的分批发酵动力学模型.结果 表明,在酵母菌体生长动力学模型中,采用Boltzmann模型拟合效果最佳,拟合系数R2为0.99396;在乙醇产量生成动力学模型中,SGompertz和Boltzmann模型的R2分别为0.99905和0.999,2种模型均能产生很好的拟合效果;在还原糖基质消耗动力学模型中,DoseResp和Boltzmann模型的R2都为0.98705,拟合系数一致,说明2种模型均可用于较好地描述发酵过程还原糖的消耗情况.所选模型拟合发酵过程是可行的,为菠萝蜜果酒工业化发酵工艺控制提供理论基础.

关键词: 菠萝蜜 果酒 分批发酵 发酵动力学 拟合系数

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菠萝蜜多糖流变学特性研究

食品工业科技 2021 北大核心 CSCD

摘要:本文研究了菠萝蜜多糖(Artocarpus heterophyllus Lam.Pulp Polysaccharide,JFP-Ps)的流变学特性,分析浓度、剪切速率、温度、加热时间、pH、冻融变化和盐离子等因素对JFP-Ps溶液的表观粘度和粘弹性的影响.结果表明,JFP-Ps溶液的表观粘度与浓度呈正相关;JFP-Ps溶液的表观粘度与剪切速率呈负相关,出现剪切稀释的现象,为"非牛顿流体",呈现假塑性行为;JFP-Ps溶液表观粘度与温度呈负相关;随加热时间的延长,JFP-Ps的表观粘度先上升后下降;JFP-Ps溶液在pH4~10范围内表观粘度值变化不大;冻融变化可使JFP-Ps溶液表观粘度增大;5%NaCl溶液使JFP-Ps溶液的表观粘度减小,5%KCl溶液使JFP-Ps溶液的表观粘度增大;在粘弹性测试中,JFP-Ps的储能G′和损能G″随着频率的增大而增大,且G′始终高于G″,另外,JFP-Ps溶液的储能模量G'和损耗模量G'随着溶液浓度的增大而上升,呈现凝胶性质.研究结果可为菠萝蜜果肉多糖在食品工业中的应用提供一定的理论借鉴.

关键词: 菠萝蜜多糖;表观粘度;剪切速率;粘弹性;流变学特性

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甘蔗螟虫综合防治研究进展

南方农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:介绍了我国蔗区主要甘蔗螟虫种类及甘蔗螟虫在甘蔗生长周期内的田间危害情况。根据国内外对甘蔗螟虫防治的研究成果,重点综述了甘蔗螟虫的农业防治、物理防治、生物防治、化学防治和绿色防治技术集成及利用研究进展,指出甘蔗螟虫各单项防治措施效果的优缺点。提出各单项防治措施的研究方向:加大抗螟虫甘蔗品种的选育工作;加大田间试验以验证生物防治的实际防治效果,并挑选出适合大规模田间防治甘蔗螟虫的生物防治方法和生物防治剂;筛选高效、低毒、环境友好的杀虫剂;研究基于雌虫的诱杀技术和引诱剂;加强甘蔗螟虫行为及化学生态学的研究,并将各单项防治技术有机结合,建立预防为主、综合防治的绿色、可持续发展的甘蔗螟虫防控技术体系等防治策略。

关键词: 甘蔗螟虫 危害 防治 研究进展

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杧果GeBP转录因子家族基因的鉴定及表达分析

经济林研究 2021 北大核心

摘要:【目的】探究杧果Mangifera indica GeBP基因家族成员的分子特征和表达模式,为杧果GeBP家族作用与功能的研究奠定基础,并为杧果种质资源的抗病性鉴定提供参考依据。【方法】采用生物信息学的方法,对杧果GeBP基因家族成员的理化性质、蛋白质二级结构、保守结构域、蛋白质三级结构及其与拟南芥Arabidopsis thaliana、番茄Lycopersicon esculentum和水稻Oryza sativa的系统进化关系进行分析,并利用qRT-PCR的方法检测杧果GeBP家族成员在叶、盛花、果等不同发育时期的相对表达量,以及杧果叶片被细菌性黑斑病菌Xanthomonas campestris pv. mangiferaeindicae和胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides侵染时GeBP基因家族成员的转录水平。【结果】在杧果基因组中鉴定出10个杧果GeBP基因家族成员,依次命名为MiGeBP1、MiGeBP2、MiGeBP3……MiGeBP10;检测发现,杧果GeBP基因家族蛋白均为不稳定亲水蛋白;其蛋白质二级结构中,无规则卷曲和α-螺旋为其结构组成的主要元件;通过构建系统进化树分析可知,杧果、拟南芥、番茄、水稻这4个物种的57个氨基酸序列可分为5个分支,其中杧果GeBP基因家族的10个成员分属于4个分支中,MiGeBP3与MiGeBP4、MiGeB8和MiGeBP9的亲缘关系最近;利用qRT-PCR方法对其组织特异性表达的分析结果表明,杧果GeBP基因家族成员在不同组织中的表达存在差异性;杧果叶片在被细菌性黑斑病和胶孢炭疽菌侵染时,MiGeBPs对病原菌的侵染作出了不同程度的响应,不同的基因家族成员对病原细菌、病原真菌的响应程度不同。【结论】在杧果中鉴定到MiGeBP转录因子家族的10个成员,其与双子叶植物的亲源关系均较近,而与单子叶植物的亲源关系均较远,其中MiGeBP3和MiGeBP4、MiGeB8、MiGeBP9的亲缘关系都较近。该基因家族成员在病原菌的侵染过程中作出了不同程度的响应:经细菌性黑斑病菌侵染后,基因MiGeBP8在侵染处理后的各个检测时间点均显著表达,但仅在侵染处理后6 h时呈上调表达,而在其他检测时间点均呈下调表达;基因MiGeBP9仅在侵染处理后24 h时呈下调表达,而在其他检测时间点均呈上调表达。经胶孢炭疽菌侵染后,MiGeBP5与MiGeBP6基因在侵染处理后0~72 h的检测时段内均显著上调表达。由此推测,GeBP基因家族成员不同程度地参与了杧果的免疫反应。

关键词: 杧果 GeBP转录因子 分子特征 表达分析

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茶多酚对油梨果实保鲜效果的评价

食品工业科技 2021 北大核心 CSCD

摘要:为探明茶多酚对油梨采后贮藏期间品质和生理变化的影响.以国内油梨品种桂研10号为试材,研究了不同浓度茶多酚对油梨贮藏期间营养品质和抗氧化酶的变化.结果表明,2.0%茶多酚处理可有效延长油梨的保鲜期,贮藏12 d后,2.0%茶多酚处理油梨腐烂率为14.86%,比CK低81.90%;贮藏20 d后,2.0%茶多酚处理的油梨失重率为10.46%,硬度为2.9 kg/cm2,可溶性固形物含量7.45%,维生素C含量42.88 mg/100 g,可溶性蛋白含量6.52 mg/g,保持油梨果实硬度和重量,控制溶性固形物、维生素C、可溶性蛋白的下降,促进超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性,降低腐烂率,有效延长了保鲜时间,同时保持了良好的营养品质.综上所述,2.0%茶多酚处理对油梨的保鲜效果最好,是一种安全、高效、低成本油梨保鲜药剂.

关键词: 茶多酚 油梨 保鲜

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通过转化脂肪酸去饱和酶基因AcoFAD2提高菠萝植株的抗寒能力

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:为培育抗寒菠萝新品种,本研究通过比较菠萝脂肪酸去饱和酶基因序列和拟南芥脂肪酸去饱和酶基因序列,筛选获得目标基因AcoFAD2;通过农杆菌转化菠萝‘台农17’获得过表达AcoFAD2转基因植株TN17FAD2-3;转基因植株和对照在低温条件下进行培养,鉴定转基因植株和对照的不饱和脂肪酸含量及抗寒能力。结果发现组培苗在7℃条件下处理5 d然后转入26℃生长一周,TN17FAD2-3第四片叶坏死比例为(5±1)%,只转化空载体的对照TN17-EV第四片叶坏死比例为(97±2)%。组培苗在7℃条件下生长5 d,然后转入26℃生长15 d。TN17FAD2-3第二片叶叶面积为(2.15±0.2) cm2,TN17-EV第二片叶叶面积为(0.06±0.01) cm2。TN17FAD2-3的叶片不饱和脂肪酸含量(16:3+18:3)为(77.5±0.7)%,对照TN17-EV叶片不饱和脂肪酸(16:3+18:3)含量为(58.6±0.8)%。TN17FAD2-3的叶片不饱和脂肪酸含量高于只转化空载体的对照TN17-EV。低温条件下,TN17FAD2-3比TN17-EV生长快,TN17FAD2-3株系比TN17-EV具有更高的抗寒性,载体UBI-pCAMBIA1301不能提高菠萝植株的抗寒能力,通过转化脂肪酸去饱和酶基因AcoFAD2能够提高菠萝植株的抗寒性能,本研究为快速培育抗寒菠萝新品种提供理论基础。

关键词: 菠萝 低温 脂肪酸去饱和酶基因 转基因

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外源肌酸对团头鲂生长性能、肠道菌群及血清氨基酸含量的影响

饲料研究 2021 北大核心

摘要:试验旨在研究高糖条件下,含有1.20%甜菜碱的饵料中补充0.50%肌酸对团头鲂(Megalobrama amblycephala)生长性能、肠道菌群及血清氨基酸含量的影响。选择180尾平均体重为(11.88±0.46) g的团头鲂,随机分为2组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。对照组饵料中包含39.76%碳水化合物+1.20%甜菜碱,不含肌酸;试验组饵料含39.29%碳水化合物+1.20%甜菜碱+0.50%肌酸。试验期90 d。结果表明,与对照组相比,试验组团头鲂的饵料系数显著降低(P<0.05);试验组团头鲂肠道梭杆菌门和变形菌门的占比均显著降低(P<0.05),厚壁菌门占比显著升高(P<0.05);试验组团头鲂肠道的鲸杆菌属、气单胞菌属和弧菌属占比显著降低(P<0.05),ZOR0006和丹毒丝菌科未命名属占比显著升高(P<0.05);试验组团头鲂的血清苏氨酸(Thr)含量显著上升(P<0.05);试验组团头鲂的CK mRNA的表达量显著上升(P<0.05),Tha1 mRNA表达量显著升高(P<0.05)。研究表明,含有1.2%甜菜碱的高糖饵料中补充0.50%的肌酸能够提高团头鲂的饵料利用率,改善其肠道微生物组成及健康,通过苏氨酸醛缩酶增加血清苏氨酸含量。

关键词: 高糖饲料 肌酸 团头鲂 肠道微生物 苏氨酸醛缩酶 苏氨酸

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粤西地区不同甜高粱和高丹草品种比较试验

广东农业科学 2021 北大核心 CSCD

摘要:[目的]筛选适宜粤西地区种植的甜高粱和高丹草品种.[方法]以引进的甜高粱和高丹草为试材,对8个甜高粱品种(牛魔王、海牛、百战、大力士、得胜、大卡、绝佳、绿巨人)和5个高丹草品种(宝百饲、标兵渔草、杰宝、得力、乐食)的物候期、农艺性状、常规营养成分(粗蛋白、粗纤维和粗脂肪)进行分析,并计算有机物质消化率.[结果]不同品种的物候期、株高、茎粗和茎叶比存在一定差异.甜高粱干草产量7.13~18.22 t/hm2,粗蛋白含量5.97%~8.99%,粗纤维含量22.91%~33.01%,粗脂肪含量1.67%~3.00%.高丹草干草产量5.63~19.99 t/hm2,粗蛋白含量6.39%~7.04%,粗纤维含量25.30%~30.44%,粗脂肪含量1.51%~2.40%.得胜在8个甜高粱品种中干草产量最高,显著高于其他品种,干草产量排名前3名的甜高粱品种中,得胜的粗蛋白含量显著高于绿巨人和大力士,但有机物质消化率显著低于大力士.宝百饲在5个高丹草品种中干草产量最高,显著高于其他品种,干草产量排名前2位的高丹草品种中,宝百饲和乐食的粗蛋白含量和有机物质消化率无显著差异.[结论]得胜、大力士和宝百饲在粤西地区生产性能较好,适宜在该地区牧草生产中推广种植.

关键词: 甜高粱 高丹草 品种比较 产量 营养成分

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