科研产出
兔支气管败血波氏杆菌OMP-ELISA抗体检测方法的建立
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为简便快速检测支气管败血波氏杆菌(Bb),建立了一种特异、敏感的间接ELISA方法。通过应用超声波裂解和超速离心法提取了支气管败血波氏杆菌Ⅰ相菌外膜蛋白(OMPs),并用该蛋白包被酶标板,经特异性、敏感性和重复性试验优化后建立间接ELISA方法。结果表明,试验确定抗原的包被浓度为14.44μg/ml,可检测血清最高稀释度达1∶400;该方法有很高的特异性和敏感性,与微量凝集试验相比,敏感性提高约33倍;该方法重复性良好。
关键词： 支气管败血波氏杆菌 外膜蛋白(OMPs) 抗体 间接ELISA
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猪初乳中SIgA纯化及其单抗制备
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为制备猪SIgA的特异性单克隆抗体,该研究采用饱和硫酸铵盐析法从猪初乳中提取猪SIgA蛋白,分别经Sephadex G-200凝胶层析、DEAE52纤维柱离子层析及Protein A柱亲合层析纯化。以纯化的猪SIgA蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗猪SIgA的单克隆抗体。结果显示:已获得6株特异的抗猪SIgA的单克隆抗体,分别命名为2D9E6、2D9E9、3E1G2、3E1H5、4H5B7和4H5B10,6株单抗均为IgG1,κ型。将其中1株2D9E6制备腹水,经纯化后ELISA效价可达1∶81 000以上。表明以猪SIgA天然蛋白为免疫原,成功制备了6株高特异性的单克隆抗体,可为猪黏膜免疫研究提供基础材料。
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微波膨化南瓜脆片的工艺优化
《食品工业科技 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：在单因素实验基础上,采用PlackettBurman实验,从膨化率和脆度两个指标出发,对微波膨化南瓜片品质的主要影响因素进行研究,从而筛选出对南瓜片膨化率和脆度具有显著影响的工艺参数即含水率、功率和时间;采用响应曲面法对微波膨化南瓜片的工艺条件进行优化,建立微波膨化南瓜片二次多项数学模型,对上述三个因素的影响效应及其交互作用进行讨论;采用响应曲面法优化得到最佳工艺条件即膨化前原料含水率为30%,膨化功率为375W,膨化时间40s。在此条件下进行验证实验微波南瓜片的膨化率为200%,脆度为0.2135。
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螺旋藻(胶囊)对ICR种小鼠免疫功能的调节作用
《江苏农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究不同剂量的螺旋藻对ICR种小鼠免疫功能的调节作用。将螺旋藻(胶囊)分别以剂量83(推荐的人体每日摄入量)、415、830 mg/kg连续饲喂受试小鼠15 d后,对小鼠进行免疫调节试验。结果表明:各剂量组小鼠的耳廓肿胀度随剂量增加而逐渐增加,中、高剂量组有显著性统计学差异(P<0.05、P<0.01),可明显增强二硝基氟苯(DN-FB)所致的小鼠迟发性超敏反应(DTH);各剂量组小鼠血清半数溶血值(HC50)均高于对照组,且有剂量效应关系,高剂量组有明显统计学差异(P<0.05);各剂量组小鼠的吞噬指数a与阴性对照组相比,均无明显统计学差异(P>0.05),表明螺旋藻胶囊无明显增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能。根据保健食品免疫调节作用评价标准,螺旋藻具有免疫调节作用。
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草菇培养料中微生物总DNA的高效提取
《东北林业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法。结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差异,其中化学裂解与酶裂解相结合法提取DNA的产量最高,而新型植物基因组DNA提取试剂盒提取培养料DNA的产量最低,分别为(2 372.72±28.85)μg/g和(87.67±2.04)μg/g。采用真菌、细菌及放线菌特异性引物进行PCR扩增,结果表明,除氯化苄法没有扩增出目的条带外,其余方法均能扩增出目的条带,说明其均能从草菇培养料中同时有效地提取真菌、细菌和放线菌总DNA。综合评价了各方法的DNA产量、纯度、PCR扩增效果、试验时间、费用成本5个指标,其中采用化学裂解与酶裂解相结合法提取出的DNA产量最高,但所用时间较长;MP土壤试剂盒提取的DNA纯度最高、所需时间较短,但成本较高。
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规模猪场不同日龄仔猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及免疫试验
《江苏农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为确定仔猪口蹄疫疫苗首次免疫时间,以规模化养猪场经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测。结果表明,10、20、30、40日龄仔猪99%以上被保护的分别占该日龄组的60%、80%、80%、50%,50、60、70、80日龄仔猪99%以上被保护的分别占该日龄组的40%、0、0、0,60%以上仔猪未被充分保护。随着日龄的增加,抗体效价明显下降。对检测猪O型口蹄疫抗体小于1∶45的45日龄仔猪10头进行猪O型口蹄疫免疫试验,结果O型口蹄疫一免后14 d抗体效价≥27的有10份,达到100%保护。因此,对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45~50日龄。
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油菜(Brassica napus L.)BnPGIP基因克隆及其表达分析
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以油菜品系甘蓝型油菜宁RS-1为植物材料,以南京油菜田里收集的核盘菌为致病菌,根据已经报道的油菜PGIP基因序列,设计简并引物。从宁RS-1基因组DNA中经PCR克隆到1条包含1个内含子与2个外显子的基因序列。序列比对分析显示,该基因与已公布的油菜PGIP1基因的核苷酸序列和氨基酸序列同源性均达99%,编码区序列全长984 bp,编码332个氨基酸,富含亮氨酸。以翻译延伸因子EF-1α作为内标,利用半定量RT-PCR分析了BnPGIP基因在核盘菌未诱导和诱导后宁RS-1中的表达量差异。结果发现,核盘菌诱导后宁RS-1中的BnPGIP表达含量明显提高,表明宁RS-1在受到核盘菌侵染后体内的BnPGIP基因受到诱导表达。为进一步研究BnPGIP基因在抗核盘菌侵染的作用,构建了BnPGIP基因过量表达载体。
关键词： 甘蓝型油菜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 基因克隆 表达
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中国农业化肥投入现状与地区差异性分析
《江西农业学报 》 2011
摘要：分别从农业化肥投入总量、强度、结构及其粮食增产效应等方面对中国化肥投入现状及存在的问题进行全面分析,并详尽阐述了中国化肥投入的时空差异特征。研究发现,高强度的化肥投入对粮食增产的作用已变得不显著,表明我国化肥投入已过量,单纯靠增加化肥投入以实现粮食增产只能带来农业经营成本增加并加大环境风险;化肥投入结构仍不合理,化肥利用效率偏低;与经济发展的区域格局一样,我国单位耕地面积的化肥投入强度也呈现出东、中、西逐级递减的特点,同时,几乎所有省区的化肥投入强度已超过225 kg/hm2的施肥上限,东部沿海部分地区更是超过了500 kg/hm2。
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