科研产出
两株致病性哈维氏弧菌胞外产物的特性分析
《水生生物学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：采用硫酸铵分级盐析从哈维氏弧菌EcGY020401株和SpGY020601株培养物中提取其胞外产物,并对胞外产物的一些特性进行了分析。结果表明,两株哈维氏弧菌的胞外产物均具有较强的毒力,对鲫鱼的半致死剂量LD50为7.1g蛋白/g鱼体重;均具有淀粉酶、酪蛋白酶、脂肪酶活性,而无脲酶和明胶酶活性;除EcGY020401株胞外产物对斜带石斑(Epinephelus coioides)红细胞有较强溶血作用外,对小鼠、鲫、人O型血等红细胞的溶血性都较弱或无;对草鱼吻端成纤维细胞(PSF)都具有细胞毒性。此外,经聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱层析和离子交换柱层析,对Sp-GY020601株的胞外产物中蛋白酶进行了初步提纯,SDS-PAGE分析得一分子量约为38Kda的蛋白酶,该蛋白酶对鲫鱼有致死毒性,半致死剂量为3.3g蛋白/g鱼体重。
关键词： 哈维氏弧菌 胞外产物 溶血作用 细胞毒性 致病性 蛋白酶
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栉孔扇贝异精雌核发育四倍体早期胚胎发育的细胞学荧光显微观察
《中国水产科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：用1500μW/cm2的紫外线照射长牡蛎(Crassostrea gigas)精子60 s以进行灭活处理,并使之与栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵子受精,在卵子受精后排出第一极体前用6-DMAP(50 mg/L)处理受精卵,持续处理35 min,抑制第一极体和第二极体的排放,诱导异精雌核发育四倍体。采用二脒基苯基吲哚(DAPI)荧光染色显微观察法,对灭活的长牡蛎精子诱导的栉孔扇贝雌核发育四倍体早期胚胎发育过程进行细胞学观察。结果表明:经紫外线灭活过的长牡蛎精子进入栉孔扇贝卵子后发生轻微膨胀;在第一次卵裂中期,精核形成一致密的染色质小体(DCB),位于两组分开的母本染色体之间,不参与核分裂;第一次卵裂结束时DCB滞留于两卵裂球的分裂沟上或进入其中一分裂球中;第二次卵裂过程中,DCB的去向与第一次卵裂时基本一致。6-DMAP处理有效地抑制了第一极体和第二极体的排出,从而使雌核四倍化。对担轮幼虫染色体倍性分析结果表明,通过本方法可以获得6.25%的四倍体幼虫。本研究还对灭活的异源长牡蛎精子诱导栉孔扇贝雌核发育四倍体过程中产生的复杂倍性、核物质分离紊乱及多精附卵现象进行了观察和分析。
关键词： 栉孔扇贝 异精雌核发育 四倍体 细胞学 荧光显微观察
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蒙古红鲌肥胖基因cDNA的克隆与组织表达特异性研究
《水生生物学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：本文根据已知的人和鼠ob基因序列设计引物,采用RT-PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction)技术,从蒙古红脂肪组织RNA中扩增到ob基因片段,获得ob基因编码区438bp的序列。与人和其他动物比较,蒙古红与人、猪和鼠ob基因核苷酸编码序列的同源性分别为82.9%、84.0%和99.1%,蒙古红ob基因编码的蛋白leptin氨基酸序列与人、猪和鼠的同源性分别为80.8%、78.8%和95.9%;运用RT-PCR技术分析ob基因表达的组织特异性,结果表明:ob基因在脂肪和肝脏组织中表达量最大,在心脏、脾脏、肌肉、脑、卵巢中表达量减少,在肾脏中微量表达,而在精巢和肠道组织中不表达。
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急性盐度胁迫对军曹鱼稚鱼渗透压调节的影响
《应用生态学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：研究了环境盐度急性胁迫对军曹鱼(Rachycentron canadum)稚鱼鳃Na+-K+ATPase(NKA)活性及血清渗透压、Na+、K+和Cl-离子调节的影响.结果表明:将稚鱼从盐度37中直接转移至盐度0、5、15、25、37(对照)和45的水体中,12h后仅盐度0处理出现死亡(死亡率100%).各处理鳃NKA活性和血清渗透压在最初3h内出现一定波动,随后变化平稳.试验结束时(12h),NKA活性与盐度梯度呈“U”型分布,盐度5处理酶活性显著高于其它处理(P<0.05),盐度15处理活性最低,而各处理的血清渗透压大小(293~399mOsmol·kg-1)与盐度呈正相关;在3~12h内稚鱼血清Na+和Cl-浓度随盐度升高而升高,但增幅较小,血清K+浓度则与盐度呈负相关;12h稚鱼的等渗点为328.2mOsm·kg-1,相当于盐度11.48,而Na+、K+和Cl-等离子点分别为155.2、6.16和137.1mmol·L-1,分别相当于盐度10.68、20.44及8.41.军曹鱼在生理上具有广盐性鱼类的“低渗环境高NKA活性”特征,有较强及迅速的渗透压和离子调节与平衡能力.
关键词： 盐度 胁迫 军曹鱼 Na+-K+ATP酶 离子和渗透压调节
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剑尾鱼卵黄蛋白原基因片段克隆、表达及蛋白检测方法的建立
《中国水产科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：本研究通过对剑尾鱼(Xiphophorus helleri)卵黄蛋白原基因片段的克隆和表达,建立了剑尾鱼卵黄蛋白原蛋白检测方法。根据已发表的底(Fundulus heteroclitus)卵黄蛋白原mRNA序列设计引物,利用RT-PCR法扩增出1段1118 bp的剑尾鱼卵黄蛋白原cDNA片段,序列分析表明该片段与其他鱼类卵黄蛋白原基因序列相似性较高,其中与底和食蚊鱼(Gambusia affinis)的同源性分别达87.4%和96.7%。在对该片段所编码氨基酸序列可能抗原位点分析的基础上,进行PCR改造构建原核表达载体,预期得到258个氨基酸的表达蛋白。表达载体转入大肠杆菌DH5α,经热诱导后,SDS-PAGE分析有29 kD的表达蛋白产生,与预期相符。以重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗血清。雌激素(β-雌二醇)对剑尾鱼诱导后,用重组蛋白抗血清作一抗,进行Westernblot分析。结果表明,该抗血清能与剑尾鱼卵黄蛋白原特异结合,可应用于剑尾鱼卵黄蛋白原的检测。卵黄蛋白原是环境雌激素研究中较为特异、灵敏的生物标志物,剑尾鱼卵黄蛋白原检测方法的建立,为剑尾鱼环境监测应用提供良好基础。
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唐岛湾网箱养殖区水体氮、磷含量特征及潜在性富营养化评价
《海洋水产研究 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：根据2004年8月～2005年5月4个航次对唐岛湾网箱养殖区海水营养盐(NH4+-N、NO3--N、NO2--N和PO34-P)含量的监测结果,分析讨论了其含量变化特征,并利用一种新的富营养化评价模式,评价了唐岛湾的潜在性富营养化程度。结果表明,网箱养殖区水体中的氮、磷营养盐含量随养殖进程呈现不同的季节变化规律,受网箱养殖活动和浮游植物生长状况的综合调控;养殖区N/P值的年平均值为46.45,表明网箱养殖区水体缺磷,春、秋、冬季都以磷为浮游植物繁殖生长的限制因子,春季尤为严重。潜在性富营养化评价结果为:除春季达到磷限制中度营养水平外,其他季节均处于贫营养水平,表明该养殖区的营养水平较低,水质质量较好。
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栉孔扇贝的氮、磷排泄及其与温度、壳长之间的关系
《水产学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：通过天然饵料条件下的室内流水法,测定并计算了栉孔扇贝氮、磷排泄物的排泄量及温度和壳长对其的影响,建立了相关的数学模型,并对栉孔扇贝排泄物中各种形态的N、P含量与组成进行了分析。结果显示:在实验条件范围内,扇贝排泄物中VDTN、VPTN的分布范围分别为14.94~248.28μg.(h.ind)-1、1.47~84.08μg.(h.ind)-1,VDTP、VPTP的分布范围分别为0.007~42.54μg.(h.ind)-1、0.916~17.78μg.(h.ind)-1。DTN、PTN占总氮排泄量的百分比分别为77.2%、22.8%,其中氨氮占50.8%;DTP、PTP占总磷排泄量的百分比分别为75.6%、24.4%。各形态N、P排泄速率均随着温度的升高而增加,溶解、颗粒态N、P与温度之间的关系可以用二项式曲线描述,而与壳长的关系可以用幂函数关系描述。溶解、颗粒态N、P均随温度和壳长的增加呈加速增大的趋势,它们与温度和壳长之间的关系均可用对数曲线加以定量描述,其交互作用模型分别为:VDTN=131.13Lnt+217.95LnL-617.65,VPTN=67.41Lnt+54.07LnL-242.37,VDTP=8.67Lnt+65.82LnL-112.15和VPTP=11.73Lnt+11.14LnL-43.74,经协方差分析结果表明,其相关系数均呈非常显著水平。
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漠斑牙鲆仔鱼、稚鱼和幼鱼对低盐度的耐受力和淡水驯化技术的研究
《海洋水产研究 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：研究了漠斑牙鲆仔鱼、稚鱼和幼鱼对低盐度的耐受力和漠斑牙鲆的淡水驯化技术。初孵仔鱼在盐度为5的水中最多存活5d,5d以后全部死亡。30日龄稚鱼在4h10min淡水组全部死亡,对淡水的耐受力较低,而盐度为5～25的各组72h的存活率都在95.00%以上。90日龄幼鱼经缓慢淡水驯化9d后存活率可达98%以上,对漠斑牙鲆幼鱼进行淡水驯化的最佳年龄为90日龄。淡水驯化影响幼鱼初期的摄食,以后则逐渐趋于正常;急性淡水驯化对幼鱼的伤害比缓慢淡水驯化大;漠斑牙鲆对低盐的耐受力随生长和发育逐渐增加,年龄是影响幼鱼对低盐度耐受力的主要因素。
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