科研产出
肠膜明串珠菌'WZ-44'的筛选鉴定、生防特性及其对梨火疫病防效
《中国农业大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为获得对梨火疫病菌（Erwinia amylovora）拮抗活性强的生防细菌，分析其生防特性，评价其对梨火疫病生防效果，从新疆库尔勒市梨火疫病发生果园采集香梨花、幼果和嫩梢等组织，分离纯化不同形态的细菌，采用平皿对峙法筛选具有较强拮抗活性的菌株，基于菌落菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列明确其分类地位，测定其适宜培养温度、产酸能力和次生抗菌物质稳定性，比较生防菌次生代谢物和3种防治梨火疫病杀菌剂的抑菌活性，利用透射电镜分析次生代谢物处理后的梨火疫病菌形态和结构的变化，并通过平皿抑菌试验和温室生防试验评价生防菌株的防效。结果表明：1）从香梨幼果表面分离鉴定到1株肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）‘WZ-44’，其对梨火疫病菌、亚洲梨火疫病菌、黄瓜细菌性角斑病菌、大白菜软腐病菌均具有较强拮抗活性，拮抗圈直径（d）为17.7～24.7 mm;2）‘WZ-44’适宜生长温度范围广（15～35℃），产酸能力强，其次生代谢物对梨火疫病菌也具有较强抗菌活性，拮抗圈d为（26.0±0.4） mm，其抗菌活性与40μg/mL春雷霉素盐酸盐相当，拮抗圈d为（25.4±0.5） mm，且显著优于100μg/mL噻霉酮（拮抗圈d为13.9±0.9 mm）和500μg/mL噻唑锌（拮抗圈d为7.4±0.8 mm）(P<0.05);3）‘WZ-44’次生代谢物抗菌活性在pH 3.0最强，且对高温、蛋白酶和紫外照射具有较好耐受性，通过破坏病原菌细胞膜完整性，导致细胞内容物外渗，细胞变形，甚至崩溃死亡；4）‘WZ-44’与杀菌剂春雷霉素盐酸盐兼容性好，制备的生防菌剂对花期梨火疫病预防效果达（76.1±9.6）%。综上，肠膜明串珠菌‘WZ-44’对梨火疫病菌拮抗活性强，次生抗菌物质稳定，易于发酵培养，生防效果好，可作为一种防控梨火疫病的新型生防细菌。
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控释肥对稻田温室气体排放及水稻产量的影响
《江苏农业科学 》 2025 北大核心
摘要：水稻低碳种植意义重大，为研究控释肥对稻田温室气体排放和产量的影响，为控释肥在水稻减排方面提供科学依据，以苏北地区稻田为研究对象，试验设置6个处理，（1）CK:不施肥；（2）ZC:常规氮肥；（3）F1:控释氮肥；（4）F2:控释氮肥减氮10%;（5）F3:控释氮肥减氮20%;（6）F4:控释氮肥减氮30%。控释氮肥为聚氨酯包衣尿素（N含量≥44%）。结果表明，各处理CO2、CH4和N2O排放通量变化趋势总体相似。各处理CO2的排放总量为ZC>F2>F1>F3>F4>CK,F1、F2、F3和F4处理较ZC分别减少了15.2%、11.9%、18.7%、26.0%（P<0.05）;各处理CH4的通量值呈双峰变化，分蘖期和抽穗期排放较高，各处理CH4排放总量为ZC>F1>F2>F3>F4>CK,F1、F2、F3和F4处理较ZC分别减少24.3%、40.5%、48.0%、59.1%（P<0.05）;各处理N2O排放总量为ZC>F1>F2>F3>F4>CK,F1、F2、F3和F4处理较ZC分别减少了34.2%、45.6%、59.5%和70.9%（P<0.05）。F1、F2、F3和F4处理水稻产量较ZC处理增产幅度分别为-11.7%、-5.2%、1.7%、0.1%。与CK相比，ZC、F1、F2、F3和F4处理综合增温潜势分别增加99.9%、72.0%、46.4%、29.8%和39.9%。温室气体排放强度为ZC>F1>CK>F2>F4>F3。总体而言，施肥处理显著增加了CO2、CH4和N2O的排放，控释肥减氮20%处理下全球增温潜势、温室气体排放强度最低，水稻产量最高，有利于水稻可持续发展。
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利用射线追踪模拟分析远红光对生菜生长发育和光合作用的影响
《农业工程学报 》 2025 EI 北大核心 CSCD
摘要：为了探究远红光在整株水平对植物的光合及产量的影响，该研究以‘玻璃生菜’为试材，采用红光：远红光配比分别为6.4（CK）、1.6（T1）和0.8（T2）的3种光质组合处理，通过测量生菜植株的形态和干物质累积，分析生菜的光合特性，构建生菜的三维模型，比较生菜的光截获差异，并模拟生菜的干质量，以验证模型的可靠性。结果表明，与CK相比，T1、T2处理下生菜的干质量、鲜质量、株高和叶面积均显著增加（P<0.05）。与CK相比，T1、T2处理下植物的电子传递速率(Jmax)分别显著降低11.6%和21.7%，最大羧化速率(Vcmax)分别显著降低33.7%和47.6%（P<0.05），表明远红光降低了生菜单位叶面积的光合能力。通过构建生菜的3D模型，基于射线追踪模拟，发现T1、T2处理相较于CK光截获分别显著提高了42.7%和68.2%，整株光合速率也分别提高32.5%和56.1%（P<0.05）。利用整株光合速率模拟生菜干质量，在线性回归分析中R2为0.913。综合分析不同指标对整株光截获和光合速率的影响，发现远红光引起的株高和叶面积增加显著提高光截获（P<0.05），光合参数降低减少整株光合速率，贡献度为14.5%（T2），而生菜形态变化提高光合速率，贡献度高达45.9%（T2）。综上所述，远红光引起的形态变化可以提高生菜整株水平的光截获和光合速率，从而提升生菜的产量。
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单宁酸功能化锰基纳米颗粒对TGEV抑制作用的研究
《中国兽医科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）是一种严重危害仔猪的冠状病毒，可引发剧烈腹泻、脱水及高死亡率，其通过粪-口途径快速传播，对全球养猪业造成了重大经济损失。本研究旨在系统评估单宁酸修饰锰金属有机框架纳米粒（TA@Mn-MOF）对TGEV感染的抑制作用，为开发新型抗冠状病毒纳米材料提供理论依据。通过金属离子Mn2+与有机配体的配位自组装过程构建Mn-MOF纳米载体，并通过静电相作用利用单宁酸（TA）对其进行表面修饰，以制备TA@Mn-MOF复合纳米颗粒。采用CCK-8法检测该纳米颗粒组分对猪睾丸细胞（ST）的毒性作用，通过间接免疫荧光试验、Western-blot技术分析TGEV N蛋白在感染细胞中的表达水平，结合qPCR技术测定病毒基因拷贝数变化，系统评价TA@Mn-MOF对TGEV感染的抑制作用。试验结果表明，在Mn2+和有机配体配比为1∶50内时，浓度为10～50μg/m L的纳米颗粒对ST细胞无明显毒性；当单宁酸浓度低于2 mg/m L时，纳米颗粒对细胞无明显毒性。间接免疫荧光试验与Western-blot分析显示，TA@Mn-MOF能够降低ST细胞中TGEV N蛋白水平。qPCR研究进一步表明，TA@Mn-MOF可以在体外影响病毒的复制和释放阶段从而抑制TGEV的感染。本研究证实，TA@Mn-MOF通过干扰病毒复制与释放过程有效抑制TGEV感染，为抗冠状病毒纳米制剂的研发提供了新的技术路径。
关键词： 猪传染性胃肠炎病毒 金属有机框架 单宁酸 纳米颗粒
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稻田面源污染防控技术生态补偿政策设计-基于长三角地区选择实验及偏好机制分析
《农业环境科学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本文针对稻田面源污染防控技术缺乏推广机制、主体应用意愿低的现实问题，面向江、浙、皖17个行政村、130个水稻生产主体，分别开展了农田智慧排水装置、炭基有机肥生态补偿政策选择实验与偏好机制分析。结果表明：地方财政应针对炭基有机肥实行价格补贴，对经营规模0.667 hm2及以下主体最宜补贴标准为300～460元·t-1,0.667 hm2以上主体则应补贴300～420元·t-1；政策方案选择取决于差异化补贴标准下主体对不同有机肥替代量产生的边际产量与边际成本（肥料、施肥）预期，具有明显的规模异质性；当补贴标准达到不同阈值时，其对主体有机肥替代率的影响效应存在断点式跃迁或下跌的门槛特征。在不征收农田尾水排污费情景下，建议将智慧排水装置纳入高标准农田建设内容，补助资金在现有基础上提高2 100～3 750元·hm-2；在加征排污费情景下，建议将智慧排水装置纳入农机购置补贴名录，补贴标准宜为每台1 140～2 010元。研究表明，针对不同类型技术、主体进行差异化补偿工具选择与标准厘定，方可有效发挥生态补偿政策激励效应。
关键词： 稻田面源污染防控技术 生态补偿 选择实验 偏好机制 长三角地区
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转录因子CEBPB对猪δ冠状病毒体外复制的抑制作用
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在探索CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPB)对猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)复制的影响.将PDCoV接种于LLC-PK1细胞,检测不同时间点CEBPB表达水平变化;过表达和敲低CEBPB,利用qPCR和Western blot评估其对PDCoV复制的影响;并进一步明确CEBPB在PDCoV复制周期中的作用;利用qPCR筛选出影响CEBPB上调的病毒蛋白,共聚焦显微镜观察PDCoV病毒蛋白与CEBPB的共定位现象.结果显示,随着病毒感染时间的延长,细胞中CEBPB的表达量呈上升趋势,过表达CEBPB显著抑制了 PDCoV的复制,而敲低CEBPB则促进病毒的复制,CEBPB主要作用于PDCoV的复制阶段,并且PDCoV Nsp4能促进CEBPB表达,共聚焦显微镜观察发现两者存在共定位.综上表明,CEBPB能显著抑制PDCoV复制,为基于CEBPB研制潜在的抗病毒药物提供了新的思路.
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不同有机物料施用对滨海盐渍土降盐培肥及大豆促生抗逆的影响
《土壤 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究不同有机物料施用对滨海盐渍土降盐培肥和作物促生抗逆的影响，以玉米秸秆、酒糟、金针菇菌渣、双孢菇菌渣、天然腐殖质（MT材料）5种有机物料为研究对象开展大豆盆栽试验，每种有机物料设置低、中、高3种施用量梯度，研究其对滨海盐渍土理化性质、生物活性及大豆生长指标的影响。结果表明，不同有机物料种类及施用量在滨海盐渍土降盐培肥中发挥的作用有所差异：高量施用MT材料的降盐效果最好，可使土壤含盐量显著降低1.5 g/kg；双孢菇菌渣对土壤肥力提升效果最显著，可使土壤有机质、可溶性有机碳和有效磷含量分别提升71.6%、278.7%和89.4%；而玉米秸秆和金针菇菌渣对微生物活性的提升效果最佳，其中高量玉米秸秆使微生物生物量碳含量显著提高1.5倍，高量金针菇菌渣处理使土壤β-葡萄糖苷酶和N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性分别显著提升3.3倍和2.6倍。在作物促生抗逆方面，低量的金针菇菌渣和双孢菇菌渣处理可使大豆干物质量分别增加20.9%和16.2%,Na+/K+的比值分别降低64.5%和59.3%，减轻盐胁迫对大豆生长的影响。另外值得注意的是，酒糟和双孢菇菌渣的高量施用会导致土壤含盐量增加，增强对作物的盐胁迫，提高植株叶片脯氨酸的含量，从而抑制作物生长，降低作物的生物量。因此，利用有机物料改良盐渍土时还需考虑有机物料本底含盐量，合理控制其施用量，以减少其对土壤盐分的积累。
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利用基因编辑技术提高不结球白菜抗坏血酸的含量
《园艺学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为提高不结球白菜抗坏血酸含量，以不结球白菜品种‘黄玫瑰’为材料，选择不结球白菜GGP基因的uORF序列为靶标，构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体，通过发根农杆菌介导的遗传转化方法获得了4种不同基因编辑类型‘黄玫瑰’GGP基因uORF的编辑植株，检测再生植株的T1代纯合绿色植株的抗坏血酸含量，再与空载转基因再生植株相比，抗坏血酸含量提高了26.2%～67.1%。这为利用CRISPR/Cas9系统在不结球白菜中开展基因编辑和生物育种研究提供了依据。
关键词： 不结球白菜 上游开放阅读框 遗传转化 抗坏血酸 基因编辑
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基于CRISPR/Cas9技术的牛乳腺上皮细胞全基因组敲除文库的构建
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：旨在构建奶牛乳腺CRISPR/Cas9全基因组敲除细胞文库，用于筛选与奶牛泌乳、应激及疾病等相关的功能基因。本研究靶向牛全基因组蛋白编码基因，利用CRISPR/Cas9技术设计合成转录sgRNAs文库，克隆至慢病毒载体LentiCRISPR-V2,建立牛全基因组CRISPR/Cas9敲除质粒文库，并进行gEditing ScreeningTM文库测序验证；然后将敲除质粒文库进行慢病毒包装和滴度测定，感染牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells, bMECs）后经嘌呤霉素抗性筛选及RT-qPCR、Western blot技术确定最佳感染效果，最终通过高通量测序验证敲除细胞库中sgRNA覆盖率确定细胞文库质量。本研究构建的全基因组敲除质粒文库共靶向20 545个蛋白编码基因，包含61 237条sgRNA和3 062条牛基因组上无靶点的sgRNA;gEditing ScreeningTM质粒文库测序结果显示，全基因组质粒文库覆盖率为100%,均一性为2.35,测序深度为577×;进一步对质粒文库进行慢病毒包装，获得滴度为7.01×10～8 TU·mL-1的病毒液并感染bMECs,嘌呤霉素筛选14 d得到MOI=0.2、0.3、0.4、0.5的稳转细胞株，RT-qPCR、Western blot结果表明，MOI=0.2时感染效果最佳；高通量测序结果显示，细胞文库覆盖率为78.74%,碱基稳定、序列质量较高。综上所述，牛全基因组质粒文库、全基因组敲除细胞文库符合质量标准和试验需求，能为挖掘调控牛泌乳性状及乳腺健康的关键基因研究提供重要的细胞筛选平台。
关键词： 牛 CRISPR/Cas9 全基因组 敲除质粒文库 牛乳腺上皮细胞 敲除细胞文库
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