CRISPR/Cas9技术高效制备山羊SOCS2基因编辑胚胎

张晨俭; 李隐侠; 丁强; 刘伟佳; 王慧利; 何南; 吴家顺; 曹少先; 《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：旨在设计、筛选高效编辑山羊胚胎生长负调控因子SOCS2基因的sgRNA,为通过SOCS2基因编辑创制快长型山羊奠定技术基础.本研究利用在线网站对山羊SOCS2基因SH2结构域保守序列设计2条sgRNA,构建表达载体,体外转录获得sgRNA及Cas9 mRNA;体外检测sgRNA+Cas9蛋白切割靶DNA的效率;在此基础上将屠宰场山羊卵巢分离培养的442个孤雌胚胎进行分组,2个试验组显微注射sgRNA和Cas9 mRNA混合物,对照组注射超纯水,以单个囊胚全基因组DNA扩增产物为模板,PCR扩增靶区域并测序鉴定,发生编辑的样本进行T-A克隆测序检测编辑形式;根据在线网站预测,每条sgRNA选择5个错配数最少的潜在脱靶位点进行脱靶检测.结果表明,在SOCS2基因83和96号氨基酸密码子附近区域获得2条sgRNA并成功构建表达载体,体外转录获得高质量sgRNA和Cas9 mRNA;两条sgRNA均可引导Cas9蛋白在体外完全切割靶DNA;SOCS2-sg-83对胚胎的编辑效率为94.1%,160个T-A克隆中有152个在靶位点出现插入、缺失或替换,概率为95.0%,其中81.3%发生了移码突变,9.4%的克隆缺失83号氨基酸密码子,累计90.6%的克隆实现了 SOCS2基因功能性敲除;SOCS2-sg-96对胚胎的编辑效率为50.0%,80个T-A克隆中有70个在靶位点出现插入、缺失或替换,概率为87.5%,移码突变概率为75.0%,5.0%的克隆缺失了 96号氨基酸密码子,累计80.0%的克隆实现了 SOCS2基因功能性敲除.另外,在所有已编辑胚胎中均未发现脱靶.综上,SOCS2-sg-83可实现山羊胚胎SOCS2基因的高效、精准编辑和敲除,为高效制备SOCS2基因敲除山羊,培育快长型肉用山羊奠定了技术基础.

关键词： 山羊胚胎 细胞因子信号传导抑制因子2 CRISPR/Cas9 基因编辑

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栽插密度和EBR浓度对甘薯鲜薯产量和品质的影响

罗元凯; 李染秋; 李宜蒙; 唐维; 刘亚菊; 《作物杂志 》 2024 北大核心

摘要：为了进一步探究提升甘薯产量和品质的方法，以及为北方地区甘薯的丰产栽培配套技术提供理论参数，通过设计栽插密度和24-表油菜素甾醇（EBR）喷施浓度双因子耦合，研究其对甘薯产量和品质的影响。结果表明，相同的栽插密度下，低浓度和高浓度的EBR都不利于甘薯产量、SPAD值、F_v/F_m的提升，而较高栽插密度和适当的EBR浓度有利于甘薯产量和光合特性的提升，栽插密度为67 500株/hm~2，喷施150 L/hm~2浓度为0.10 mg/L的EBR时鲜薯产量最大。适当的EBR浓度有利于甘薯整体品质的提升，适度地提高栽插密度有利于增加甘薯的还原糖、蛋白质和淀粉含量，但是会降低可溶性糖含量。合适的栽插密度和EBR喷施浓度耦合有利于提升甘薯的商品率和薯块的干物质含量，而对甘薯表型性状影响不显著，且对单株结薯数无明显影响。光合特性对甘薯的部分品质影响显著，制约甘薯产量的主导因子是淀粉含量（0.694），其次是还原糖含量（0.672）和最长蔓长（0.667），而分枝数这一因素对产量影响最小，其关联度仅为0.511，且在较高的栽插密度和EBR浓度时，甘薯的产量和质量指标的变化更均匀稳定。

关键词： 甘薯 密度 EBR 鲜薯产量 品质

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黄鳝仿生态繁殖及雄化育苗技术

王腾; 王泽平; 单金峰; 王信海; 《科学养鱼 》 2024 北大核心

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复杂环境下无人机集群运动一致性的群体熵度量

刘云平; 牛天宇; 敖洋钒; 周朝杰; 还红华; 张婷婷; 《中国惯性技术学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD

摘要：针对无人机集群在多障碍物或空间受限等复杂环境中协同飞行时无法实现群体自主的协同演化及适应环境、态势的变化,导致整个群体运动产生振荡、失控等一致性差的问题,提出一种无人机集群运动一致性的群体熵度量理论.通过建立群体运动行为稳定程度的熵度量函数,作为个体之间协同运动的适应度值指标,实现复杂环境下无人机集群运动一致性的自适应调节.最后进行仿真实验,相比传统无人机集群算法,引入群体熵度量的无人机运动集聚收敛速度提高 30%,复杂环境中集群运动的熵值波动范围下降 21.8%,有效证明群体熵度量对于无人机集群运动一致性的提高.

关键词： 无人机 集群运动 运动一致性 群体熵度量

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一种口蹄疫灭活疫苗水包油复乳佐剂的制备及其皮内免疫效果评价

许泽玉; 尹文竹; 周宇杰; 邓碧华; 卢宇; 杨平; 《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为了提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果，本研究对佐剂选择和免疫途径进行了疫苗的安全性和免疫效果评价，最终筛选出油酸乙酯、聚氧乙烯月桂醇及PEG400以2∶5∶3的质量比例混合形成复乳佐剂（简称OEPP），配伍口蹄疫灭活抗原，通过皮内免疫小鼠，检测其安全性并探究其免疫效果。结果显示，OEPP可以在4～60℃下稳定存放30 d；体外溶血试验证明，OEPP不会造成红细胞破裂，且红细胞形态良好。进一步通过组织病理学分析OEPP不会诱发重要生理器官的病变。体内外安全测试均证实OEPP具有较好的生物相容性，可以用于体内注射使用；皮内免疫OEPP与商品化ISA206后血清中FMDV-Ig G抗体效价无显著性差异，但显著高于肌肉免疫；此外，与肌肉免疫相比，发现皮内免疫可诱导注射部位皮肤组织募集更多的淋巴细胞、炎性细胞。结果表明，复乳佐剂OEPP经皮内免疫可以诱导局部炎性反应，诱导更多抗原递呈细胞聚集，促进了免疫应答效力，为后续本体动物的无针皮内免疫试验提供了试验数据。

关键词： 口蹄疫 复乳佐剂 皮内注射 疫苗

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江苏淮安市高粱上玉米黄花叶病毒的分子检测与鉴定

王海涛; 任春梅; 董岩; 李硕; 程兆榜; 季英华; 《作物杂志 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为掌握江苏省高粱病毒病的发生情况,从江苏淮安采集高粱疑似病毒病样品20份,进行了分子检测与鉴定.结果发现,使用玉米黄花叶病毒(maize yellow mosaic virus,MaYMV)引物可扩增出与目的片段一致的条带,检出率为80%.利用MaYMV外壳蛋白(CP)基因引物,以阳性样本RNA为模板进行扩增、克隆、酶切验证和测序分析,并构建进化树发现,淮安分离物CP基因与江苏分离物CP基因的进化关系较近.这些结果表明江苏淮安高粱受到了 MaYMV侵染,这是该病毒在我国高粱上的首次报道.

关键词： 玉米黄花叶病毒 高粱病毒病 分子检测 进化树分析

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不同育苗方式对机插秧苗素质、栽插质量及水稻产量的影响

钟平; 纪力; 孙春梅; 邵文奇; 《上海农业学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为探明常规育苗、托盘育苗和漂浮育苗3种方式对水稻育苗及大田生长的影响,以‘南粳9108’为供试材料,比较相同播量下3种方式所育秧苗素质差异及对栽插质量、大田生长和产量的影响。结果表明:3种育苗方式成苗率在71.7%—75.0%,其中漂浮育苗最高,三者的地上部性状无显著差异,但常规育苗根系数量及长度较托盘育苗和漂浮育苗分别增加21.4%、16.1%和3.3%、9.8%;漂浮育苗的空穴率和伤秧率分别为0.39%、0.78%,栽插质量最优;漂浮育苗分蘖高峰期分蘖数较托盘育苗和常规育苗分别增加9.8%和24.0%,但单株生物量积累有所降低;漂浮育秧最终成穗数较托盘育苗、常规育苗增加7.2%和8.1%,但每穗实粒数降低4.9%、4.6%,在最终产量上三者之间无显著差异。综合来看,3种育苗方式都可育出健壮秧苗,并且栽插质量、大田生长和产量表现良好,在生产上可根据实际情况进行选择。

关键词： 水稻 机插秧 托盘育苗 漂浮育苗 秧苗素质 产量

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超声雾化微酸性电解水对采后娃娃菜流通及货架品质的影响

孟敌; 焦贺; 韩颖; 赵安琪; 王馨渝; 李鹏霞; 胡花丽; 吴朝霞; 《食品工业科技 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为了探明微酸性电解水(Slightly acidic electrolyzed water,SAEW)对采后娃娃菜货架品质的影响,本文分析了在低温流通(4±1)℃及货架条件(25±1)℃下,不同浓度(0、50、100和 150 mg/L)SAEW超声雾化熏蒸处理对娃娃菜采后保鲜效果的影响.结果显示,较对照和其它浓度(50和 150 mg/L)SAEW处理相比,100 mg/L SAEW超声雾化熏蒸处理在货架第6和第9d时显著抑制了娃娃菜丙二醛含量的升高及总硫苷含量的下降(P<0.05).进一步的流通及货架模拟结果显示,与对照组相比,100 mg/L的SAEW超声雾化熏蒸处理使娃娃菜中的菌落总数降低了 17.04%,总硫苷含量提升了 30.11%;另外,该处理显著抑制了采后娃娃菜中亚硝酸盐和丙二醛含量的积累(P<0.05),延缓了可溶性糖、可溶性蛋白、总酚、抗坏血酸和异硫氰酸酯含量的下降,提高了黑芥子酶的活性.100 mg/L SAEW超声雾化熏蒸处理不仅能有效抑制流通及货架期间娃娃菜中菌落总数的生长,而且可有效减缓该过程中娃娃菜营养品质的流失,从而提高娃娃菜的保鲜效果.

关键词： 微酸性电解水 娃娃菜 衰老 品质 亚硝酸盐 流通 货架期

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壳聚糖/玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒复合膜的制备及其性能

李双健; 邸清茹; 龚敏慧; 李思媛; 周剑忠; 范琳琳; 《中国食品学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD

摘要：目的：开发一种负载玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒（体积分数5%和10%）作为增强剂和功能剂的壳聚糖/玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒复合膜，并研究玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒对薄膜的物理化学性质和结构属性的影响。结果：扫描电子显微镜（SEM）和X射线衍射（XRD）分析表明，玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒呈球形，粒径约为193～487 nm，与薄膜基体具有良好的相容性，并填充了薄膜基体的空隙，显著提高了薄膜的力学性能，使断裂伸长率从14.55%增到42.86%，抗拉强度从13.26 MPa增到36.86 MPa。此外，薄膜的抗氧化性能显著提升，DPPH和ABTS自由基清除活性分别从31.82%和31.07%提高到84.05%和79.17%。结论：玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒不仅可以提高壳聚糖膜的力学性能，而且通过负载玉米醇溶蛋白-花色苷纳米颗粒增强了薄膜的抗氧化性。

关键词： 纳米颗粒 花色苷 生物聚合膜 力学性能 抗氧化活性

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甘薯杂粮粉品质特征与主要理化性质的Mantel test分析

穆晶晶; 周翔; 母浩圆; 章敖波; 岳瑞雪; 《粮食与油脂 》 2024 北大核心

摘要：以不同品种甘薯全粉为原料，复配黄豆粉、芝麻粉制备甘薯杂粮粉，并测定其β-胡萝卜素、玉米黄质、槲皮素含量，利用曼特尔检验(Mantel test)方法探讨这3种天然成分含量与其理化指标之间的相关性，研究甘薯品种对甘薯杂粮粉品质的影响。结果表明：甘薯杂粮粉的抗氧化能力与β-胡萝卜素含量呈强正相关(r=0.80),与玉米黄质含量(r=0.26)和槲皮素含量(r=-0.14)呈现弱相关性。甘薯杂粮粉的干物质含量与β-胡萝卜素含量呈负相关(r=-0.72),与玉米黄质含量(r=0.91)和槲皮素含量(r=1.00)呈强正相关。总体表明β-胡萝卜素是甘薯杂粮粉中有效的抗氧化成分。

关键词： 甘薯杂粮粉 工艺优化 理化性质 曼特尔检验

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