科研产出
玉米ZmZIM家族基因鉴定及其对氮素的响应特征
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确玉米ZmZIM家族基因结构、位置、编码蛋白质性质及其对氮素的响应特征，本研究利用TBtools、MEGA X等软件分析玉米ZmZIM家族基因的结构、染色体位置、顺式作用元件及系统发育关系及其编码蛋白质的理化性质、保守结构域及基序，结合玉米不同发育时期不同器官的转录组数据及充足氮与低氮水平下四叶一心期玉米地上部转录组数据解析玉米ZmZIM家族基因的表达模式及差异。结果表明：从玉米全基因组中共鉴定到32个玉米ZmZIM基因，主要分布于1号、2号、5号和7号染色体，8号和10号染色体上无ZmZIM基因。32个ZmZIM基因可划分为4个亚类，其编码蛋白质由134～467个氨基酸残基构成，均为亲水性蛋白质且全部定位在细胞核中。32个ZmZIM基因启动子区域顺式作用元件主要有调控元件、光信号响应元件、激素信号响应元件、胁迫响应元件、生长发育元件及蛋白质结合位点等6大类。不同发育时期，ZmZIM基因在玉米不同器官中存在差异性表达；在充足氮与低氮处理下，随着处理时间的增加，玉米植株地上部12个ZmZIM基因无表达或相对表达量较低，6个ZmZIM基因相对表达量较高且稳定，其余的14个ZmZIM基因的相对表达量差异较大；ZmZIM5、ZmZIM16、和ZmZIM31 3个基因的相对表达量普遍高于其他基因。充足氮条件下，ZmZIM8、ZmZIM15、ZmZIM20、ZmZIM24、ZmZIM29和ZmZIM31基因的相对表达量普遍高于低氮条件。本研究结果为玉米氮高效吸收利用基因筛选和利用奠定基础。
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滑液支原体烯醇化酶在感染宿主中的反应原性和细胞黏附性
《中国兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：滑液支原体（Mycoplasma synoviae,MS）是一种重要的禽病病原，严重危害我国养禽业。本研究旨在分析MS烯醇化酶（enolase, Eno）参与病原致病和诱导感染宿主免疫相关的功能。对MS的Eno蛋白进行种内和种间同源性和进化树分析，并预测Eno的蛋白结合位点和B细胞表位。MS Eno在不同MS菌株间同源性较高，且有别于其他物种。B细胞表位广泛分布在Eno蛋白的各个部分，且大都与预测的蛋白结合位点有重合。进行Eno原核表达和纯化，制备兔抗Eno多克隆抗血清。利用Western blot分析Eno在MS感染鸡或灭活苗免疫鸡中的反应原性。结果显示，MS Eno与兔抗Eno多克隆抗血清、兔抗MS多克隆抗血清、灭活疫苗（HN01株或YBF-MS1株）高免鸡血清、HN01强毒攻毒后阳性鸡血清、3个不同地方来源的临床阳性鸡血清均能发生反应，说明其在疫苗免疫和病原感染鸡中均表现有反应原性。利用菌落印迹和双荧光检测分析并证实Eno为外膜蛋白。利用间接免疫荧光和ELISA板结合试验分析Eno对鸡滑膜鞘细胞（synovial sheath cells, SSCs）是否具有黏附素作用。试验证实Eno对SSCs具有黏附作用，且此黏附作用具有Eno浓度依赖性。以上证明MS Eno在病原感染和灭活苗免疫鸡中具有反应原性，并作为外膜锚定的细胞黏附素参与对关键宿主细胞SSCs的黏附，为后续深入研究Eno的致病和免疫相关功能提供了重要参考。
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灰飞虱卵表面分泌液中蛋白质组分鉴定及分析
《昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】鉴定和分析灰飞虱Laodelphax striatellus卵表面分泌液中的蛋白质组分，为后续灰飞虱效应子筛选和功能研究提供基础。【方法】在显微镜下从水稻叶鞘中收集灰飞虱完整卵，用磷酸缓冲液洗脱并收集完整卵表面的分泌液；利用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)联用仪测定卵表面分泌液蛋白质组，将其中的35个蛋白与10种节肢动物唾液蛋白质进行比较分析，推测这35种蛋白的功能保守性和特异性；采用qPCR检测10个基因(LsHSP70,LsPDIA3,LsHSP90,LsPPIase,LsADPRF1,LsHSP68,LsEF1α,LsATPS,LsG3PD和RZF49036)在灰飞虱不同发育阶段(卵、 1-5龄若虫和成虫)和雌成虫组织(输卵管、唾液腺、肠道和脂肪体)中的表达量。【结果】在灰飞虱卵表面分泌液中鉴定到149个蛋白，其中有35种蛋白检测到2个及以上的唯一肽段。在这35个蛋白中，发现6个蛋白在至少5种节肢动物的唾液蛋白质组中也普遍存在，推测它们在取食和产卵中具有相似功能；另有9个蛋白未在节肢动物唾液蛋白质组中发现，这些蛋白可能特异性地参与了飞虱的产卵过程。qPCR检测结果显示，LsHSP90和LsEF1α在雌成虫中高表达，且LsEF1α在雄成虫中不表达；LsPDIA3和LsHSP90在输卵管中高表达；其余基因在灰飞虱各个发育阶段和组织中均有不同程度的表达。【结论】在灰飞虱卵表面分泌液中鉴定到149个蛋白，其中一些蛋白与节肢动物唾液蛋白相比既有普遍性也有特异性，不同编码基因在不同发育阶段和组织中的表达模式也存在不同程度的差异。
关键词： 灰飞虱 卵表面分泌液 蛋白质组 唾液蛋白 表达模式
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全株小麦青贮适宜收获期及青贮添加剂配比技术的研究
《中国草地学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了确定全株小麦作为青贮饲料的适宜收获期及最佳的青贮添加剂配比组合，首先分析了全株小麦开花期、乳熟期、蜡熟期的干物质产量及营养成分含量，综合各生育期全株小麦的各项饲用指标（可消化干物质产量、非结构性碳水化合物含量等），表明蜡熟期是最适宜作为青贮的时期。其次通过添加不同浓度的乳酸菌与糖蜜来研究添加剂配比组合对全株小麦青贮料发酵效果及养分损耗，结果表明同时添加两种添加剂的全株小麦青贮料的饲用品质和发酵品质显著优于只添加其中一种添加剂。两种添加剂配比中，添加乳酸菌浓度较低时（≤0.02‰），糖蜜添加浓度为2%较添加浓度为1%的全株小麦青贮料的饲用品质和发酵品质好；添加乳酸菌浓度较高时（≥0.04‰），糖蜜添加浓度的变化对全株小麦青贮料的饲用品质和发酵品质影响不显著。研究结果可为全株小麦青贮适宜收获期以及乳酸菌与糖蜜配比组合在青贮饲料中应用提供参考。
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1-甲基环丙烯结合自发气调包装处理对迷你黄瓜贮藏品质和抗氧化能力的影响
《河南工业大学学报(自然科学版) 》 2024 北大核心
摘要：为延长迷你黄瓜的保鲜期，比较了1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene, 1-MCP)、自发气调包装(modified atmosphere packaging, MAP)和两者结合处理(1-MCP+MAP)对10℃贮藏条件下迷你黄瓜品质的影响。结果表明：与对照组相比，1-MCP、MAP和1-MCP+MAP 3种处理均可有效延缓迷你黄瓜的硬度、可溶性固形物含量和叶绿素含量的下降；其中1-MCP+MAP处理可维持迷你黄瓜较高的过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶活性和DPPH自由基、羟自由基清除能力，显著抑制丙二醛含量、失重率和呼吸强度的上升，1-MCP+MAP处理对黄瓜品质的保持效果明显优于单独处理，低温贮藏期可延长5～10 d。研究结果为1-MCP结合MAP的保鲜方法在迷你黄瓜贮藏中的应用提供了技术参考和理论依据。
关键词： 迷你黄瓜 1-甲基环丙烯 自发气调包装 贮藏品质 抗氧化能力
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玉米叶片硝酸盐积累性状的全基因组关联分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：为鉴定筛选调控玉米氮素吸收代谢相关位点和基因,以遗传来源广泛的350份玉米自交系为材料,利用玉米55K SNP芯片,对玉米叶片硝酸盐积累性状进行基于Q+K混合线性模型的全基因组关联分析.结果表明,350份玉米自交系构成的自然群体具有广泛的遗传多样性,3次重复测量的叶片硝酸盐含量均表现出良好的正态分布特性.叶片硝酸盐的全基因组关联分析显示,共有27个稳定的SNP位点与玉米叶片硝酸盐积累显著相关,这27个位点共分布在玉米6条染色体上,其中16个集中在4号染色体上.对9个极显著关联[-1gP≥5.5]位点基因进行氮响应相对表达分析,有8个基因表现出显著氮响应特性,其中3个基因响应达到极显著水平,分别较对照提高3.54、2.74、2.02倍,对应已注释的基因分别为NAC79、GA20ox7和PREP2,表明它们可能在氮素吸收代谢的调控中发挥作用.相关研究结果可作为玉米硝酸盐吸收代谢研究的重要候选基因进行功能验证,对开发氮高效分子标记及育种利用具有重要意义.
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真空冷冻预干燥对压差膨化干燥果蔬脆片质地特性的影响
《农业工程学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：为探索预干燥处理对不同果蔬脆片结构及质地特性的影响，该研究采用真空冷冻干燥作为预干燥，并选取了3个水分转换点（60%、45%、30%），对预干燥过程中6种典型果蔬（苹果，梨，桃，山药，马铃薯，青萝卜）水分状态、细胞结构、收缩率、孔隙度、应力-松弛特性与质地特性进行测定与分析。结果表明，随着预干燥的进行，水分含量逐渐降低，自由水逐渐散失，以不易流动水为主，收缩率逐渐减小，孔隙度逐渐增大，硬度、咀嚼性、弹性模量逐渐增加；水分转换点为60%时不同果蔬脆片具有较高的硬脆度，其中马铃薯与山药脆片硬度较高，桃与梨的脆片脆度较高；水分转换点为30%时，6种果蔬的孔隙度最高，且青萝卜的孔隙度显著高于其他果蔬（P ＜0.05）；在干燥后期，果蔬样品骨架基本形成，且收缩率较低，致使内部孔隙度变大；由相关性分析可知真空冷冻预干燥过程中水分转换点、孔隙度与果蔬脆片质地特性极显著相关（P ＜0.05），研究结果可为预干燥对果蔬脆片质地影响提供参考。
关键词： 预干燥 真空冷冻干燥 压差膨化干燥 果蔬脆片 质地特性
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细胞色素P450介导的杂草抗药性研究进展
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：细胞色素P450(cytochrome P450)是一类重要的亚铁血红素-硫醇盐蛋白超家族，属于单加氧酶，广泛分布于生物界中。研究发现P450主要具有“生物合成”和“生物解毒”两大功能，被誉为“万能的生物催化剂”。大多数除草剂在植物体内代谢的初始阶段即涉及植物细胞色素P450的作用。近些年，由P450介导的抗药性杂草呈多发态势，其复杂的抗性谱，给杂草化学防除带来了新的挑战。本文对P450分类命名、P450与除草剂代谢的关系、P450抗性鉴定手段、P450介导抗性杂草发生情况、与除草剂代谢有关的植物细胞色素P450基因克隆等内容进行了综述，旨在为该领域的相关研究提供参考。
关键词： 细胞色素P450 除草剂 鉴定手段 抗性杂草 P450基因
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黑水虻幼虫肠道微生物的功能及组学应用
《环境昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：黑水虻Hemertia illucens幼虫肠道中栖息着许多种类的微生物，这些微生物与宿主之间的相互作用极为复杂，它们可以影响宿主的生长发育、繁殖能力、营养代谢、行为偏好和寿命。此外，它们还可以调节宿主的免疫系统并保护宿主免受病原体的侵害。深入了解微生物与黑水虻的互作机制，有助于优化黑水虻的生长环境，从而实现更高效的人工繁育。相关文章对微生物与黑水虻互作机理进行了总结，但这些研究方法只能提供微生物群落的结构信息，而无法揭示微生物的功能和代谢能力。因此，宏基因组学、宏转录组学、宏蛋白质组学和代谢组学逐渐被应用，这些技术除了提供关于微生物种群的完整分类，还揭示了它们的功能和代谢能力。通过了解肠道菌群的组成和功能，可以有效调整黑水虻的饲料、饲养环境和生长条件，从而提升黑水虻肠道菌群的稳定，提高黑水虻的生产性能和经济效益。
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猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：猪肺炎支原体的持续性感染问题频发,同源重组介导的抗原变异扮演重要角色.解螺旋酶RuvA调节霍利迪连接体变构是参与同源重组的关键步骤.鉴于此,本研究旨在原核表达猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA重组蛋白,鉴定其DNA结合活性并制备多克隆抗体.试验通过分子克隆构建原核表达质粒pET21a-RuvA,经诱导表达和纯化获得RuvAMhp重组蛋白;免疫家兔制备抗RuvAMhp多克隆抗体,再利用间接ELISA和Western blot试验进行效价测定和特异性验证;利用凝胶迁移试验结合表面等离子共振技术分析RuvAMhp的DNA结合活性;利用凝胶迁移试验结合Western blot试验鉴定RuvAMhp的寡聚特性.结果显示:原核表达的RuvAMhp重组蛋白约为26 ku;制备的抗RuvAMhp多克隆抗体效价为1∶256 000,且具有良好的特异性;RuvAMhp具有较强的DNA结合活性,对霍利迪连接体的亲和力高达624.4 pmol·L-1(KD),并且主要以八聚体形式与其形成稳定复合物.通过Ru-vAMhp的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定,为后续探索RuvA调解同源重组介导猪肺炎支原体抗原变异的分子机制奠定了基础.
关键词： 猪肺炎支原体 解旋酶RuvA DNA结合 多克隆抗体
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