科研产出
元宝枫组织培养与快速繁殖技术
《中南林业科技大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】元宝枫是我国特有的木本油料植物，非常适合开发利用，但其组培离体繁殖生根非常困难，建立合理的完整组培离体再生体系，在短时期内获得大量种苗和当年生带芽茎段，为该树种优良种苗规模化生产提供新途径，为选育元宝枫良种、种质资源保存与推广等提供研究基础。【方法】以元宝枫当年生带芽茎段和种子为试材，通过正交设计筛选法和单因素筛选法对其灭菌方式及腋芽诱导、继代增殖、生根培养基进行设计筛选。在MS、1/2MS和NN69基础培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA、NAA和TDZ激素，通过不同配比找出元宝枫各阶段的最适培养基。【结果】全年中4月份为带芽茎段最佳采集时间，经洗衣粉溶液轻刷表面并冲洗半小时后，以75%酒精30 s+0.1%HgCl2 10 min浸泡处理的灭菌效果最佳。再生体系各阶段最适培养基均为MS基础培养基，在其基础上再添加不同质量浓度的激素可以诱导嫩芽分化成不同器官。启动培养阶段，6-BA对腋芽诱导影响最大，最适培养基诱导率可达73.33%；继代增殖阶段，TDZ对不定芽分化影响最大，增殖系数最高可达4.31；生根阶段，采用单因素筛选法，发现添加0.2 mg·L-1 IBA元宝枫生根率和生根条数均为最高，达93.33%和4.3。【结论】元宝枫最适培养基为：1)启动培养：MS+0.06 mg·L-1 6-BA和0.06 mg·L-1 NAA，诱导率为73.33%;2)增殖培养：MS+0.30 mg·L-1 TDZ和0.05 mg·L-1 NAA;3)生根培养：MS+0.2 mg·L-1 IBA。
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桑黄总黄酮的提取、组分分析及其生物活性评价
《食品工业科技 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为系统研究桑黄中总黄酮的提取工艺,明晰总黄酮中黄酮类化合物的组成及含量,探讨桑黄总黄酮的生物活性,本研究采用响应面法优化了桑黄总黄酮的提取工艺,高效液相色谱法分析了桑黄总黄酮的组成,并检测其生物活性.实验结果表明,以桑黄总黄酮得率为指标的最优提取条件为提取温度 73℃、固液比 1:50 g/mL、提取时间 3 h,在此提取条件下桑黄总黄酮的得率达到了 2.68%;采用高效液相色谱法测定了桑黄总黄酮中的黄酮种类及其含量,发现桑黄总黄酮中主要含有花旗松素、槲皮素和山奈酚,其中花旗松素含量最高达到 3727.31 mg/kg;桑黄总黄酮生物活性分析结果显示,其具有一定的体外抗氧化、降脂、降糖活性,在其浓度为 14 μg/mL时对DPPH自由基的清除率达到 58.63%±0.45%,浓度为 0.08 mg/mL时,对羟基自由基的清除率达到 52.51%±1.49%;桑黄总黄酮的降脂活性实验结果显示,桑黄总黄酮在浓度为 6 mg/mL时对胰脂肪酶的抑制率达到 10.56%±0.06%,在浓度为 4 mg/mL时对胆固醇胶束溶解度的抑制率达到了 32.59%±0.78%;桑黄总黄酮具有明显的降糖活性,其对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的IC50 分别为71.42 mg/mL和97.28 mg/mL.
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基于InDel标记分析305份中国甘薯登记品种遗传多样性
《植物遗传资源学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：对甘薯育成品种进行亲缘关系评价,是了解其遗传背景并有效利用种质资源的重要前提.利用本课题组前期开发的23对InDel引物对305份中国甘薯登记品种进行基因型分析,共扩增出56个条带,其中53个条带具有多态性,多态率达94.6%.多态信息量(PIC)、Nei's遗传多样性指数(H)、观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)的平均值分别为0.4098、0.4451、0.6003、0.4460.群体结构分析表明,群体数在K=2时ΔK达到最大值,K=4时有个小高峰;北方薯区和长江流域薯区在2个组群内均匀分布,南方薯区大部分(72.97%)汇聚在组群2.主坐标分析(PCoA)中南方薯区有部分汇聚,整体没有划分出明显的簇群.聚类结果将群体划分为4个主要类群,北方薯区和长江流域薯区的品种在类群Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ中均匀分布,南方薯区主要(77.03%)集中于类群Ⅳ,这一聚类结果与群体结构研究、主坐标分析基本一致.通过系谱分析筛选出登记品种的13个主要亲本材料,各育种单位存在重复利用亲本进行正反交培育的情况.本研究将分子标记结果与系谱信息相结合,初步表明中国甘薯登记品种的亲缘关系较近,遗传背景狭窄,为甘薯的种质创新、新品种选育提供参考.
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施氮对田菁翻压还田滩涂盐渍土碳氮及细菌群落结构的影响
《土壤 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探讨不同施氮处理下田菁翻压还田对滩涂盐渍土的改良效果,通过田间小区试验研究了不同施氮水平下（CK、SN1、SN2、SN3、SN4对应的施氮量分别为0、90、135、180、225 kg/hm~2）绿肥田菁还田对土壤碳氮、pH、水溶性盐和细菌群落结构的影响。结果表明:SN3处理下田菁生物量和碳、氮累积量最高,分别为41 882、3 756和101.5 kg/hm~2。作绿肥翻压还田后,则以SN2处理土壤有机碳、全氮含量最高,分别为6.51 g/kg和0.637 g/kg。各施氮处理下,田菁翻压后土壤微生物生物量碳氮含量低于CK处理。随田菁翻压量的增加,土壤pH呈逐步下降趋势,而土壤水溶性盐总量则随施氮水平和翻压量的增加而上升,但较种植前明显降低。不同施氮处理田菁翻压后,土壤中具有一定有机降解功能的变形菌门、酸杆菌门、拟杆菌门、放线菌门和绿弯菌门等细菌类群占据主导地位,且相对丰度随田菁翻压量的增加呈一定变化趋势,但细菌群落结构变化不明显。土壤门水平优势菌群相对丰度与土壤碳氮含量、pH和水溶性盐总量等指标均呈一定的相关关系,其中以拟杆菌门、厚壁菌门、蓝菌门、绿弯菌门和迷踪菌门相对丰度与土壤有机碳和全氮含量的相关性较显著。综上所述,SN2处理下田菁翻压还田可显著提升滩涂土壤有机碳和全氮含量;不同施氮水平下生长的田菁翻压还田后,土壤水溶性盐总量均较种植前显著降低,主要优势菌群均有利于绿肥降解与土壤培肥,改善滩涂土壤微生态环境。
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苏云金芽孢杆菌Cry毒素共性结构短肽串联表达及功能分析
《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）Cry毒素是一类具有抗虫功能的微生物蛋白。将前期基于Bt Cry毒素家族氨基酸序列及结构信息设计获得的呈现Cry毒素共性结构的3个短肽，拼接成为具有免疫原性的长链多肽（Bt Cry-GXJG-11），以期研发Bt Cry毒素杀虫功能的模拟物及制备Bt Cry毒素检测用广谱抗体的免疫原。分子建模预测结果显示，Bt Cry-GXJG-11与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫（Helicoverpa armigera）钙黏蛋白受体（HaCad-TBR）存在互作效应，并初步明确了两者互作的关键氨基酸位点为244TYR。经原核表达，获得了质量浓度为0.5 mg/mL的Bt Cry-GXJG-11纯蛋白，测得其与HaCad-TBR的亲和力常数（KD）为2.151×10-7mol/L。室内生测试验表明，Bt Cry-GXJG-11对棉铃虫具有一定杀虫活性，校正死亡率为27.5%；且以其免疫的小鼠血清能同时识别6种Bt Cry毒素（Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ah、Cry1B、Cry1C、Cry1F）。
关键词： Bt Cry毒素 共性结构 分子互作 杀虫活性 广谱抗体 棉铃虫
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木耳双翅目虫害调查及杀虫剂筛选
《食用菌学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为调查我国木耳(Auricularia spp.)主产区栽培中双翅目虫害种类,筛选适宜的高效低毒杀虫剂,对8个不同地区黑木耳(A.auricula)、毛木耳(A.cornea)和玉木耳(A.cornea,white variety)的虫样进行采集,采用形态特征与线粒体CO I基因片段序列比对相结合的方法进行分类鉴定.从采集的14种双翅目虫样中,鉴定出5科9种危害木耳的昆虫,其中眼蕈蚊科种类最多,为害范围最广;异迟眼蕈蚊是木耳栽培中需要重点关注和防治的种群.采用药液浸渍法测定8种杀虫剂对异迟眼蕈蚊的室内毒力,25%噻虫嗪可湿性粉剂对异迟眼蕈蚊的杀虫效果最好,LC50为15.122 mg·L-1;其次为10%吡虫啉可湿性粉剂和10%烯啶虫胺水剂,其LC50分别为28.488、29.131 mg·L-1.采用喷雾法测定8种杀虫剂对毛木耳产量的影响,从前三潮总产量比较发现,2.5%高效氯氟氰菊酯微乳剂[1/500:(2096.00±29.26)g,1/1000:(1878.00±4.36)g]产量最高且显著高于所有处理,其次为25%噻虫嗪可湿性粉剂和0.5%苦参碱水剂.建议在毛木耳栽培中高效氯氟氰菊酯、噻虫嗪和苦参碱三类杀虫剂轮换使用.
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鲜食葡萄保鲜技术研究进展
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：葡萄在世界各地均有广泛种植,按其用途不同,被划分为酿酒葡萄和鲜食葡萄两大类品种.鲜食葡萄作为我国葡萄产业的一大特色,因其营养丰富、酸甜可口,备受消费者青睐.但鲜食葡萄在采后贮藏、运输、销售、配送等过程中极易出现腐烂变质、果实软化、干梗脱粒等现象,严重影响了其商品性和经济价值,因此鲜食葡萄保鲜技术的研究一直备受关注.江苏省作为我国鲜食葡萄产业大省之一,在2017年成立了江苏省葡萄产业技术体系,着力推进鲜食葡萄产业发展.为助推江苏省葡萄产业体系建设,本文从物理、化学、生物等保鲜技术出发,对当下鲜食葡萄保鲜技术研究进展进行了整理总结,对各项保鲜技术的利弊和推广应用的可行性进行了简要分析;同时,结合鲜食葡萄的商品特点、当下市场群众的消费观念和网络等电商平台的发展形势,梳理了鲜食葡萄保鲜领域目前存在和亟待解决的主要问题;最后,从分子机理、绿色环保、技术成本和市场要素等方面展望了鲜食葡萄保鲜未来研究发展方向,以期为鲜食葡萄保鲜技术研究的进一步蓬勃发展奠定理论基础.
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MSTN基因编辑湖羊胫腓肌的转录组分析
《南京农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本文旨在探索肌肉抑制素基因(myostatin,MSTN)调控肌肉生长发育的分子机制.[方法]以3月龄MSTN基因编辑湖羊(试验组)和野生型湖羊(对照组)胫腓肌为对象,采用PCR和Western blot方法验证MSTN编辑湖羊编辑形式,在此基础上开展转录组测序和分析,并用real-time PCR方法对差异表达基因进行结果验证.[结果]对照组和试验组共有149个差异表达基因,其中65个基因上调,84个基因下调,GO注释和KEGG富集分析表明,差异表达基因显著富集在氧化磷酸化、果糖和甘露糖代谢、生热作用、FOXO和AMPK信号通路,表明MSTN基因可能通过以上信号通路参与湖羊生长发育调控.[结论]MSTN基因编辑湖羊可能通过FOXO和AMPK、氧化磷酸化、果糖和甘露糖代谢、生热作用等与动物代谢相关的信号通路调控其生长发育.
关键词： 湖羊 MSTN基因 CRISPR/Cas9 转录组测序
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包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的制备及佐剂活性
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：重组CTA1-DD蛋白具有与完整CT分子相当的全身性和黏膜佐剂功能,但在复杂的生理环境中易被酶或酸降解.本研究以同样具有佐剂活性的O-羧甲基壳聚糖(OCS)和硫酸葡聚糖(DS)为载体,通过离子交联形成纳米颗粒,将CTA1-DD蛋白嵌入其中,使其得到稳定保护.包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的粒径为50~150 nm,Zeta电位约-50 mV,质量浓度1.0 mg/ml的CTA1-DD蛋白投入制备的包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒载药率 25.33%,包封率 86.56%.体外模拟释放试验结果显示CTA1-DD蛋白可在 7d内缓慢释放.将CTA1-DD蛋白与PRV灭活抗原混合后,接种至小鼠鼻腔,结果表明,包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒能够同时诱导更高的血清IgG抗体和黏膜IgA抗体表达,证明了其作为黏膜佐剂的高效性.
关键词： CTA1-DD蛋白 O-羧甲基壳聚糖 硫酸葡聚糖 纳米颗粒 佐剂活性
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基于BSA-seq的一个苗期黄化转绿突变体基因定位
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：叶片是植物进行光合作用的重要场所，叶色突变往往制约水稻具有充足的源，研究叶色突变体对选育高光效品种以及进一步解析叶色调控的分子机制均具有重要意义。以育种中间材料苗期叶片黄化转绿突变体gry为对象，对其进行主要农艺性状分析，并对其突变性状进行遗传分析、基因定位。结果显示，该突变体3叶期前植株呈淡黄色至白色，4叶期变绿，除成熟期株高显著高于野生型以外，其他主要农艺性状均无显著差异。通过遗传分析确定该突变体的黄化转绿表型受隐性单基因控制。利用gry突变体与野生型的F2群体构建混池，通过BSA-seq的ΔSNP-index和ED 2种算法进行基因定位，结果显示gry基因被定位在22.23～26.77 Mb区间内。在该区间内开发KASP标记对62个F2黄化转绿单株进行验证与连锁分析，验证gry基因在21.18～25.30 Mb区间内。基于定位区间，结合基因注释数据库与水稻基因变异数据库推测候选基因为LOC＿Os03g40020,测序表明该基因在第1 768位发生单碱基T缺失，导致编码的氨基酸大量改变而产生功能变化。
关键词： 苗期黄化转绿突变体 BSA-seq ΔSNP-index算法 ED算法
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