科研产出
猕猴桃溃疡病菌Ⅲ型效应蛋白HopAH1的三维结构与生化功能分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：猕猴桃溃疡病危害严重，影响猕猴桃的产量。对猕猴桃溃疡病菌14个保守的Ⅲ型效应蛋白进行了功能域预测分析，发现HopAH1属于糖基水解酶超级家族。搜索同源蛋白并结合进化树分析发现，HopAH1与丁香假单胞菌番茄致病变种的效应蛋白亲缘关系较近，而与其他同源蛋白的亲缘关系相对较远。Alpha Fold2预测三维结构发现，HopAH1具有糖基水解酶GH5家族典型的桶状结构。酶活性测定试验发现HopAH1不能水解槐树豆胶、羧甲纤维素钠以及对硝基苯基-β-D半乳糖苷等3种底物，推测可能存在其他特异性底物。使用农杆菌介导的蛋白瞬时表达体系在本氏烟中表达HopAH1,发现不能引起烟草细胞坏死。研究结果将为HopAH1的作用机制研究提供参考。
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黑水虻养殖虫料分离方法及设备的研究进展
《黑龙江畜牧兽医 》 2024 北大核心
摘要：黑水虻(Hermetia illucens L.)是一种资源昆虫，其幼虫可将有机废弃物转化成高价值饲料蛋白，常被用于处理畜禽粪便、厨余垃圾等，同时也可杀灭废弃物中的致病菌，阻止其在食物链中传播，黑水虻这些特性为有机废弃物高效无害化处理和高值资源化转化提供了新方向。目前，在黑水虻幼虫和养殖基料分离方面存在分离效率低、成本高、缺少自动化分离设备等问题，严重制约了黑水虻养殖产业的发展。笔者对目前国内外有关黑水虻虫粪分离方法(包括光照分离法、氧气分离法、饵料诱捕法、加热分离法、风机筛分法、机械振动筛分法、离心力筛分法、人工筛分法)及分离设备在实际生产中的应用现状进行了综述，探讨和分析了黑水虻幼虫分离收集过程中面临的主要问题、分离意义及未来研究方向，以期为我国大规模黑水虻养殖中的分离收集工艺技术改进和设备研制提供参考。
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不同粒径条件下菜粕堆肥茶养分释放效率研究
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：以菜粕为试验材料，采用菜粕粉碎、菜粕发酵、菜粕先发酵后粉碎、菜粕先粉碎后发酵及菜粕先粉碎后发酵再粉碎5种工艺方法，通过粗粉碎、细粉碎、超细粉碎、超微粉碎的方法，制备成微米粉体、亚微米粉体样品，测定不同处理的样品理化性状，比较菜粕堆肥茶不同制备工艺的养分释放效率。结果表明，菜粕和发酵菜粕在不同粒径处理条件下，随着粒径的变小，养分释放效率显著增加；同等粒径条件下，发酵菜粕养分释放效率显著大于未发酵菜粕；菜粕先发酵再粉碎制备成不同粒径处理，养分释放效率以FC6处理最高；FC6处理养分释放效率优于先粉碎后发酵工艺处理的FC7和FC8处理，也优于先粉碎后发酵再粉碎至亚微米粒径的FC9处理。因此，菜粕堆肥茶5种提取工艺释放效率高低依次为：菜粕先发酵后粉碎>菜粕先粉碎后发酵再粉碎>菜粕先粉碎后发酵>菜粕发酵>菜粕粉碎；菜粕先发酵后粉碎工艺处理中，粉碎至亚微米粒径时养分释放效率高于微米粒径，为最佳处理。
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枯草芽孢杆菌4种环脂肽抗猪δ冠状病毒的研究
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：为探究从枯草芽孢杆菌Bs 916中提取的表面活性素、罗克霉素、泛革素及杆菌霉素L 4种抗菌肽对猪δ冠状病毒(PDCoV)的抗病毒作用.首先采用CCK-8法确定抗菌肽对细胞无毒性的最佳浓度范围,随后分别采用RT-qPCR、Western blot及IFA 3种方法检测Bs 916中4种环脂肽对PDCoV的抗病毒效果.结果显示,4种环脂肽在浓度≤50 μg/mL时对细胞无毒性,同时具有良好的抗病毒效果.相同条件下,罗克霉素抗病毒效果最佳,其次为表面活性素.本研究从枯草芽孢杆菌Bs 916中提取的表面活性素、罗克霉素、泛革素及杆菌霉素L可抑制PDCoV在细胞中的增殖,具有良好的抗病毒作用,其中以罗克霉素和表面活性素的抗病毒效果最佳,可为抗PDCoV药物研发提供理论支持.
关键词： 表面活性素 罗克霉素 泛革素 杆菌霉素L 猪δ冠状病毒
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钢渣混合基质对大花绣球扦插生根的影响
《应用生态学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为研究钢渣混合基质对大花绣球扦插生根的影响，创制可部分替代常规扦插基质、实现固体废弃物高效利用的新型基质，本试验以常规扦插基质（泥炭+珍珠岩）为对照（CK）,研究在其中添加体积分数为10%（T1）、20%（T2）、30%（T3）和40%（T4）钢渣的条件下，混合基质的理化性质及其对大花绣球‘红粉佳人’生根的影响。结果表明：钢渣混合基质的pH值、电导率和容重均显著高于CK,T2处理通气孔隙度高于其他处理，但总孔隙度和持水孔隙度无显著差异；扦插苗地上部分生长表现为：各处理鲜重和干重均大于CK,茎粗除T4处理外均大于CK,株高除T4处理外与CK相比无显著差异，叶片叶绿素含量均显著低于CK;扦插苗根系生长表现为：根长为T2>CK>T1>T3>T4,根表面积和根体积均为T2>T1>CK>T4>T3,根尖数为T2>CK>T1>T4>T3,各处理平均根直径和根系活力均显著高于CK,且以T2处理最高；扦插苗叶片可溶性糖含量为T2>T4>T3>CK>T1。根系生长发育指标权重排序为：根系活力>平均根直径>根体积>根表面积>根尖数>根长；冗余分析发现，基质pH值、电导率、通气孔隙度和持水孔隙度是影响插穗根系生长发育的关键因子。综上，添加体积分数为10%～40%钢渣的混合基质均能够用于大花绣球扦插育苗，其中以20%（T2）的效果最好，可显著改善插穗成活率、生长状况和根系发育。本研究证实了钢渣作为花卉新型育苗基质部分替代泥炭、珍珠岩等常规不可再生基质的可行性，既可降低农业生产成本，又能实现工业固废的高值化利用。
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辣椒CaSYT1的鉴定及其在疫霉侵染过程中的功能初探
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确辣椒(Capsicum annuum)编码突触囊泡结合蛋白(Synaptotagmin,SYT)基因CaSYT1在辣椒应答疫霉侵染中可能发挥的作用,通过蛋白保守结构预测、亚细胞定位、疫霉及植物生长调节剂处理、瞬时表达、基因沉默等方法对CaSYT1的表达和功能进行了初步研究.结果表明:CaSYT1含有1个跨膜螺旋结构域和2个C2结构域,定位在细胞膜;CaSYT1的转录水平受疫霉侵染以及外源SA的诱导,且在疫霉侵染以及外源SA处理下CaSYT1启动子活性被激活并驱动了下游基因的转录表达;CaSYT1的瞬时表达能够诱发辣椒叶片内H2O2的大量积累,触发了明显的过敏性细胞坏死;CaSYT1沉默增强了辣椒应答疫霉侵染的抗病性,且伴随着CaPR1、NPR1、CoDEF1抗病相关基因的上调表达,暗示CaSY1在辣椒应答疫霉侵染中起负调节作用,而其瞬时表达却能触发H2O2的积累和过敏性细胞坏死,表明CaSYT1以不依赖于细胞坏死和H2O2积累的方式在辣椒应答疫霉侵染中起着负调节作用.
关键词： 辣椒 CaSYT1 疫霉 基因鉴定 信号通路 表达分析
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生物发酵饲料对蛋鸡生产性能、蛋品质及肠道微生物菌群的影响
《饲料工业 》 2024 北大核心
摘要：试验旨在研究生物发酵饲料对蛋鸡生产性能、蛋品质及肠道微生物菌群的影响.选取产蛋率与平均蛋重相近的43周龄健康蛋鸡18 000只,随机分为2组,每组6个重复,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加5%的生物发酵饲料,试验期60 d.结果如下:①与对照组相比,试验组产蛋率升高,料蛋比、破蛋率及死淘率均有所降低.②第60天,试验组平均蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色、蛋壳重和蛋黄重均极显著高于对照组(P<0.01),蛋壳厚度显著高于对照组(P<0.05).③与对照组相比,试验组的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),免疫球蛋白G(IgG)含量极显著升高(P<0.01).④与对照组相比,试验组蛋鸡肠道厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度减少,肠道厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)值升高,且群落多样性升高.由此可见,饲粮中添加生物发酵饲料能提高蛋鸡的生产性能,提高蛋品质,增强蛋鸡的抗氧化能力及免疫力,改善蛋鸡的肠道微生物菌群.因此,利用生物发酵饲料对改善蛋鸡生产性能及肠道健康具有重要意义,文章可为生物发酵饲料在蛋鸡饲粮中的推广应用提供参考.
关键词： 生物发酵饲料 蛋鸡 生产性能 蛋品质 肠道微生物菌群
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鹅VDR基因克隆及其多克隆抗体制备与鉴定
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】维生素D3（vitamin D3,VD3）是一类重要的类固醇激素，参与调控动物体内多种生理活动，具有生物活性的VD3代谢物1,25（OH）2D3通过与维生素D受体（vitamin D receptor, VDR）结合发挥生物学功能。试验旨在克隆鹅VDR基因CDS序列并制备鹅VDR多克隆抗体，为后续开展VDR介导VD3调控鹅体内多种生理活动的分子机制研究提供基础支撑。【方法】通过基因克隆方法获得鹅VDR基因CDS序列，并采用生物信息学方法对其编码蛋白进行结构和功能预测分析。通过基因合成和亚克隆方法构建鹅VDR基因重组表达质粒，转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达和镍柱纯化后获得鹅VDR重组蛋白。以纯化的鹅VDR重组蛋白作为免疫原，制备兔抗鹅VDR多克隆抗体，采用间接ELISA法检测抗体效价，采用Western blotting检测抗体特异性。【结果】试验成功克隆了鹅VDR基因编码区序列，长度为1 356 bp,编码451个氨基酸残基。该编码蛋白与鸡VDR蛋白的相似性高达91.4%,无信号肽和跨膜结构域，N-端含有核定位序列，且含有DNA结合域和配体结合域2个保守结构域，属于类固醇/甲状腺激素受体超家族成员。试验成功构建了pET-30a（+）-VDR重组质粒，并诱导表达鹅VDR重组蛋白。纯化后的重组蛋白纯度高达90%以上，且大小符合预期（52 ku）。试验制备了兔抗鹅VDR多克隆抗体，其抗体效价＞1∶1 093 500;除肝脏组织外，该多克隆抗体在产蛋鹅肾脏、十二指肠、空肠和回肠组织中均能够识别天然VDR蛋白的2种亚型。【结论】试验成功克隆了鹅VDR基因CDS序列，并制备了兔抗鹅VDR多克隆抗体，该多克隆抗体特异性高，可用于后续鹅体内VDR介导的生物学功能研究。
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设施猪场悬挂式轨道巡检机器人设计与试验
《中国农机化学报 》 2024 北大核心
摘要：为解决猪场传统巡检方式成本高、效率差、智能化水平低等问题，以中小型规模设施猪场结构特点为依据，提出基于悬挂轨道的巡检方案，设计一种悬挂式智能巡检机器人，开发适用于典型猪场环境的巡检机器人运动控制系统和上位机软件，并进行现场测试。结果表明：设置实现巡检机器人常态巡检速度可大于0.15 m/s，单次运动定位误差小于2.5 mm，巡检定位误差整体小于10 mm，误差率小于0.18%，巡检机器人可进行环境数据和图像自动获取，为后续的生猪健康状况分析提供数据支撑。该研究可为巡检机器人在中小规模生猪养殖场的应用与推广提供参考。
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江苏淮北地区小麦穗发芽抗性鉴定及其等位基因检测
《麦类作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了解江苏淮北地区小麦品种穗发芽抗性以及相关基因的分布，以该地区近20年通过审定的44份小麦品种作为材料，采用整穗发芽和籽粒发芽两种方法鉴定其穗发芽抗性；利用分子标记对主要穗发芽抗性相关基因TaVp-1B、TaMFT-3A、TaMKK3-A、TaPM19-A1、Tamyb10-D1和TaDFR-B进行检测，并结合其表型分析不同抗性基因的效应。结果显示，44份品种的SGR（整穗发芽率）均值为52.5%,变化范围为10.5%～88.8%;GI（发芽指数）均值为53.9%,变化范围为12.4%～96.7%;有7份品种的SGR和GI值达到了中抗水平，可以作为抗穗发芽种质资源；未发现高抗品种。在6个与穗发芽抗性相关的基因中，TaDFR-Bb分布频率最高，达到95.5%,其余基因依次为TaMFT-3Aa（68.2%）、TaVp-1Bc（50.0%）、TaMKK3-Ac（25.0%）、TaPM19-A1a（13.6%）、Tamyb10-D1b（0）。与表型结合分析发现，只有TaMFT-3Aa和TaMKK3-Ac与穗发芽抗性显著相关，TaVp-1Bc和TaPM19-A1a与表型相关性不显著。因此，在抗穗发芽育种过程中，可以结合分子标记对TaMFT-3Aa和TaMKK3-Ac基因进行筛选并加以利用。
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