科研产出
ppgA基因在冠突曲霉有性产孢中的功能分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:为研究信息素前体基因ppgA在冠突曲霉(Aspergillus cristatus)有性产孢中的功能,本研究利用同源重组原理对冠突曲霉高效基因敲除菌株ΔKu70中ppgA基因进行敲除。形态学观察发现,在MYA培养基中,ppgA基因敲除株前期生长较ΔKu70菌株快。培养6 d后,敲除株形成较厚的菌落,浅黄色。此外,敲除株菌落中产生褐色色素的时间较晚,且明显减少。在1 mol/L NaCl条件下,敲除株仅菌落中央形成稀疏成熟闭囊壳,闭囊壳数量减少约15倍,子囊孢子成熟期延长;敲除株菌落边缘闭囊壳不成熟,无子囊孢子产生。在3 mol/L NaCl条件下,敲除株菌落白色,生长缓慢。这些结果表明,ppgA基因在冠突曲霉的有性产孢过程中发挥重要作用,该研究为进一步探讨冠突曲霉有性产孢机制的研究提供了理论参考和数据支持。


紫苏粕替代鱼粉对杂交鲟体型特征及生长性能的影响
《贵州农业科学 》 2021 北大核心
摘要:【目的】探明不同比例紫苏粕替代鱼粉对杂交鲟体型特征及生长性能的影响,为高性价比鲟鱼配合饲料的研发与应用提供参考依据。【方法】供试鱼为杂交鲟,先在试验养殖环境暂养1周,研究基础饲料中不添加紫苏粕(CK)、紫苏粕替代秘鲁鱼粉的40%(D1)、紫苏粕替代秘鲁鱼粉的60%(D2)、紫苏粕替代秘鲁鱼粉的80%(D3)和紫苏粕替代秘鲁鱼粉的100%(D4)对其体型特征及生长性能的影响。【结果】D1、D2、D3、D4和CK杂交鲟的头高、体长和叉长分别为5.87 cm、5.74 cm、5.19 cm、4.51 cm、4.51 cm, 58.26 cm、54.76 cm、49.77 cm、46.32 cm、47.32 cm, 61.09 cm、57.54 cm、52.11 cm、49.29 cm、50.29 cm, D1显著高于D4和CK,D4叉长显著低于CK;D1鲟鱼的增重率和日特定生长率分别为41.10%和0.86%,显著高于CK(28.91%和0.63%),随着替代比例的增大,2项指标呈下降趋势,D4鲟鱼增重率和日特定生长率分别为15.04%和0.35%,均显著低于CK;D1杂交鲟的肝体比和脏体比分别为2.87%和13.48%,均低于CK(3.18%和14.74%),其中脏体比较CK差异显著;D4脏体比(16.13%)显著高于CK;经对鱼体特定生长率折线回归分析,紫苏粕替代鱼粉的最适添加比例为50.43%。【结论】随着紫苏粕替代秘鲁鱼粉比例的增大,鲟鱼生长呈下降趋势,紫苏粕替代鱼粉的适宜添加比例对鲟鱼生长具有显著的促进作用,最适添加比例为50.43%。


不同有机物料对菌-菜轮作土壤质量的影响
《北方园艺 》 2021 北大核心
摘要:以玉米芯和稻谷壳为试材,设置稻谷壳(G)、玉米芯(Y)以及稻谷壳+玉米芯(GY)的混合有机物料3个处理,研究不同有机物料处理对菌-菜轮作土壤养分、粒径分布及酶活的影响,以期为农业资源高效利用改良土壤质量提供参考依据。结果表明:添加不同有机物料可显著提高土壤养分,其中全氮(TN)、全磷(TP)、有效氮(AN)、有效钾(AK)、有机质含量分别高出对照16.87%~45.23%、30.95%~44.76%、29.41%~33.33%、35.14%~63.64%、22.61%~53.87%,全钾(TK)与比重无显著变化。根据土壤粒径分级,该研究检测出粒径范围在0~200μm, G+Y处理后粘粒含量显著提高;G、Y处理粘粒、粗粘粒、细粉粒含量显著降低,且占比较大,粗粉粒、细粒砂、粗粒砂含量显著提高。各处理均能显著提高土壤脲酶活性,G、G+Y处理使蔗糖酶活性降低,G+Y处理使酸性磷酸酶活性降低,过氧化氢酶影响较小,处理间无显著变化。TN、TP、AN、AK、有机质、脲酶之间存在显著或极显著正相关关系,TN与TP、AK、有机质、脲酶呈极显著正相关,与AN呈显著相关。TP与AN呈极显著正相关,与有机质呈显著正相关,与过氧化氢酶呈显著负相关。AN表现出与AK、有机质、脲酶显著相关。AK与有机制和脲酶呈极显著相关。有机质与脲酶呈极显著相关。不同有机物料可显著提高土壤养分,增强土壤酶活性,综合来看单一有机物料提高土壤养分和酶活要优于混合物料,但混合物料较单一物料对土壤团聚结构影响更大。


贵州火龙果溃疡病病原菌鉴定及生物学特性
《贵州农业科学 》 2021 北大核心
摘要:【目的】对贵州省火龙果溃疡病的病原进行鉴定及生物学特性研究,为贵州火龙果溃疡病的防治及病原菌的碳氮源代谢研究奠定理论基础。【方法】采用组织分离法、形态学观察以及分子生物学等方法对贵州火龙果溃疡病病原进行分离鉴定,并采用菌丝生长速率法及Biolog表型芯片技术研究病原菌生物学特性。【结果】贵州火龙果溃疡病病菌为新暗色柱节孢(Neoscytalidium dimidiatum);病原菌适宜生长温度为20~35℃,最佳生长温度为28℃,最适pH为6~7;光照对菌丝生长有抑制作用,短时间的紫外光照射对病原菌生长有促进作用。火龙果溃疡病菌对PMl、PM2微孔板中190种碳源物质利用率为18.42%,对PM3微孔板中95种氮源物质的利用率为52.63%。【结论】贵州火龙果溃疡病病菌为新暗色柱节孢(Neoscytalidium dimidiatum),病原菌较耐高温,生长环境偏酸性。
关键词: 火龙果溃疡病 病原菌鉴定 新暗色柱节孢 生物学特性 贵州


5种土壤处理除草剂对半夏田杂草防除效果
《农药 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:[目的]草害是制约贵州半夏产业发展的重要因素之一。生产上主要依靠人工除草方式,其除草成本高;化学除草是降低半夏田除草成本的有效措施,但生产上供选择的除草剂品种单一;试验旨在提供更多除草剂品种供半夏田选择应用。[方法]选用5种土壤处理除草剂,按照随机区组设计进行田间药效试验,在半夏播后苗前进行土壤喷雾处理。[结果]50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC 1500 g a.i./hm2处理、68.8%嗪草酮·乙草胺EC1543.5 g a.i./hm2处理对半夏田杂草防除效果最好,药后30、45 d对杂草群体总株防效、总鲜重防效均在92%以上,但50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC易产生药害,不宜使用;其次为960 g/L精异丙甲草胺EC864 g a.i./hm2处理、240 g/L乙氧氟草醚EC 180 g a.i./hm2处理,总株防效、总鲜重防效在69%以上;450 g/L二甲戊灵CS 742.5 g a.i./hm2处理虽药后30 d对杂草群体总防效较好,但45 d防效较差。[结论]除50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC外,其余4种除草剂均可在半夏田应用。但各除草剂对不同杂草种类防效存在一定差异,应根据半夏田杂草发生情况合理选择,科学用药,保障半夏产品质量安全。


调控牛CEBPA基因表达的miRNA筛选及对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响
《畜牧兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:旨在筛选并验证调控牛增强子结合蛋白A(CCAAT/enhancer binding protein alpha,CEBPA)表达的miRNA及其对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响。本研究综合运用多个在线软件筛选与CEBPA基因具有潜在调控关系的miRNA,运用qRT-PCR技术检测CEBPA基因在关岭牛各类组织中的表达水平;构建CEBPA-3′UTR-WT和CEBPA-3′UTR-MUT双荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告系统验证候选miRNA与CEBPA基因的结合关系;分离培养关岭牛肌内前体脂肪细胞,利用qRT-PCR、Western blot、油红O染色和CCK-8探究调控CEBPA的miRNA对牛肌内前体脂肪细胞分化与增殖的影响。生物信息学分析发现,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a、bta-miR-181b、bta-miR-181c、bta-miR-181d与CEBPA基因具有潜在结合关系;qRT-PCR结果表明,CEBPA基因在关岭牛内脏组织、肌肉组织、脂肪、下丘脑以及部分生殖器官中均有表达,在2岁牛背最长肌的表达量极显著高于1日龄犊牛(P<0.01);双荧光素酶报告系统结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能直接结合牛CEBPA基因3′UTR;细胞试验结果表明,CEBPA基因在牛肌内前体脂肪细胞分化中的表达水平随时间逐渐升高,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a在分化0 d表达水平极显著高于其他时期(P<0.01),整个分化时期bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a与CEBPA基因表达趋势相反;过表达miR-23a、miR-23b-3p、miR-181a均能极显著降低CEBPA基因mRNA和蛋白表达量(P<0.01),并降低牛肌内前体脂肪细胞中脂滴含量;bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性促进细胞增殖。结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性的促进牛肌内前体脂肪细胞增殖,并通过直接负调控CEBPA的表达来间接影响该细胞分化。
关键词: CEBPA miRNA 肌内前体脂肪细胞 细胞分化


黔中金荞麦的栽培和生产利用技术
《贵州畜牧兽医 》 2021
摘要:文章结合生产实践,介绍了黔中金荞麦的栽培和利用技术,包括:适宜区域、选地、整地、播种、水肥管理、病害防控、草产品加工等,为畜禽青绿饲草料生产提供参考。


鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:为建立鸭NF-κB1(nuclear factor-kappa B, NF-κB)基因的荧光定量PCR检测方法,并以建立的方法检测鸭胚成纤维细胞(duck embryo fibroblasts, DEF)在感染鸭肠炎病毒(DEV)后NF-κB1基因随时间变化转录表达量的变化情况。根据GenBank上NF-κB1基因保守序列设计特异性引物,以鸭胚成纤维细胞mRNA提取样本反转录为cDNA,进行NF-κB1基因克隆质粒构建,以此为模板建立鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法并进行特异性、重复性和敏感性试验,并利用建立的方法DEF感染DEV后NF-κB1基因随时间变化的转录变化进行检测。结果显示:建立的鸭NF-κB1基因荧光定量PCR方法标准曲线呈现典型的S型,方程为y=-3.12x+44.086(R2=1),扩增效率为109.2%;其熔解温度Tm值为(83.5±0)℃,曲线呈特异性单峰,批内变异系数小于0.3%,批间变异系数小于0.2%;检测灵敏度可达到1.79个拷贝。DEF细胞在感染DEV后NF-κB1基因随时间改变转录水平变化无规律,但整体表达水平高于正常细胞,差异显著(P<0.05),36~84 h NF-κB1基因的转录水平与正常细胞中差异极显著(P<0.01)。本研究成功建立了鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法,并对DEF细胞感染DEV后NF-κB1基因的转录水平进行了研究,为后续实验研究提供了技术和数据支撑。

