科研产出
花生紫色酸性磷酸酶基因家族的鉴定及表达分析
《中国油料作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAP)是一类金属磷酸酯酶,参与植物的磷素利用、碳代谢、细胞壁合成等多种生理功能,尤其是对磷缺乏的适应.本研究利用生物信息学手段在花生(Arachis hypogaea L.)全基因组水平上对PAP基因家族进行了鉴定,并对其系统进化关系、保守结构域、基因结构以及它们在22个组织中的表达模式进行了分析.结果表明:花生基因组中有39个AhPAP基因,氨基酸序列长度为205~905,等电点大多数都小于7,蛋白质C端均含有金属磷酸酶结构域.以花生、拟南芥、水稻、苜蓿共74个PAP蛋白构建的系统发育树可分为四组,每组中都含有来自不同物种的PAP,并没有因为物种差异而各自聚为一类.AhPAP基因家族中部分成员的表达具有组织特异性,arahy.P03NME、arahy.DAPS6C在根瘤中表达量最高,而它们在其他组织中表达量较低或未检测到表达.本研究为揭示AhPAP基因家族在花生中的生物学功能奠定了基础.
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国内外穿心莲研究态势分析
《中国农学通报 》 2022 CSCD
摘要：为了解穿心莲(Andrographis paniculata)的研究现状和学科发展,通过科学网(Web of Science,WoS)核心合集搜索2001-2020年发表的穿心莲SCI学术论文,结合文献计量学描述性和关联性指标,明确穿心莲近20年的科研态势.结果表明:(1)2019-2020年穿心莲的年发文量突破100篇,多数以穿心莲内酯的抑癌功能为核心展开.(2)虽然发文量最多的国家是印度、中国和马来西亚,但中国与美国和澳大利亚的合著关系最近.结合发文量、H指数与论文年均被引数,美国仅凭中国发文量1/5的产出就达到与中国持平的国际影响力,成果受到高度重视,中国穿心莲论文质量仍需提高.(3)印度科学工业研究理事会(CSIR)和新加坡国立大学是被引频次最高的穿心莲科研机构.台湾中华医科大学、中国科学院、上海中医药大学和中山医学大学是中国主要的穿心莲科研机构.(4)穿心莲发文量前3名作者均来自中国.(5)新加坡国立大学Wong W S F团队于2009年发表穿心莲至今为止影响因子最高(21.4)的学术论文,阐明穿心莲内酯缓解哮喘的分子机制."天然抗生素"穿心莲内酯抑制新型冠状病毒蛋白活性的功能公开引起国际学者的高度重视,关于穿心莲药理药效和高产稳产等基础研究将更加深入.
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鸭疫里默氏杆菌RIA_0940基因缺失株的构建及主要生物学特性测定
《中国畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要：[目的]通过构建鸭疫里默氏杆菌RIA_0940基因缺失株并测定其生物学特性,探讨RIA_0940基因的潜在功能.[方法]以鸭疫里默氏杆菌RA-GD株为亲本株,扩增其左右同源臂及红霉素抗性基因(ermR)盒片段,构建左同源臂-ermR抗性基因盒-右同源臂融合片段,通过自然转化的方法缺失RA-GD株RIA_0940基因,并利用PCR筛选、鉴定RA-GDΔRIA_0940基因缺失株.分别对亲本株RA-GD和缺失株RA-GDΔRIA_0940的生长特性、对雏鸭的半数致死量、感染鸭血液和组织载菌量及对Vero细胞的黏附和入侵性能进行比较分析.[结果]试验成功构建了 RA-GD株的RIA_0940基因缺失株(RA-GDΔRIA_0940);生物学特性检测结果显示,RA-GDΔRIA_0940株体外生长能力较亲本株低,基因缺失株在生长后期生长受到显著或极显著抑制(P<0.05;P<0.01);RA-GDΔRIA_0940株对雏鸭的半数致死量是亲本株的114倍;与亲本株相比,缺失株感染鸭血液和组织的载菌量显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01);缺失株对Vero细胞的黏附和入侵性能均极显著低于亲本株(P<0.01).[结论]本试验成功构建RA-GD株RIA_0940基因缺失株,该缺失株在体外培养条件下生长能力较亲本株低,对雏鸭的致病力、感染鸭血液和组织载菌量及对Vero细胞的黏附和入侵性能均显著或极显著低于亲本株.本试验结果为深入研究鸭疫里默氏杆菌的分子致病机理和研制基因工程疫苗奠定了基础.
关键词： 鸭疫里默氏杆菌 RIA_0940基因 基因缺失 生物学特性 毒力因子
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空间导向的财政政策是否促进了共同富裕-基于振兴粤东西北决定的准自然实验
《广东经济 》 2022
摘要：为准确评估财政政策在缩小区域间经济发展差距的作用,本研究使用粤东西北区县2013-2017年的面板数据,将年末总人口作为工具变量,研究财政转移支付和GDP之间的关系.结果发现,2013年之后粤东西北区县财政转移支付虽然显著提升各区县GDP总量,却降低了区县人均GDP.以珠三角与粤东西北分界线两边各区县为样本,研究发现粤东西北区县从2008年以来,一直都得到更多总量和人均的财政转移支付.因此,对于欠发达地区而言,最佳的赶超路径是充分发挥财政政策在强化比较优势上的作用,加强专业化分工,实现与发达地区在"人均"意义上差距的缩小.
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番木瓜WRKY转录因子家族基因鉴定及其响应短孢炭疽菌侵染的表达分析
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]在全基因组水平鉴定番木瓜（Carica papaya L.） WRKY（CpWRKY）转录因子家族基因,并对其在短孢炭疽菌侵染下的表达量进行分析,为CpWRKYs家族的功能研究和利用奠定基础。[方法]采用生物信息学方法,鉴定和筛选CpWRKYs转录因子家族基因成员,并对其进行系统进化分析、基因结构分析、蛋白保守基序预测和启动子顺式作用元件分析;同时以番木瓜炭疽病耐性品种和敏感性品种为材料,利用短孢炭疽菌侵染采后果实,于0,24,48 h取样,对其转录组学数据进行分析,筛选2个品种中差异表达的CpWRKY基因,并利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）试验对筛选结果进行验证。[结果]经系统分析从番木瓜中共鉴定出48个CpWRKYs成员,分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3类;其中第Ⅱ类成员最多,可分为Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd和Ⅱe5个亚类。CpWRKYs家族成员的氨基酸残基数目为97～747个,等电点为4.83～9.71,为亲水性蛋白,大部分CpWRKYs的结构域高度保守,但有个别蛋白保守域缺失。在CpWRKYs家族中共预测到10个保守基序,其中包括含有WRKY七肽结构域的基序1、含锌指结构的基序2和同时含有七肽序列和锌指结构的基序3,其中基序3为大多数I类CpWRKY转录因子N端WRKY结构域所特有。Cp WRKYs含有1～6个外显子,同一家族或亚家族成员在基因结构上表现出一定的相似性,同时在Cp WRKYs启动子中检测到大量与生物胁迫和非生物胁迫相关的元件。对短孢炭疽菌侵染番木瓜的转录组数据进行分析,在番木瓜耐性品种中筛选出了特异表达的CpWRKY22、CpWRKY11、Cp WRKY2、CpWRKY33和CpWRKY25,RT-qPCR检测结果显示,这些基因在耐性品种中特异上调表达,在敏感性品种中的表达量无明显变化。[结论]番木瓜WRKY家族共包括48个成员,该家族基因结构和蛋白基序具有组间差异性和组内保守性。CpWRKYs家族成员强烈响应炭疽菌侵染,其中CpWRKY22、CpWRKY11、CpWRKY2、CpWRKY33和CpWRKY25是有潜力的抗炭疽病候选基因。
关键词： 番木瓜 WRKY家族 炭疽病 短孢炭疽菌 候选基因
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副猪嗜血杆菌外膜囊泡激活caspase-11和NLRP3炎性体诱导炎性细胞因子IL-1β和IL-18分泌
《微生物学通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【背景】副猪嗜血杆菌可引起多种炎性反应和较高死亡率，其致炎机制目前尚不清楚。【目的】探究副猪嗜血杆菌外膜囊泡（outermembranevesicles,OMVs）诱导RAW264.7细胞caspase-11及NLRP3炎性体活化的功能，以及caspase-11在OMVs活化炎性体诱导炎性因子表达过程中的关键作用。【方法】副猪嗜血杆菌OMVs感染RAW264.7细胞，收集6、12和24 h细胞，RT-PCR检测caspase-11、NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA的表达；收集感染后48 h细胞，Western blotting检测caspase-11、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达。收集感染后6、12、24、48和72 h细胞上清，ELISA检测interleukin （IL）-1β和IL-18表达水平；不同浓度OMVs （0、2.5、10、25、50和100μg/mL）感染RAW264.7细胞24 h,ELISA检测上清中IL-1β和IL-18水平。构建caspase-11沉默RAW264.7细胞株，收集OMVs感染后12、24和48 h细胞培养上清检测IL-1β和IL-18水平。【结果】Caspase-11mRNA转录水平在OMVs感染6、12和24h均极显著高于对照组（P＜0.01）;NLRP3 mRNA转录水平在感染后6、24 h极显著高于对照组（P＜0.01）;ASC mRNA转录水平在感染后12、24 h显著低于对照组（P＜0.05）;caspase-1 mRNA转录水平在感染后6、12和24 h显著高于对照组（P＜0.05）。Westernblotting结果显示，与空白对照组相比，OMVs组caspase-11、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达均明显升高。OMVs感染RAW264.7细胞后12、24、48和72 h,IL-1β表达量极显著高于对照组（P＜0.01），而且呈现时间依赖性升高，IL-18表达水平在感染后6、12、24、48和72 h显著高于对照组（P＜0.05）；不同浓度OMVs感染细胞时，OMVs对细胞的致炎作用呈现剂量依赖性增强。Caspase-11沉默后，IL-1β水平在感染后12、24和48h显著低于未沉默组；Caspase-11沉默组IL-18表达量在感染后24、48h均显著低于未沉默组（P＜0.05）。【结论】副猪嗜血杆菌OMVs在副猪嗜血杆菌诱导的炎症反应中发挥重要作用，OMVs可诱导RAW264.7细胞caspase-11介导的非经典NLRP3炎性体信号通路活化。
关键词： 副猪嗜血杆菌 外膜囊泡 caspase-11 NLRP3炎性体 IL-1β IL-18
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不同冲泡条件对柑普茶品质的影响
《农产品质量与安全 》 2022
摘要：为明确和规范柑普茶的科学审评条件,本文采用分析化学手段与感官审评方法,研究了不同茶柑质量比、茶水比、冲泡次数等冲泡条件下,柑普茶水浸出物及其主要生化成分(游离氨基酸、可溶性糖、茶多酚、咖啡碱)的动态变化,结合感官审评进行综合判定.结果表明,随着茶柑质量比的增加,游离氨基酸浸出量呈下降趋势,可溶性糖、茶多酚、咖啡碱浸出量呈增加趋势,其中除可溶性糖外,其他成分浸出量差异显著;随着茶水比的增加,水浸出物、游离氨基酸、可溶性糖、茶多酚、咖啡碱浸出量均呈显著增加的趋势;在3次冲泡法中,随着冲泡次数的增加,茶汤中游离氨基酸和咖啡碱含量呈显著下降的趋势,可溶性糖和茶多酚含量呈先增加后下降的趋势.本文研究范围内,柑普茶在茶柑质量比(W∶W)为4∶1、茶水比(W∶V)为1∶50、冲泡采用2次冲泡法(第1泡2min,第2泡5 min)的条件下,所得茶汤的汤色、香气、滋味协调性最佳,具体表现为滋味醇厚、茶与柑的融合度好,可充分展示出柑普茶的风味品质.
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酶解预处理工艺在烟叶茄尼醇提取中的应用
《中国烟草科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为提高烟叶中茄尼醇的提取率,通过纤维素酶-半纤维素酶联用的方法对烟叶进行预处理,研究了酶种类、添加量、温度、pH和反应时间对烟叶提取液中游离茄尼醇和总茄尼醇含量的影响,并以Box-Behnken响应面法优化酶解工艺.结果表明,在单因素试验中,最优工艺为纤维素酶-半纤维素酶联用(酶添加量为每克烟叶各1.00 U)、温度55℃、pH 5.2和反应时间60 min;与未经酶解预处理的空白组(CK)相比,纤维素酶-半纤维素酶联用处理后,游离和总茄尼醇提取率分别增加305.61%和113.55%,响应面法优化后,总茄尼醇提取率较CK提高158.78%.本研究探索出一种提高茄尼醇提取率的有效方法,对烟草综合利用具有指导意义.
关键词： 烟叶;茄尼醇;酶解;响应面法
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26~45日龄竹丝鸡饲粮粗蛋白质需要量研究
《中国畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要：[目的]研究饲粮粗蛋白质水平对26~45日龄竹丝公鸡生长性能、胴体性状和血清生化指标的影响,为此生长阶段粗蛋白质精准供给提供理论基础.[方法]1 625只26日龄竹丝肉公鸡根据体重一致原则分为5个处理组,每个处理组5个重复,每个重复65只鸡,各处理组饲粮粗蛋白质水平依次为18.5%、19.5%、20.5%、21.5%和22.5%,试验期20 d.每个重复于试验结束当天挑选接近平均体重的2只鸡屠宰,制备血清和分割屠体,测定胴体性状和血清生化指标.[结果]①饲粮粗蛋白质水平极显著影响肉鸡终末体重、平均日增重和料重比(P<0.01),随着粗蛋白质水平的升高,终末体重和平均日增重呈线性和二次曲线升高(P<0.01),料重比呈线性和二次曲线降低(P<0.01).饲粮粗蛋白质水平对肉鸡平均日采食量和成活率无显著影响(P>0.05).②饲粮粗蛋白质水平显著或极显著影响肉鸡屠宰率(P<0.01)、半净膛率(P<0.01)和全净膛率(P<0.05),但对胸肌率、腿肌率和腹脂率无显著影响(P>0.05),且屠宰率和半净膛率随粗蛋白质水平的升高呈线性和二次曲线降低(P<0.01或P<0.05).③饲粮粗蛋白质水平极显著影响肉鸡血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胆固醇(TC)含量(P<0.01),且TC含量随粗蛋白质水平的升高呈线性降低(P<0.05).饲粮粗蛋白质水平对肉鸡血清尿素氮(BUN)和甘油三酯(TG)含量无显著影响(P>0.05).[结论]饲粮21.5%粗蛋白质水平可改善肉鸡生长性能,19.5%~20.5%粗蛋白质水平可改善胴体性状,18.5%粗蛋白质水平可调节脂代谢.根据二次曲线模型估测,建议此生长阶段竹丝鸡饲粮粗蛋白质水平为21.41%~21.83%,可获得最佳生长性能.
关键词： 粗蛋白质水平 竹丝鸡 生长性能 胴体性状 血清生化指标
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百里香酚纳米复合诱导大豆蛋白自组装凝胶及机制
《现代食品科技 》 2022 北大核心
摘要：为了揭示百里香酚纳米复合诱导大豆蛋白自组装凝胶的途径及机制,该文研究了蛋白浓度、百里香酚添加量、反应初始pH值和反应终止pH值对大豆蛋白与百里香酚相互作用及其凝胶形成的影响.结果表明:四者协同调控大豆蛋白-百里香酚纳米复合物凝胶的形成,百里香酚荷载量的提高可降低大豆蛋白凝胶的临界蛋白浓度(75 mg/mL),反应结束后调节pH值至中性是凝胶形成的必要条件.在pH值为7.0条件下,百里香酚复合诱导大豆蛋白产生了明显的纤维化聚集,其颗粒平均粒径增加27.60%、光散射强度提高154.67%、Th T荧光强度提高93.78%,因此推测百里香酚复合主要通过诱导大豆蛋白纤维化聚集的产生继而诱导凝胶的形成.大豆蛋白-百里香酚纳米复合物凝胶在尿素和DTT溶液中的溶解度提高,因而推测维持凝胶网络的分子间相互作用力主要为氢键、疏水相互作用力和二硫键.研究结果为大豆蛋白冷致凝胶提供了新的技术解决方案,并为百里香酚的开发利用提供理论支撑.
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