科研产出
土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立
《食品与机械 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法.结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1︰12800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC 50)为32.92 ng/mL,检测限(LOD)为1.3 ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%~87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%.该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法.
全文链接
请求原文
移栽对黄瓜秧苗次生代谢物的影响
《河南农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：针对大田生产中黄瓜育苗移栽后易出现缓苗期的问题,以两叶一心期的黄瓜叶片作为研究对象,运用代谢组学的方法分析黄瓜在不移栽与移栽2种处理下叶片中的代谢物差异.结果表明,不移栽处理与移栽处理后1、3、5 d的样品代谢物没有显著分离,而7 d的样品代谢物却出现了明显的分离,这说明移栽后7 d开始出现缓苗期,确定了开展缓苗期研究的适宜时期.同时,对不移栽处理与移栽处理后7 d的样品代谢物进行了OPLS-DA二元统计分析,找到了6种差异化代谢物,并通过UNIFY数据库鉴定出其中4种化合物,分别为戊糖、7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山柰酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基、(1-6)-β-D-葡萄糖苷山柰酚-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-芸香糖苷、商陆苷元.其中,戊糖属于糖类,7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山柰酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基、(1-6)-β-D-葡萄糖苷山柰酚-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-芸香糖苷属于黄酮类物质,商陆苷元属于萜类物质,其余2种化合物未知.在不移栽和移栽2个处理中,这6种代谢物含量差异较大,初步认为这6种物质是与育苗移栽相关的代谢物.
全文链接
请求原文
限水减氮对豫北冬小麦产量和植株不同层次器官干物质运转的影响
《作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：采用节水栽培并减少氮肥用量是实现豫北冬小麦生产的高产、高效和环境友好发展的必然选择,探明限水减氮对冬小麦产量和植株各层次器官干物质运转的影响,可为该地区冬小麦节水栽培和合理施用氮肥提供科学依据.2009—2010和2010—2011年连续2年在河南浚县钜桥进行小麦田间裂区试验,主区设置2个灌溉水平[拔节水(W1)和拔节水+开花水(W2)],副区设置5个氮肥水平[330 kg hm–2(N4,豫北地区小麦生产中常规施氮量)、270 kg hm–2(N3)、210 kg hm–2(N2)、120 kg hm–2(N1)、0 kg hm–2(N0)],测定了籽粒产量和植株各层次器官干物质运转量、运转率和对籽粒贡献率.减量施氮与N4相比,各营养器官向籽粒运转的干物质量均有增加,其中,穗轴+颖壳的干物质运转量增加了323.2%,增幅远高于茎节的24.5%和叶片的4.6%,且穗轴+颖壳的干物质运转率和对籽粒贡献率增幅也远高于茎节和叶片.减量施氮处理的叶片干物质运转量的增加主要源于倒三叶和倒四叶,分别增加28.7%和201.1%,而茎节干物质运转量的增加主要源于除穗位节外的其他茎节,分别增加21.7%(倒二节)、71.8%(倒三节)、44.5%(倒四节)和31.1%(余节).与W2相比,W1干物质运转量无显著差异,但干物质运转率略高(24.6%vs.23.8%),对籽粒贡献率较高(35.1%vs.30.0%),籽粒产量降低11.2%,水分供应量减少750 m3 hm–2.可见,减量施氮促进了营养器官,尤其是穗轴+颖壳和下层器官(倒三叶、倒四叶、倒三节、倒四节和余节)的干物质向籽粒的运转,提高了对籽粒贡献率,有利于提高籽粒产量.
全文链接
请求原文
猪伪狂犬病病毒变异毒株gE和gB蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗免疫抗体与病毒感染抗体鉴别诊断方法,分别以PRV变异毒株的gE或gB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选所需单克隆抗体,获得6株抗PRV gE蛋白的单抗(3E6、7E1、7C5、10C3、15C1、14C1)和6株抗PRV gB蛋白的单抗(1C1、5D2、2F11、5G8、10C7、8H5)。IPMA检测结果显示,gE蛋白单抗能识别PRV变异毒株,但不识别疫苗株;而gB蛋白单抗可同时识别PRV变异毒株和疫苗株。gE单抗10C3和gB单抗10C7的ELISA效价和IPMA效价均分别达1∶5×10~(5.0)和1∶8×10~(3.0)以上。所筛选出的单抗均不与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、流行性乙型脑炎病毒(JEV)等其他常见病毒发生交叉反应。gE蛋白和gB蛋白的表达及单抗的制备为PRV感染抗体与疫苗免疫抗体鉴别诊断(DIVA)试纸的研发奠定基础。
关键词： 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 gB蛋白 单克隆抗体 鉴别诊断
全文链接
请求原文
H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体IPMA检测方法的建立
《中国畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：本试验旨在建立一种针对检测抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)筛选方法.通过优化MDCK细胞接毒量、细胞接毒后培养时间、封闭液的种类和工作浓度、工作时间等各个反应条件,并对建立的IPMA筛选方法的特异性、敏感性和重复性进行评价.结果显示,建立的IPMA检测方法的最优反应条件为MDCK细胞接毒102.63 TCID50/100μL H1N1亚型猪流感病毒,37℃培养24 h,含3‰H2O2的甲醇室温固定15 min,5%脱脂乳37℃封闭2 h,50μL杂交瘤细胞上清作为一抗,37℃孵育2 h,羊抗鼠HRP-IgG二抗37℃孵育1 h.所建立的IPMA方法能特异性地检测H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪瘟病毒(CSFV)阳性血清不发生交叉反应;其敏感性检测结果显示,可检测1∶3 200的HI=2-9标准H1N1猪阳性血清;批间和批内重复性试验结果较好.综上所述,本试验成功建立了抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的IPMA检测方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,为生产鉴定H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体提供了一种简便、实用、有效的检测手段.
关键词： H1N1亚型猪流感病毒 免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA) 单克隆抗体
全文链接
请求原文
河南花类道地药材资源的区域分布及其产业现状分析研究
《中国中药杂志 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：花类药材通常是指以完整的花、花序或花的某一部分作为入药部位的中药材,在我国药材市场上占据重要的份额,在中药处方中出现的频率非常高。该研究首先对我国花类药材资源的种类及代表性花类药材的区域分布进行了简要概述;其次对河南主要的花类道地药材的特性、产量、面积和产地分布进行了论述;最后对河南花类道地药材产业的现状和存在的主要问题进行了全面解析,并提出了相应的产业发展对策。该研究以期对河南花类道地药材的资源合理开发利用、新品种选育、种植区划和生产布局及其产业的健康可持续发展提供决策性论证和科学依据。
全文链接
请求原文
甜瓜组培苗与实生苗生理生化指标的对比分析
《中国瓜菜 》 2019 北大核心
摘要：为利用组培技术进行甜瓜遗传育种提供科学支撑,对F1代薄皮甜瓜‘15F9’的组培苗和实生苗生长过程中若干生理生化指标进行比较分析。结果表明,薄皮甜瓜组培苗与实生苗在生长过程中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、叶绿素(Chl)、可溶性蛋白(Pr)和丙二醛(MDA)的变化趋势基本一致。SOD和POD活性总体变化先降后升,CAT活性变化呈先上升后下降趋势,Chl含量变化呈缓慢上升趋势,Pr含量变化曲线呈"W"型,MDA含量呈直线升高。果实单果质量实生苗为945.84 g大于组培苗子代的878.96 g,果实中心可溶性固形物含量组培苗子代为14.83%高于实生苗12.28%。综合对比分析认为,组培苗的生长势和品质较好于实生苗。
全文链接
请求原文
不同灌水处理对不同抗旱型小麦品种生长发育和产量的影响
《河南农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了探明黄淮麦区不同干旱敏感型冬小麦品种对不同灌溉方式的响应特征,以黄淮麦区大面积推广的2个冬小麦品种抗旱型的矮抗58(AK58)和干旱敏感型的郑麦7698(ZM7698)为研究对象,在隔离池中通过不同时期定量灌水研究总灌水量不变的情况下拔节期和开花期水分调配对2个小麦品种的群体数量、个体发育、产量构成的影响.结果表明,ZM7698在拔节期灌水100 mm+开花期灌水100 mm(B1 F1)处理下具有最高的群体数量和次生根数,而AK58在拔节期灌水200 mm+开花期不灌水(B2 F0)处理下群体数量和次生根数最高;2个小麦品种均在B2 F0处理下株高最高,B1 F1和B0 F2(拔节期不灌水+开花期灌水200 mm)处理株高均较其显著下降.与B2F0处理相比,B1F1和B0F2处理ZM7698和AK58两个品种旗叶SPAD值均显著下降,ZM7698叶片SPAD值下降幅度大于AK58.ZM7698和AK58的小穗孕性对不同灌水处理的响应明显不同,ZM7698结实小穗比率表现为B0F2>B1F1>B2F1,AK58则表现为B1F1>B0F2>B2F0.AK58的产量表现为B1 F1>B2 F0>B0 F2,穗数表现为B2 F0>B1 F1>B0 F2,穗粒数表现为B1 F1>B2 F0>B0 F2,千粒质量表现为B0 F2>B1 F1>B2 F0;而ZM7698的产量则表现为B1 F1>B0 F2>B2 F0,穗数表现为B2 F0>B1 F1>B0 F2,千粒质量表现为B0 F2>B1 F1>B2 F0,穗粒数表现为B2 F0>B0 F2>B1 F1.AK58和ZM7698的强势粒千粒质量均随着开花期灌水量的增加而显著增加,但AK58的增加幅度明显高于ZM7698;ZM7698弱势粒千粒质量仅在B1 F1和B0 F2处理间有显著差异,而AK58弱势粒千粒质量在B1 F1和B0 F2处理下均显著高于B0 F2处理.综上所述,抗旱型品种AK58和干旱敏感型品种ZM7698均在拔节—开花期均匀灌水(B1 F1)条件下产量最高,但是产量构成因素变化不同,AK58和ZM7698小穗发育过程和强、弱势粒灌浆过程对拔节期和开花期土壤水分敏感性的不同是造成2个小麦品种产量构成不同的重要原因.
全文链接
请求原文
