科研产出
pET-32a载体介导的生长抑制素基因在大肠杆菌中表达
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:为构建pET-32a-2SS28-SS14和pET-32a-3SS28原核表达质粒并检测其在大肠杆菌中的表达,将两种形式的生长抑制素SS14和SS28基因克隆到pET-32a载体中;酶切及测序鉴定后,采用不同终浓度的IPTG在37℃条件下进行诱导表达。Western blot结果显示:两组分别诱导出分子量大小为28.4 kD和29.8 kD的目的蛋白,不同终浓度的IPTG诱导对目的蛋白的表达量没有明显影响。目的蛋白主要为可溶性蛋白,少数以包涵体形式存在。本研究为生长抑制素基因工程疫苗生产应用奠定了基础。
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施氮水平对水稻氮肥利用率和径流负荷的影响
《土壤 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:氮肥的过量施用导致显著的氮素损失,降低了环境质量。减少氮肥投入使其与作物需求相匹配对于保持农业生产的可持续发展具有至关重要的作用。为了评估不同施氮水平对水稻生产过程中的氮肥利用率和径流负荷的影响,利用长期实验基地开展了相关研究,实验共设置了4个施氮水平,即0、100、200和300 kg/hm~2。结果显示,随着施氮量的增加,粮食产量显著提高,而农学效率和偏肥生产力却呈相反趋势。作物地上部氮肥回收率则呈先增加后减少的趋势,并在200 kg/hm~2时达到峰值;氮素径流损失随施氮量的增加而增加。
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猪流感病毒分离株A/swine/Shanghai/3/2014(H1N1)分子特性研究
《中国兽医学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:采用套式PCR检测方法,结合鸡胚分离鉴定,从20份患呼吸道疾病猪的鼻咽拭子样品中分离到1株流感病毒。经亚型鉴定及全基因组序列分析,证实该分离株为H1N1流感病毒,命名为A/swine/Shanghai/3/2014(H1N1)。遗传进化分析表明该分离株与类禽猪流感病毒(Avian-Like H1N1)相似性最高。蛋白序列分析发现,该分离株具有低致病性流感病毒特征,即其HA蛋白的裂解位点为PSIQSR↓GLFGAI。此外,该基因中有7个潜在的糖基化位点,受体结合位点为108(Y)、148~152(GVTAA)、167(W)、197(H)、204~212(DQQ SLYQNA)和238~243(RDQEGR);其中225~228EQAG显示该分离株具有结合SAα2,6Gal受体的能力,证明该分离株具有感染哺乳动物的能力。同时PB2蛋白的627E、701N及NS蛋白的92D位点均证明了该分离株的低致病性和感染哺乳动物的能力。
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大麦‘花22’高产群体特征及产量构成因素分析
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:为探明大麦‘花22'品种在崇明东滩盐碱地高产群体特征,收集整理2012—2014年‘花22'品种试验资料,分析若干高产群体指标特征和产量构成因素。结果表明:崇明盐碱地区‘花22'品种高产(≥6 000 kg/hm~2)群体适宜基本苗和最高茎蘖数为预期有效穗数的36%—40%和1.60—1.90倍,大麦群体成穗率50%以上,齐穗期主茎绿叶数在(4.62±0.20)张,叶面积指数5左右,单株于物质控制在(4.01±0.25 g);不同产量类型的产量构成因素对产量的贡献大小依次为:有效穗数>总粒数>结实率>千粒重。高产大麦群体在稳定适宜穗数基础上,提高结实率,以争取粒数为主攻目标。对不同产量类型中产量与产量因素间统计分析表明:产量与产量因素间的相关性存在明显差异,这对调控产量构成因素以达到不同产量类型的目标具有重要的指导意义。
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利用杂交方法选育香菇耐高温菌株
《分子植物育种 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:以香菇菌株808以及18N33和18N44为亲本,制备原生质体单核体和孢子单核体,并进行单单杂交和单双杂交,试验共设置杂交组合434对,通过显微镜镜检锁状联合及与亲本的拮抗试验获得235个杂交子。以47℃热激3 h后菌丝在PDA平板上的恢复情况作为初筛标准,71个杂交子表现出了较强的耐高温能力;以高温栽培出菇试验进行复筛,8个杂交子的综合农艺性状较优,是优良的耐高温杂交子。测定耐高温杂交子的纤维素酶活性和漆酶活性,并进行ISSR分析,结果表明,杂交子的纤维素酶活性与亲本具有显著性差异,大部分杂交子的漆酶活性与双亲或亲本之一具有显著性差异,杂交子与两亲本之间都存在着不同程度的遗传差异,是杂交子作为新菌株的有力证据。
关键词: 香菇杂交 耐高温菌株 出菇栽培 酶活性 ISSR分析
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光诱导香菇菌丝转色阶段的转录因子表达分析
《菌物学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:转录因子在真菌环境响应及生理过程中发挥重要的调节作用。本文利用转录组测序(RNA-Seq)技术研究光诱导香菇菌丝转色过程中的转录因子表达变化。转录组测序结果表明,在光照条件下转色的菌丝(313C)与黑暗条件下未转色的菌丝(313W)相比,香菇菌丝中共有68个转录因子基因表达发生变化(48个转录因子上调表达,20个转录因子下调表达);转色的菌丝(313C)与初始未转色的菌丝(118)相比,香菇菌丝中有80个转录因子基因表达发生变化(49个转录因子上调表达,31个转录因子下调表达)。这些差异表达的转录因子包括WD40、MADS-box、MYB和GATA等家族。另外,样品的两两比较中差异表达的转录因子既存在部分重叠,也表现特异性。其中,313C/313W中有14个特异性差异表达转录因子,313C/118中有26个特异差异表达的转录因子。重叠的转录因子有64个,其中有39个表达水平上调,15个表达水平下调。采用实时荧光定量PCR对几个转录因子进行了表达检测,其中部分转录因子的表达趋势与转录组分析基本相同。这些数据为进一步研究香菇转色的转录调控奠定了一定的基础。
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亚致死浓度甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾蛋白质和糖类含量的影响
《上海农业学报 》 2016 CSCD
摘要:研究了亚致死浓度甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾幼虫血淋巴蛋白质和糖类含量的影响,结果表明:甲氧虫酰肼处理甜菜夜蛾幼虫72 h后,能显著提高血淋巴中的蛋白质含量,并且随着处理浓度的增加而升高,LC_(40)处理组蛋白含量最高为6.74 mg/mL。此外亚致死浓度甲氧虫酰肼处理后对甜菜夜蛾还存在一定的后续影响,4龄时,LC_(10)、LC_(20)和LC_(30)处理组的蛋白质浓度显著高于对照组,而LC_(40)处理组的蛋白质浓度在各处理组中最低为7.61 mg/mL。血淋巴SDS-PAGE分析也表明,LC_(10)、LC_(20)和LC_(30)处理组几条主要蛋白条带含量要明显高于对照组。5龄时LC_(10)、LC_(20)处理组的蛋白含量要显著低于LC_(30)、LC_(40)处理组和对照组。SDS-PAGE分析结果表明,5龄血淋巴中最主要蛋白条带(85.1KD)含量在LC_(10)、LC_(20)处理组中要明显低于对照组和其他处理组。对甜菜夜蛾幼虫血淋巴中总糖含量测定结果表明,亚致死浓度的甲氧虫酰肼对甜菜夜蛾幼虫血淋巴中总糖含量的升高具有促进作用。杀虫剂处理72 h后,各处理组的总糖含量要显著高于对照组。甲氧虫酰肼处理结束后,对甜菜夜蛾幼虫后续不同发育阶段的总糖含量也有一定持续影响,如4龄和5龄各处理组的糖含量都明显高于对照组。
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不同施肥处理对温室气体排放和花菜产量及品质的影响
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:采用大田小区试验,综合考察单施化肥(H)、有机肥配施化肥(HY)、秸秆还田配施化肥(HJ)对CH_4、CO_2和N_O3种温室气体排放规律、花菜产量和品质的影响。试验结果表明:HJ处理显著提升CH_4季节累积排放通量,分别高出H和HY两处理22.86%和13.16%。H处理增加N_2O、CO_2季节累积排放通量,较HY处理分别高出23.66%和24.44%,较HJ处理高出了9.63%和11.88%。HY、HJ两处理花菜产量及花球中Vc含量、蛋白质含量和可溶性糖含量比对照H处理均有不同程度提高,其中产量分别提高16.25%和17.92%,Vc分别提高8.79%和8.08%,蛋白质分别提高20.99%和16.67%,可溶性糖含量分别提高15.79%和20.47%。综合考量增温潜势、温室气体排放强度、花菜产量及品质等指标,试验表明:HJ、HY两处理能明显降低温室气体增温潜势及排放强度,提高花菜的产量及品质。
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