科研产出
海南龙血树金属硫蛋白基因DcMT2的克隆和表达分析
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：金属硫蛋白是植物金属离子代谢及胁迫应答的关键蛋白,而且通过清除多余的活性氧调控着植物抗性的形成过程。MT2蛋白是重要的植物金属硫蛋白之一。本研究利用海南龙血树转录组数据,在注释拼接的基础上首次克隆了海南龙血树金属硫蛋白MT2基因(命名为DcMT2,Gene Bank登录号为MF594215),DcMT2基因序列全长为237 bp,编码79个氨基酸。序列分析发现DcMT2具有典型的植物金属硫蛋白MT2的结构特征,包含2个富含半胱氨酸的保守基序。DcMT2蛋白与百合目植物芦笋、水仙和马蔺具有较高的相似度,且在系统进化上划为同一分支。生物信息学分析显示该编码蛋白包含6个磷酸化位点,为非分泌型蛋白,主要在细胞外发挥作用,相对分子量为7.81 kD,理论等电点为4.86;二级结构主要由α螺旋(20.25%)和无规则卷曲(56.96%)构成。实时荧光定量PCR结果表明,DcMT2在海南龙血树的各组织中均有表达,在果实中的表达量最高,而根、茎、叶中的表达量较低。此结果为研究金属硫蛋白DcMT2在海南龙血树发育和血竭形成过程中的作用奠定了基础。
关键词： 海南龙血树 金属硫蛋白 血竭 生物信息学 表达分析
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丙环唑对普通白菜株高和产量的影响及其残留研究
《热带作物学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：本研究探索了丙环唑对普通白菜株高和产量的影响及其残留动态,为建立普通白菜生产中丙环唑安全有效使用技术规程和残留限量标准提供科学依据。两个实验剂量分别为高浓度(375 g a.i./hm~2)和低浓度(250 g a.i./hm~2)。结果表明,喷施后7 d,高、低剂量处理组株高比对照组分别下降17.19%和15.63%,达显著水平;喷施后14 d,高、低剂量处理组株高比对照组分别下降12.24%和7.35%,达显著水平;而产量下降均未达显著水平。丙环唑消解动态符合一级动力方程,半衰期为1.98 d。喷施后7~14 d,丙环唑终残在0.380 9~0.032 7 mg/kg,膳食暴露风险熵在10.42~7.56,处于可接受范围;喷施后第14 d的残留低于日本标准。广州农贸市场和超市中的普通白菜丙环唑残留以及膳食暴露风险研究表明,丙环唑残留监测值99位点为0.013 7 mg/kg,拟合残留值99位点为0.011 3 mg/kg,残留暴露风险熵99.9位点为7.44,处于可接受范围。按照风险最大化原则,参考农药残留限量制定规则,以1 mg/kg和0.01 mg/kg为最高和最低残留限量理论值,对消费者膳食暴露风险保护水平分别为6.44、13.56。建议将1 mg/kg作为普通白菜丙环唑残留限量标准。
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球孢白僵菌诱导的柑橘木虱免疫应答转录组分析
《应用昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】筛选柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama应对球孢白僵菌侵染的免疫应答及其网络调控基因,以进一步探讨柑橘木虱对球孢白僵菌的免疫防御机制。【方法】采用Illumina高通量测序平台对感染球孢白僵菌24、48、72 h与健康的柑橘木虱转录组进行了测序,利用生物信息学软件对筛选到的差异表达基因进行了功能注释、分类以及参与的信号通路分析。【结果】组装得到138 313条不可延长的非冗余Unigene,其N50和N90分别为2 532 bp和413 bp,平均长度为1 191.26 bp。在CK vs.S24h、CK vs.S48h和CK vs.S72h 3个转录组里分别获得了971、1 671和752个显著差异表达基因(DEGs),GO富集分析表明分别有405、614和542个DEGs显著富集到56、83和60个GO terms中,KEGG pathway分析结果显示分别有98、333和247个DEGs显著富集到10、27和25条代谢通路里。【结论】差异表达基因主要富集在能量代谢、离子运输、转录和翻译调控、生殖和发育调控以及免疫防御反应等相关通路,大部分编码潜在的与免疫识别及调控相关的基因,并从中筛选到5个显著上调表达的免疫相关基因,为开展柑橘木虱免疫应答虫生真菌的研究奠定理论基础。下一步将进行免疫相关基因的q-PCR验证及表达量分析,研究其在柑橘木虱应对球孢白僵菌侵染过程中的作用。
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宛氏拟青霉与球孢白僵菌对柑橘木虱的致病力分析
《应用昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】比较宛氏拟青霉WS-11和球孢白僵菌QB-28对柑橘木虱成虫的致病力,为生防制剂的田间应用提供理论支持。【方法】采用孢子悬浮液浸没法比较研究了2种真菌对柑橘木虱的致病力,并利用时间-剂量-死亡率模型估计了2种真菌对柑橘木虱的致死剂量与致死时间。【结果】宛氏拟青霉WS-11在孢子悬浮液浓度为1×108 spores/m L时,累计死亡率达到90.67%,球孢白僵菌QB-28则达到97.33%。时间-剂量-死亡率模型中Hosmer-Lemeshow方法拟合异质性检验表明模型拟合良好,在接种后9 d,宛氏拟青霉WS-11和球孢白僵菌QB-28对柑橘木虱的LC50分别为7.57×10~6 spores/m L和8.39×105 spores/m L;当孢子悬浮液浓度为1×108 spores/m L时,2种真菌对柑橘木虱的LT50分别为2.50 d和1.93 d。【结论】宛氏拟青霉WS-11和球孢白僵菌QB-28对柑橘木虱均有较好的致病力,具有较好的生防潜质,其中球孢白僵菌对柑橘木虱的致病力高于宛氏拟青霉,致死效率更高。
关键词： 宛氏拟青霉 球孢白僵菌 柑橘木虱 致病力 生物防治
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广东褐飞虱种群对4种杀虫剂的抗药性
《华南农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】测定广东省褐飞虱Nilaparvata lugens(St?l)对常用杀虫剂的抗药性,为科学防治水稻褐飞虱提供依据。【方法】在室内采用稻苗浸渍法测定了采自广东省广州市、雷州市、连州市、南雄市、海丰县、大埔县和怀集县等7个地方田间褐飞虱种群对噻嗪酮、吡虫啉、噻虫嗪和吡蚜酮的抗药性。【结果】广东褐飞虱种群对吡虫啉抗性仍处于极高水平抗性阶段(161.9~3576.4倍),对噻嗪酮抗性仍处于高水平至极高水平抗性阶段(93.4~1497.8倍),对噻虫嗪抗性仍处于高水平至极高水平抗性阶段(61.0~517.8倍),对吡蚜酮抗性处于敏感性下降至中等水平抗性阶段(3.7~11.0倍)。【结论】在水稻上防治稻飞虱需暂停使用吡虫啉、噻嗪酮和噻虫嗪;减少吡蚜酮在褐飞虱防治中的使用次数,以延缓抗药性的产生。
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Quinadoline C——海南海桑内生真菌的一种新生物碱
《深圳大学学报(理工版) 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：红树植物内生真菌是寻找结构新颖天然产物新药的重要来源.采用正相、反相硅胶柱色谱和Sephadex LH20凝胶柱色谱法,从海南特有红树植物海南海桑内生曲霉菌菌株Aspergillus sp.HS02的麦芽培养基发酵液乙酸乙酯提取物中,分离得到了化合物1,该化合物为发酵液主要成分.利用高分辨电喷雾质谱、一维核磁共振波谱、异核单量子相关谱、异核多键相关谱和氢-氢质子同核相关谱对化合物1结构进行了鉴定,确定为一个新的吲哚生物碱,命名为quinadoline C.利用滤纸片琼脂扩散法评价了该化合物抗农业病原真菌活性.
关键词： 红树植物 海南海桑 内生真菌 曲霉菌 天然产物 新吲哚生物碱
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零换水条件下枯草芽胞杆菌和糖蜜对水质和罗非鱼生长的影响
《华中农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：在零换水条件下采用全池泼洒枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)菌液并添加甘蔗糖蜜作为碳源,研究其对罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长性能和水质的影响。研究共设置4组:空白组、单独添加糖蜜组(C组)、单独添加枯草芽胞杆菌组(Y组)、同时添加糖蜜和枯草芽胞杆菌组(C+Y组)。试验持续6周,期间水温26～31℃,pH为6.5～7.5。研究结果显示,糖蜜和枯草芽胞杆菌的添加显著降低了养殖水体中的溶氧含量,糖蜜的添加提高了总氨的含量(P<0.05),相对于空白组,枯草芽胞杆菌和蜜糖的联合使用能显著降低水体亚硝酸盐氮、硝酸盐氮和反应性磷的含量。在整个养殖期间,空白组和实验组浮游植物丰度都比较低(10~4～10~6个/L)。但相对而言,3个处理组浮游植物丰度在养殖后期要远远高于空白组,以鞭毛藻(隐藻Cryptomonas和甲藻Gymnodinium)和硅藻(Bacillariophyta)为主。枯草芽胞杆菌和碳源的添加在一定程度提高了罗非鱼的存活率、生长率以及饲料转化效率,但并未达到显著水平。
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番木瓜成熟种子的体细胞胚简易诱导和植株再生
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：目前中国番木瓜产业受到环斑花叶病等病害的严重威胁,利用生物技术手段创制新种质、培育高产优质的抗病新品种成为番木瓜产业发展的亟需。本研究以‘一尺瓜’品种的140~150 d龄果实成熟种子为外植体,研究了其体细胞胚诱导和植株再生技术。结果发现了一种非常简单有效的外植体杀菌消毒方法,即用自来水将果实外表清洗干净,然后用70%酒精对果实进行表面消毒即可。该品种成熟种子理想的胚性愈伤组织诱导培养基组成为:1/2 MS(Murashige and Skoog,1962)+2 mg/L 2,4-D(2,4 dichlorophenoxyacetic acid)+400 mg/L谷氨酰胺+60 g/L蔗糖+7 g/L琼脂粉,胚性愈伤组织诱导率可达45%。将胚性愈伤组织置于含1 mg/L2,4-D的增殖培养基继代培养2个周期后,可获得大量均质的表面含有白色体细胞胚的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织团在不含任何激素的培养基上可完成体细胞胚的诱导、成熟、萌发和生根过程。挑取具有芽和根的体细胞胚转移到再生培养基培养30 d后可获得具有正常叶片和根系的完整植株,其发育为正常植株的百分率为52.5%。本研究为番木瓜生物技术育种建立一套简单、高效的体细胞胚再生技术体系提供技术支撑。
关键词： 番木瓜 ‘一尺瓜’品种 成熟种子 体细胞胚 植株再生
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发酵处理对不同来源蚕沙中亚硝酸盐的降解效果试验
《蚕业科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：蚕沙中丰富的养分使其具有饲料开发潜力,但蚕沙中的亚硝酸盐含量较高影响到了饲料的饲喂安全性,故采用发酵处理方法降解蚕沙中的亚硝酸盐。收集地面条桑育、地面条桑育+膨润土、地面条桑育+沸石粉、网上条桑育4种养蚕模式饲养熟蚕或5龄第2天幼虫的蚕沙,辅以玉米粉、麦麸、豆粕,以乳酸杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌为发酵菌种,在32℃条件下保持物料体系水分质量分数为45%进行发酵,检测发酵后样品的亚硝酸盐含量、有机酸(乳酸、柠檬酸、乙酸)含量、p H值、亚硝酸还原酶活力。结果发现:4种家蚕饲养模式来源蚕沙发酵试验组在发酵过程中,物料中的亚硝酸盐含量变化趋势均为先上升后下降,各组间在发酵40 h内的各个时间点,物料中的亚硝酸盐含量有显著性差异(P<0.05),但发酵48 h后均未检出亚硝酸盐;发酵过程物料中的乳酸和柠檬酸含量变化分别为先下降后上升、先上升后下降,而乙酸含量和亚硝酸还原酶活力波动范围较小;发酵物料的p H值随发酵进程逐渐降低,且在各取样时间点的差异具显著性(P<0.05)。试验结果表明,发酵处理可以有效降低蚕沙中的亚硝酸盐含量,综合考虑发酵过程物料中亚硝酸盐含量变化和家蚕饲养成本,认为利于饲料用蚕沙发酵处理的最佳养蚕模式为传统地面条桑育,蚕沙发酵处理时间在32~40 h之间为宜。
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