科研产出
复合菌-荔枝多酚对腹泻小鼠肠道形态结构和肠道菌群的影响
《食品科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为评价复合菌-荔枝多酚对肠道形态结构和肠道菌群的影响,采用蓖麻油灌胃的方法,制造小鼠腹泻模型,造模成功后灌服不同药物治疗4d后,取小鼠十二指肠、空肠和回肠固定到福尔马林中,进行苏木精-伊红染色,倒置显微镜下观察,测量各段小肠的绒毛长度、隐窝深度,计算绒腺比.无菌采集粪便用于肠道菌群聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)检测,对DGGE图谱上的优势条带回收、克隆并测序,对测序结果进行BLAST比对分析.结果表明,嗜酸乳杆菌和复合菌能提高十二指肠、空肠的绒毛长度与隐窝深度的比值(V/C),复合菌-荔枝多酚能增加空肠和回肠的V/C值.整个DGGE图谱和测序结果可见,嗜酸乳杆菌、复合菌和复合菌-荔枝多酚能增加小鼠菌群的数量,增强肠道菌群的微生态稳定性,而且复合菌还能增加群落的复杂程度.各给药组条带与正常组和模型组相比,增加了优势条带,复合菌组和复合菌-荔枝多酚组还出现了新的条带,复合菌体现了最优的效果.
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芥蓝紫薹性状的遗传分析与基因定位
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：紫薹芥蓝中含有大量花青素而呈现紫色,不仅具有重要的保健功能,而且还与植物的抗病抗逆性密切相关。研究芥蓝紫薹性状的遗传规律及基因定位,对芥蓝紫薹性状分子育种及探索花青素合成机制具有重要意义。本研究以紫薹芥蓝"HJJL"和绿薹芥蓝"612F"为亲本,构建6世代分离群体,对芥蓝紫薹性状进行遗传分析。遗传分析表明,芥蓝紫薹性状由一对不完全显性基因控制,命名为Bopur。以"HJJL"和"612F"杂交的F2分离群体作为定位群体,利用BSA法结合基于双亲全基因组重测序开发的In Del标记,将紫薹基因Bopur定位于C06染色体2个In Del标记Y35和Y24之间约67.4 kb的区域内,该区域内共有6个预测基因。
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中国南瓜果皮颜色基因连锁的SNP分子标记的开发及应用
《核农学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为了解中国南瓜(Cucurbita moschata Duch.)果皮颜色性状的遗传规律,筛选与皮色性状紧密连锁的SNP分子标记,本试验以中国南瓜墨绿无斑果皮自交系CMO-1(P1)和浅绿有斑果皮自交系CMO-97(P2)为试验材料构建F_2遗传群体,对果皮颜色pc(pericarp color)基因进行遗传分析和基因定位研究,将定位区间内的SNP分子标记转化为dCAPS分子标记进行开发及应用。结果表明,浅绿有斑果皮对墨绿无斑果皮表现为显性,由1个显性单基因控制。此外,利用前期构建的高密度遗传图谱,在8号连锁群上检测到了1个与中国南瓜果皮颜色性状和斑纹性状连锁的基因位点,2个性状可能由同1个基因控制。将此基因定位在具有最高表型解释概率的标记R1_47757附近,两侧翼标记为R2_47028和R2_63809,遗传距离为1.86 c M,物理距离为145.13 kb。生物信息学分析表明,该区段存在32个预测候选基因。同时,根据检测到的与皮色性状相关基因位点内的SNP分子标记信息,设计dCAPS分子标记引物,经过PCR扩增及酶切验证,开发出2个扩增效率高、稳定性好的dCAPS分子标记,根据酶切带型可以准确的将F_2群体中的墨绿无斑表型和浅绿有斑表型区分开,且可以用于鉴定中国南瓜自交系材料的果皮颜色。本研究结果为南瓜果皮颜色的形成机理及开展南瓜分子标记辅助育种奠定了一定的理论基础。
关键词： 南瓜 果皮颜色 基因定位 SNP分子标记 分子标记辅助育种
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柑橘黄龙病菌与寄主互作过程中4个小RNA的检测及功能分析
《南京农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：[目的]柑橘小RNA不仅是黄龙病抗性的调控因子,也可以开发成为黄龙病早期诊断的分子标记.本研究旨在探明小RNA在柑橘黄龙病与寄主互作中的作用.[方法]分别设计并合成了4个小RNA的反转录茎环引物以及相应的表达检测引物;利用实时荧光定量PCR对引物的特异性和扩增效率进行了测试;进一步检测分析了4个小RNA对靶标基因表达的调控情况.[结果]利用本研究设计的引物在健康样品和黄龙病发病样品中均可特异性检测到4个小RNA.相对定量标准曲线斜率表明,4个小RNA引物的扩增效率相近.表达量的相对定量分析表明:4个小RNA的表达与相应靶标基因的表达均呈负相关性; miR-753E-3p、miR-451b、miR2633和miR838-3p在发病样品中的表达量分别为健康对照样品中的4.69、0.44、0.36和3.08倍,而其靶标Cs6g21280、Cs6g05770、Cs2g08190和Cs8g02530在发病样品中的表达量分别为对照的0.14、8.95、3.06和0.29倍.进一步分析表明:这些小RNA的靶标基因在拟南芥中均存在同源基因:Cs6g21280在拟南芥中的同源基因为ATSMC4,与抑制开花和抑制逆境相关的DNA修复有关; Cs6g05770在拟南芥中的同源基因为BAK1,与病原特征分子诱导的抗病反应有关; Cs2g08190在拟南芥中的同源基因为CIPK23,与促进钾离子吸收、扩大叶片的气孔开度有关;Cs8g02530在拟南芥中的同源基因为PIP2,是一个水通道蛋白,可调节植物耐涝耐旱性.[结论]本研究揭示了黄龙病菌与柑橘在小RNA水平上发生的侵染与防卫的对抗作用,为黄龙病病症形成以及寄主免疫相关分子机制的研究提供了新的线索.
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不同品种紫肉甘薯抗氧化能力及花色苷成分分析
《食品科学 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：以广东地区9个不同品种的紫肉甘薯为研究对象,评价紫肉甘薯抗氧化能力,并对花色苷的组成进行定性和定量分析。结果表明:不同品种紫肉甘薯,总酚含量和抗氧化能力也不尽相同,其中广紫9的总酚含量为578 mg GAE/100 g,清除2,2’-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-amino-di(3-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,ABTS)自由基能力、氧自由基吸收能力、还原能力分别为4.36、10.38、11.23μmol TE/g,均高于其他品种的紫肉甘薯。通过高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法共鉴定出16种花色苷,包括8种矢车菊素类和8种芍药素类。紫肉甘薯花色苷含量在77.17~1 125.06 mg/kg之间,以广紫9含量最高,花色苷主要以酰基化的形式存在,其含量是非酰化的89倍,酰基化程度明显高于其他品种。综上所述,不同品种紫肉甘薯具有不同的抗氧化能力,其花色苷含量与结构也有较大差异,其中广紫9花色苷含量最高,抗氧化能力最强。
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看麦娘对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测
《农药学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：甲基二磺隆是防除小麦田看麦娘Alopecurus aequalis等禾本科杂草的主要除草剂品种之一,但目前中国山东、江苏及安徽等地已有部分看麦娘种群对其产生了抗性。ALS基因197位点突变是看麦娘对甲基二磺隆产生抗性的重要机理,根据突变型和野生型看麦娘在197位点处碱基序列的不同,本研究设计出了一种衍生性酶切扩增多态性序列(d CAPS)分子标记方法,可用于197位点突变的快速检测。通过在引物D197F序列的3′端引入一个错配碱基,扩增所得不同种群看麦娘的ALS片段经限制性内切酶Bam H I酶切后表现出多态性:野生敏感型分别产生了200和36 bp的2个条带;纯合突变型因无法被切开,只有236 bp的一个条带;而杂合突变型则同时产生了上述3个条带。该d CAPS检测结果准确、可靠,与经典的整株水平测定结果一致,并且可同时检测197位点上任一形式的突变。研究结果可为看麦娘等禾本科杂草对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测提供理论依据。
关键词： 看麦娘 甲基二磺隆 靶标抗性 ALS基因 突变 dCAPS
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土壤链霉菌Streptomyces sp.的抑菌成分
《深圳大学学报(理工版) 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为从放线菌次生代谢产物中寻找结构新颖的活性先导分子,通过抗菌活性筛选,发现一株土壤链霉菌Streptomyces sp.的发酵提取物具有抑菌活性.对该菌进行大规模发酵,利用正相、反相硅胶柱层析和半制备高效液相色谱法,从其发酵产物中分离得到化合物1—11,利用高分辨质谱、一维和二维核磁共振技术,分别将其结构鉴定为(E)-3-甲硫基丙烯酸(1)、(E)-3-甲硫基丙烯酰胺(2)、反式肉桂酸(3)、(E)-4-苯基-3-丁烯酸(4)、3-羟基-4-甲氧基肉桂酰胺(5)、3-indoleketol(6)、N-乙酰基-β-氧色胺(7)、2-乙酰基大黄素(8)、7-羟基-2-(2-羟丙基)-5-甲基色酮(9)、环(苯丙-脯)(10)和环(3-羟基酪-脯)(11).其中,化合物4—6、8、9和11是首次从链霉菌中发现,并且首次报道了化合物2的13C核磁数据.体外对化合物2—4、6、8和9进行了抗菌活性测试,结果表明,化合物3和6对枯草芽孢杆菌和耻垢分支杆菌具有弱抑菌活性,化合物8对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和耻垢分支杆菌也具有弱抑菌活性.
关键词： 天然产物 放线菌 链霉菌 柱层析 活性代谢产物 抗菌活性
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木薯MeCREB基因的分子克隆及其在原核细胞中的表达和优化
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：本研究以木薯为材料,通过RT-PCR克隆出了MeCREB基因,核酸序列分析表明,所克隆的基因与phytozome数据库收录的MeCREB基因(Manes.04G058300.1)序列基本一致。MeCREB基因全长968 bp,其中开放性阅读框(ORF)为747 bp,编码248个氨基酸,预测得出MeCREB蛋白是一个不稳定的亲水性蛋白,编码蛋白质的分子量为26.26 kD,理论等电点为5.99,GRAVY为-0.667。构建MeCREB-pGEX-6p-1表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,并对影响重组蛋白表达的4个主要因素(诱导温度,诱导起始菌量,IPTG浓度及诱导时间)进行优化,确定GST-MeCREB融合蛋白的最适表达条件。结果表明:重组工程菌生长至OD600=0.8时加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,在28℃下诱导6 h,最适合GST-MeCREB融合蛋白的表达。本研究为高效诱导获得GST-MeCREB融合蛋白用于下游实验提供了最优方案,并为进一步研究MeCREB基因的生物学功能奠定了基础。
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果蔬乙烯催熟系统设计及香蕉催熟试验
《果树学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】综合精准自动控制果蔬采后催熟所需温度、湿度、乙烯及CO_2气体参数,实现用乙烯气体安全自动催熟采后果蔬。【方法】在可控温控湿贮藏库中,设计加装乙烯气体输入感应装置、CO_2感应清除装置和微电脑调控程序终端,组成采后果蔬乙烯气体催熟系统,将库内多传感器和执行机构与微电脑调控终端连接,通过程序实现自动控制催熟各参数,并试验应用于香蕉的催熟。【结果】乙烯气体催熟系统可精确有效地自动控制贮藏库内的湿度、乙烯和CO_2气体体积分数,通入乙烯气体催熟处理2~3 d即可使香蕉达到外观销售需求,且贮放过程中香蕉的果肉硬度降低慢,货架期达8 d。【结论】同乙烯利催熟相比,采用该系统催熟香蕉具有安全自动、蕉果黄色色泽(b*值)和亮度值(L*)较高、后熟软化速度慢、货架期延长2~3 d等优点,可替代传统的乙烯利催熟方法。
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