芽孢杆菌胞外产物对凡纳滨对虾蛋白酶活性影响的体外试验

曹煜成; 李卓佳; 冯娟; 《大连水产学院学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：用半透膜法收集地衣芽孢杆菌Bacillus licheniform isDe株的胞外产物(Extracellu lar products,ECP),以匀浆离心法提取凡纳滨对虾Litopenaeus vannam ei的肝胰腺和肠道消化酶,将ECP和对虾消化酶提取液按1∶9(体积比)混合,研究不同温度、pH条件下ECP对对虾蛋白酶活性的影响。结果表明:在不同温度、pH条件下,试验组与对照组没有显著性差异(P>0.05),即地衣芽孢杆菌ECP在体外条件下对对虾蛋白酶活性没有显著性影响;且试验组中芽孢杆菌ECP的添加量与其蛋白酶活性呈负相关。

关键词： 地衣芽孢杆菌 胞外产物 凡纳滨对虾 蛋白酶 体外

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光合细菌对多刺裸腹溞培养的影响

陆建学; 盛文权; 夏连军; 周凯; 辛俭; 《海洋渔业 》 2007

摘要：在实验室条件下,采用静止培养法对多刺裸腹溞进行培养实验,研究在以酵母和小球藻为饵料的多刺裸腹溞培养中,添加不同浓度光合细菌对其生长繁殖的影响。结果表明:光合细菌(菌液浓度为48×108cell/ml)添加量为1 mg/L(组2)、2mg/L(组3)、64 mg/L(组8)、130 mg/L(组9)和260 mg/L(组10)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量与空白对照(组1)相比均无差异(P>0.05);光合细菌添加量分别为4 mg/L(组4)和8 mg/L(组5)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量明显多于对照组,差异较明显(P<0.05),其对多刺裸腹溞的增长具有明显的促进作用;在16 mg/L(组6)和32 mg/L(组7)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量达到最高峰,分别为对照组的1.54倍和1.40倍,差异十分显著(P<0.05);而当添加量过高,在520~800 mg/L(组11~组14)浓度范围内,实验组中多刺裸腹生殖量呈现急剧下降趋势,显著低于对照组(P<0.05);在本实验设计范围内,浓度等于或高于900 mg/L(组15)时,幼溞在12 d后仍没有达到性成熟,光合细菌对多刺裸腹溞的繁殖明显起抑制作用。以上结果显示,在以酵母与小球藻为饵料的多刺裸腹溞培养中,16~32 mg/L的光合细菌添加量最为适宜,该浓度范围的光合细菌对多刺裸腹溞的生长繁殖具有显著的促进效果。

关键词： 光合细菌 多刺裸腹溞 酵母 小球藻 生殖量

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翘嘴红鲌肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响

唐永凯; 俞菊华; 刘波; 戈贤平; 《水产学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：本文采用RT-PCR和RACE法分离、克隆了翘嘴红鲌G6Pase催化亚基基因全长cDNA,共1900 bp[不含poly(A)],包括49 bp 5′非翻译区,1068 bp阅读框以及含Poly(A)信号AATAAA的778 bp 3′非翻译区[不包括Poly(A)]。阅读框共编码355个氨基酸,分子量为39.89 ku。序列比对分析表明翘嘴红鲌G6Pase与斑马鱼G6Pase的相似性高达95%,与鼠、狗、人G6Pase的相似性为63%,和光滑爪蟾、金头鲷、河豚等G6Pase的相似性分别为69%、55%、76%,并具有G6Pase特有的3个保守基序。为了研究摄食以及饲料中碳水化合物对G6Pase的影响,使用实时定量RT-PCR分别测定了饲喂等能但不含碳水化合物和含23.98%碳水化合物的饲料的翘嘴红鲌肝脏G6Pase基因的表达水平,在使用上述饲料饲喂8周后,禁食48 h,然后测定禁食和摄食后3、6、12、24 h G6Pase mRNA的表达量,结果显示摄食后12 h,两组G6Pase的表达明显增加,说明摄食影响G6Pase基因的表达,禁食和摄食后3~12 h,含糖组G6Pase基因的表达量为无糖组的2~4倍,这表明碳水化合物可以诱导G6PasemRNA的表达。

关键词： 快速扩增cDNA末端 葡萄糖6-磷酸酶 碳水化合物 翘嘴红鲌 实时定量PCR

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上海鱼类三新记录

倪勇; 陈亚瞿; 《海洋渔业 》 2007

关键词： 海鲢 勒氏笛鲷 断斑石鲈 新记录 上海

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鳜养殖池塘底泥脱氢酶活性测定方法的研究

吴会民; 林文辉; 吴淑勤; 王亚军; 石存斌; 潘厚军; 李湘林; 《大连水产学院学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：对鳜养殖池塘底泥脱氢酶活性的测定方法中的反应条件(反应温度、反应时间、萃取剂、萃取时间和缓冲液的pH等)进行了研究。结果表明:在反应时间为30 m in,缓冲液pH为8.4,反应温度为37℃,萃取剂为乙酸乙酯,样品萃取时间为1 h的条件下,对4个底泥样品中脱氢酶活性的重复测定结果显示,该方法有较高的精密度(变异系数≤5.89%)。

关键词： 鳜 池塘 脱氢酶 脱氢酶活性

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蛇鲻胃蛋白酶的分离纯化和性质研究

李来好; 颜伟; 吴燕燕; 《热带海洋学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：以蛇鲻Saurida elongata内脏为原料,将蛇鲻胃经组织捣碎,硫酸铵分级沉淀,HitrapTMQ FF离子交换层析,Sephadex G-100凝胶过滤层析,得到胃蛋白酶纯品。经SDS-PAGE显示为单一条带,酶的分子量为37.7kDa,测得其最适温度为45℃,最适pH为2.2,酶的热稳定性很好,在40℃及以下温度处理3h酶活力没有任何变化,酶在pH 1—10以下都比较稳定,在强碱性条件下不稳定。EDTA和Trypsin inhibitor对该酶都没有明显的抑制作用,PMSF和Pepstatin A能完全抑制胃蛋白酶的活性。Ca2+、Mn2+、Mg2+、Ba2+对该酶影响不大,Hg2+对酶有较弱的抑制作用,而Zn2+、Cu2+、Fe3+对酶的抑制作用较强。

关键词： 蛇鲻Sauridaelongata 胃蛋白酶 分离纯化 性质

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软烤扇贝贮藏过程中的品质和细菌相变化

周彩华; 许钟; 郭全友; 杨宪时; 《中国水产科学 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：研究了软烤扇贝在10℃,25℃贮藏条件下的细菌种类、生长情况及品质变化,结果表明,产品贮藏初期的PH、水分活度(AW)值分别为6.72±0.01、0.91±0.07,AW控制较好,而PH值偏高.产品贮藏初期菌落总数为(2.43±0.03)LG(CFU)/G,耐热菌数为(2.02±0.14)LG(CFU)/G,厌氧菌数为(1.30±0.11)LG(CFU)/G,细菌相比较单一,主要包括芽孢杆菌(71.8%)、玫瑰小球菌(12.8%)、葡萄球菌(10.3%).10℃贮藏到达货架期终点176 D时,细菌总数、耐热菌数、厌氧菌数分别为(5.56±0.17)LG(CFU)/G、(5.41±0.05)LG(CFU)/G、(2.11±0.08)LG(CFU)/G;25℃贮藏到达货架期终点73D时,细菌总数、耐热菌数、厌氧菌数分别为(5.00±0.28)LG(CFU)/G和(5.13±0.11)LG(CFU)/G、(3.97±0.13)LG(CFU)/G.不同温度下,贮藏过程中的细菌相变化不同,25℃贮藏过程中玫瑰小球菌比例上升,从原来的12.8%上升至83.4%,而芽孢杆菌比例下降;而在10℃贮藏过程中芽孢杆菌比例基本没有发生变化,而棒状杆菌比例上升至28.2%.

关键词： 软烤扇贝 常温贮藏 品质变化 芽孢杆菌 玫瑰小球菌

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常见渔用消毒剂对大型蚤和卤虫无节幼体的毒性

刘淇; 李鹏飞; 李健; 王群; 《水利渔业 》 2007 北大核心

摘要：研究了7种渔用消毒剂对大型蚤和卤虫无节幼体的毒性。结果表明:三氯异氰尿酸、二氯异氰尿酸钠、溴氯海因、78二氧化氯、PVP-I、78滴滴灵、水毒清对大型蚤的24 h LC50、48 h LC50和安全浓度分别为0.33、0.28、0.06μg/mL;0.57、0.57、0.17μg/mL;0.54、0.54、0.16μg/mL;4.12、3.41、0.70μg/mL;31.73、31.73、9.52μL/L;2.15、0.50、0.01μL/L;7.33、4.14、0.40μg/mL。对卤虫无节幼体的24 h LC50、48 h LC50和安全浓度分别为2.62、2.62、0.79μg/mL;3.31、3.31、0.99μg/mL;6.25、4.53、0.71μg/mL;4.53、4.00、0.94μg/mL;79.33、79.33、23.80μL/L;38.81、6.40、0.05μL/L;7.58、2.21、0.06μg/mL。7种渔用消毒剂在其常规使用浓度范围内,除78滴滴灵对大型蚤的存活有一定影响外,其余消毒剂对大型蚤和卤虫无节幼体的存活无明显影响。

关键词： 大型蚤 卤虫无节幼体 渔用消毒剂 毒性

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皱纹盘鲍和盘鲍南方养殖群体遗传变异的微卫星分析

杜博; 龚世园; 童馨; 黄桂菊; 喻达辉; 《南方水产 》 2007

摘要：利用4对微卫星引物分析了皱纹盘鲍Haliotis discus hannai和盘鲍H.discus discus在福建和广东养殖群体的遗传多样性。结果表明,4个养殖群体平均等位基因数为3.750~5.500,平均有效等位基因数为2.941~3.885,平均期望杂合度为0.641~0.698,平均观察杂合度为0.456~0.620,平均多态信息含量PIC值为0.558~0.645,其中惠来盘鲍群体遗传多样性最高,东山盘鲍遗传多样性最低。AMOVA分析表明,群体间的遗传变异仅为总遗传变异的4.78%,但群体间遗传分化显著(FSC=0.048,P<0.001)。群体间NEI氏遗传距离为0.084~0.186,UPGMA聚类分析表明,东山盘鲍与惠来盘鲍群体间亲缘关系最近,并与惠来皱纹盘鲍聚为一类,东山皱纹盘鲍与其它群体间亲缘关系较远。皱纹盘鲍和盘鲍南方养殖群体遗传多样性较高,有利于遗传选育,但与野生群体相比等位基因有所丧失。

关键词： 皱纹盘鲍 盘鲍 养殖群体 遗传多样性 遗传结构 微卫星

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GC/MS法同时测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素及甲砜霉素残留量

冷凯良; 孙伟红; 王志杰; 王建华; 邢丽红; 《海洋水产研究 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：建立了气相色谱-负离子化学电离源质谱同时测定水产品中氯霉素(CAP)、氟甲砜霉素(FF)和甲砜霉素(TAP)残留量的方法。通过优化色谱条件,实现了氯霉素、甲砜霉素及氟甲砜霉素三甲基硅(TMS)衍生物的良好分离,检测模式采用选择离子检测(SIM),监测离子为:氯霉素(m/z376、378、466、468),氟甲砜霉素(m/z339、341、429、431)及甲砜霉素(m/z409、411、499、501),分别选择466、339、409作为定量离子。方法建立的基质添加标准曲线,有效地消除了基体效应的影响,其衍生物的峰面积与其浓度在CAP为2.0～200.0ng/ml,FF和TAP在5.0～200.0ng/ml时呈良好线形关系,线性相关系数均大于0.998。基质加标实验表明,方法的准确度和精密度满足水产品中药残检测的要求。CAP的测定低限为0.3μg/kg,FF和TAP的测定低限为1.0μg/kg。

关键词： 气相色谱-质谱 氯霉素 氟甲砜霉素 甲砜霉素 水产品

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