科研产出
短日照期间的夜温对一品红开花和相关生理指标的影响
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:为明确一品红国庆促成栽培短日照期间的适宜夜温,本试验以一品红中国红为试材,研究短日照期间不同的夜温处理(18、21、24、27℃)对一品红开花和花色素苷、叶绿素、可溶性糖含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明:短日照期间的夜温对一品红的开花进程、观赏品质以及苞片的花色素苷等生理指标有显著影响;21℃夜温处理转色时间最早,转色最快,成花率高,观赏品质最好,而且苞片花色素苷、可溶性糖含量以及PAL活性明显高于其余夜温处理,其次是18℃与24℃,而27℃夜温处理苞片基本不转色。因此,短日照期间的夜温以21℃左右为宜,这一研究结果对一品红国庆促成栽培生产具有重要的指导意义。


不同羽色斑嘴野鸭毛囊中Tyr,Tyrp1及C-kit基因的表达及调控分析
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:斑嘴野鸭羽毛呈褐色,少数个体会呈现出黄白羽及白羽表型。Tyrosinase(Tyr)、Tyrosinase-related protein-1(Tyrp1)以及C-kit(The tyrosine kinase receptor)基因与黑色素合成密切相关,研究利用Real-time PCR对这3个基因在褐羽、黄白羽以及白羽3种表型斑嘴野鸭毛囊组织中进行表达分析;同时利用在线软件分别预测调控这3个基因的microRNA。结果发现,Tyr,Tyrp1在褐羽斑嘴野鸭中表达量最高,黄白羽中表达量显著下降(P<0.01),而在白羽中则完全不表达。C-kit在褐羽及黄白羽中表达量类似,而在白羽中表达则显著下降(P<0.01)。同时,预测到调控Tyr,Tyrp1和C-kit基因的microRNA数分别为9,25和18个。结果表明,毛囊组织中Tyr,Tyrp1以及C-kit基因的表达下调可能导致了斑嘴野鸭出现了黄白羽及白羽两种表型,这些候选microRNA可能参与了这3个基因的表达调控。
关键词: 斑嘴野鸭 毛囊 Tyr Tyrp1 C-kit microRNA


气相色谱-串联质谱法测定鱼肉中毒死蜱及其代谢产物3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶的残留量
《理化检验(化学分册) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:采用气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定鱼肉中毒死蜱及其代谢产物3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶(TCP)残留量。样品经1mol·L-1盐酸-乙腈(1+99)混合液提取,提取液于-20℃冷冻去除脂肪,浓缩近干,残渣用乙酸乙酯溶解后与N-甲基-N-叔丁基二甲基硅基三氟乙酰胺进行衍生反应,产物经净化后采用GC-MS/MS测定。毒死蜱和TCP的线性范围分别为2.0~2 000,1.0~1 000μg·L。鱼肉中毒死蜱和TCP的检出限(3S/N)分别为0.5,0.3μg·kg-1,测定下限(10S/N)分别为1.7,1.0μg·kg-1。加标回收率分别为84.6%~95.6%,73.8%~82.7%,测定值的相对标准偏差(n=6)分别小于10%,13%。
关键词: 气相色谱-串联质谱法 毒死蜱 3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶 鱼肉


LC-MS快速分析紫苏水煎液中的主要化学成分
《药物分析杂志 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:目的:采用液相色谱,结合四极杆飞行时间串联质谱(QTOF/MS)和离子阱质谱(IT/MS)2种质谱检测器,分析鉴定中药紫苏水煎液中的主要化学成分。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18RRHD柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.05%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,柱温30℃,进样体积10μL;采用QTOF获取化合物的分子式,并用数据依赖扫描辨别质核比接近的离子碎片;结合IT/MS的多级质谱分析推断可能的结构并验证鉴定结果。结果:通过联合使用2种不同原理的质谱仪并参照数据库和文献资料从紫苏水煎液中鉴定了27个化合物,包括9个黄酮及其苷类成分,10个有机酸类成分,5个氨基酸、2个缩氨酸和1个核苷,其中4个成分经由对照品比对确证。结论:该方法通过联合使用QTOF/MS和IT/MS,为化合物的快速解析提供了更多数据,提高了分析的速度和准确性,为中药复杂组分的分析提供了一种可行的方法。
关键词: 紫苏 液相色谱 四极杆飞行时间串联质谱 离子阱质谱 中药成分分析 黄酮苷类 有机酸类 芹菜素-二葡萄糖醛酸苷 刺槐黄素-芸香苷 木犀草素-二葡萄糖醛酸苷 野黄芩素-二葡萄糖醛酸苷 迷迭香酸


猪血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα)cDNA克隆与表达分析
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:血小板源生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor,PDGFRα)是酪氨酸蛋白激酶受体家族成员之一,在脂代谢中具有潜在的调控作用。本实验旨在克隆猪(Sus scrofa)PDGFRα基因的c DNA全长并分析其组织表达谱。根据Gen Bank上已登录的人(Homo sapiens)、牛(Bos taurus)和小鼠(Mus musculus)等物种的PDGFRα基因保守序列设计引物,利用反转录PCR和RACE技术,克隆得到猪PDGFRα基因的c DNA序列(Gen Bank登录号:KP329568)。测序结果分析表明,猪PDGFRα基因c DNA长度为6 360 bp,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)为3 270 bp,3'非翻译区(untranslated regions,UTR)为2 964 bp,5'UTR为126 bp,共编码1 089个氨基酸。该基因在基因组中大约横跨148 Mb,包含23个外显子和22个内含子。序列同源性分析表明,猪PDGFRα基因的核苷酸和氨基酸序列与人、牛、绵羊(Ovis aries)、小鼠的相似性较高。蛋白质结构预测发现,PDGFRα蛋白具有2个跨膜螺旋,10个N-连接糖基化修饰位点,75个磷酸化修饰位点以及1个信号肽结构,且N端存在较强的疏水区域,C端则表现出较强的亲水性。实时荧光定量PCR(quantitative Real-time,q RT-PCR)分析表明,该基因在杜洛克猪的心、肝、脾、肺、肾、小肠和骨骼肌等脏器均有表达,其中在脾脏中表达量最高,肾脏、肺脏次之。该基因在不同部位骨骼肌(比目鱼肌、冈上肌、股二头肌、腰小肌、腓肠肌和眼肌)中表达分析显示,在以比目鱼肌为代表的慢肌中表达量要极显著高于在以眼肌为代表的快肌中的表达量(P<0.01)。比较不同生长阶段PDGFRα基因的表达发现,初生阶段表达量极显著高于断奶和成年阶段(P<0.01)。本研究获得猪PDGFRα基因c DNA全长、组织表达规律以及在不同肌肉组织中的相对表达量,为进一步研究猪PDGFRα基因的功能提供了基础资料。
关键词: 猪 血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα) 基因克隆 组织表达


班氏跳小蜂对毒死蜱和吡虫啉的敏感性及解毒酶活性的变化
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:采用喷雾法和浸叶法测定毒死蜱、吡虫啉对班氏跳小蜂(Aenasius bambawalei Hayat)成蜂的毒力,并用喷雾法测定毒死蜱、吡虫啉对扶桑绵粉蚧体内班氏跳小蜂的发育、寄生率和相关解毒酶的活性。结果表明,毒死蜱喷药和浸叶处理的LC50分别为2.595和0.112μg·L-1,吡虫啉喷药和浸叶处理的LC50分别为0.115和0.234 mg·L-1,毒死蜱对班氏跳小蜂的杀伤力较吡虫啉强;2种药剂处理下,班氏跳小蜂的雄、雌蜂的后足胫节长度与对照组差异不显著,对扶桑绵粉蚧的寄生率与对照组差异显著;毒死蜱对班氏跳小蜂体内乙酰胆碱酯酶的抑制率为76.4%,吡虫啉对班氏跳小蜂体内羧酸酯酶、多功能氧化酶的抑制率分别为85.3%和32.2%。


生物炭替代泥炭栽培基质对铁皮石斛生长的影响
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要:为提高农林废弃物的再利用率,缓解泥炭资源消耗问题,以竹条炭化制备的生物炭部分替代泥炭为栽培基质,进行基质泥炭替代试验。采用完全随机区组设计,以松树皮+泥炭基质作为对照组,以分别添加3%、6%和10%的竹炭(即部分替代泥炭)作为试验组,研究不同栽培基质配比对铁皮石斛生长的影响。结果表明:3%与6%的生物炭替代量没有显著影响铁皮石斛产量、株高、茎粗、节间距、叶长、叶宽、根数和根长。然而,10%的生物炭替代量在铁皮石斛株高、节间距、节数、叶数方面显著降低。另外,6%的生物炭替代量在萌芽数较对照组提高24.13%,但其移栽成活率最低。从短期来看,3%的生物炭替代泥炭可作为铁皮石斛的新基质,可为生物炭在作物栽培方面的合理利用提供参考,而长期的效果需要进一步研究。


利用HPLC法检测活性肽HMG-CoA还原酶抑制剂活性
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:通过检测反应体系中NADPH的浓度变化,建立了一套测定HMG-Co A还原酶抑制剂活性的HPLC法。以SymmetryC18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)进行分离,流动相为:V(K2HPO4-KH2PO4)∶V(甲醇)=85∶15,p H 7.2,流速1 m L·min-1;检测波长337 nm,进样量20μL,柱温25℃。在此条件下,NADPH的线性范围为0.6~600μmol·L-1,加标回收率为94.48%~101.81%,相对标准偏差(n=5)小于4.49%,最低检出限为0.01μmol·L-1。用此方法对蚕蛹蛋白肽的HMG-Co A还原酶抑制剂活性进行了测定,在酶解肽浓度为0.5mg·m L-1时,其抑制率为28.70%。
关键词: 降血脂肽 HMG-Co A还原酶 NADPH 液相色谱


酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和刺鼠信号蛋白(ASIP)基因对白绒乌骨鸡黑色素沉积的遗传效应
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:为研究白绒乌骨鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)黑色素沉积分子机制,本研究采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)的2-ΔΔCt检测酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)和小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因在乌骨鸡皮肤、肌肉、肝脏、肾脏和肌胃的表达情况,采用紫外分光光度法测定不同组织黑色素含量,探索3个基因在不同组织中m RNA表达量与黑色素沉积之间的关系。结果表明,TYR、MITF和ASIP在所有组织中均有表达,且各基因m RNA相对表达量在各组织间差异极显著(P<0.01),其中MITF和TYR m RNA表达量依次为皮肤>肾脏>肌胃>肝脏>肌肉,与乌骨鸡各组织黑色素沉积规律基本一致;ASIP基因表达量则与其相反,表现为肌肉>肝脏>肌胃>肾脏>皮肤。相关性分析表明,TYR和MITF基因在各个组织中的表达量与其黑色素含量呈显著正相关(P<0.05),ASIP基因表达量与其呈显著负相关(P<0.05)。由此提示,TYR、MITF和ASIP与白绒乌骨鸡黑色素沉积均具有一定的相关性,其中TYR和MITF基因的高表达可能促进乌骨鸡黑色素沉积,ASIP则相反。本研究为进一步阐明黑色素沉积的遗传调控机制提供了理论基础。
关键词: 白绒乌骨鸡 黑色素沉积 实时荧光定量PCR(q RT-PCR) 酪氨酸酶(TYR) 刺鼠信号蛋白(ASIP) 小眼畸形相关转录因子(MITF)

