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红掌两个bZIPs基因片段的克隆与低温响应特性分析

分子植物育种 2015 北大核心 CSCD

摘要:本研究以红掌‘Alabama’幼苗为材料,克隆了2个b ZIP转录因子基因Aab ZIP1和Aab ZIP2。Aab ZIP1片段长度462 bp,Aab ZIP2片段长度为369 bp,两基因核苷酸序列的相似度为46.97%,推定的氨基酸序列相似性为31.17%。Blastx发现两个基因均具有亮氨酸拉链的保守结构域,具备b ZIP转录因子家族的基本特征。RT-PCR分析检测表明,低温处理后,Aab ZIP1基因为组成型表达,不响应低温胁迫;Aab ZIP2基因表达受低温诱导,其表达强度随着低温处理时间的延长而增强,Aab ZIP2可能在红掌的低温胁迫响应过程中起重要作用。

关键词: 红掌 bZIP 亮氨酸拉链 低温 克隆

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基于α值法测算的旱作水稻灌溉管理与生长表现

核农学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了提高旱作水稻水分管理水平,本研究通过关键期补灌、水分胁迫、常规水作(对照)盆栽和田间试验,观察旱作水稻生长反应。结果表明:关键期补灌旱作水稻生长呈前弱后强、滞后生长、差异性大的特点。与对照相比,盆栽试验关键期补灌早作水稻幼苗成活率低6.1个百分点,苗高、苗重分别低17.1%和44.7%;株高整齐度变幅较大,不如对照平稳;分蘖特性与水分胁迫处理相近,分蘖数比对照少2.74个,分蘖结束时间推迟7d。生长中后期,关键期补灌表现出明显的强性,叶绿素值、光合速率分别提高30.6%和48.4%,根须数少48.3%,单条根须重量提高62.8%;水饱和后测定的伤流量是对照的3.3倍,蒸腾速率提高83.0%;关键期补灌籽粒产量分别是水分胁迫和对照的2.1倍和0.94倍。田间试验干旱年关键期补灌的常规粳稻旱作产量5 924.3 kg·hm-2,是对照的84.1%;平水年补灌产量6 511.8 kg·hm-2,是对照的91.2%,干旱年水分利用效率和灌溉增产效率分别比平水年高9.9%和165.0%。本研究证实"五日测算法"具有快速、误差积累小等优点,为旱作水稻水分的量化管理提供方法。

关键词: 旱作水稻 预测灌溉 α值法 湿润地区 关键期补灌 五日测算法

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褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较

浙江农林大学学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了筛选出适合褐飞虱Nilaparvata lugens类酵母共生菌蛋白质提取的细胞破碎方法,选择超声波破碎法、反复冻融法和液氮研磨法等3种细胞破碎方法提取共生菌吡虫啉敏感菌株和抗性菌株蛋白质。结果表明:菌体显微形态观察发现,使用超声波破碎法和液氮研磨法处理类酵母共生菌的细胞破碎效果均优于反复冻融法,处理后菌体分布均匀,破碎彻底;72 h是提取菌体蛋白质的最佳培养时间。定量分析表明:用超声波破碎法提取蛋白质质量浓度最高,液氮研磨法次之,反复冻融法提取蛋白质质量浓度的效果最差,各方法所提蛋白质质量浓度差异显著(P<0.05)。培养72 h后,超声波破碎法、液氮研磨法和反复冻融法提取的蛋白质质量浓度分别为2.82 g·L-1,2.62g·L-1和2.12 g·L-1(敏感菌株)及2.64 g·L-1,2.53 g·L-1和2.05 g·L-1(抗性菌株)。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析发现:超声波破碎法获得的蛋白质不仅得率高,且条带清晰,丰度好。液氮研磨法虽得率高,但蛋白质部分降解,条带不清晰;而反复冻融法获得的蛋白质得率最低。超声波破碎法更适合于褐飞虱类酵母共生菌的蛋白质提取,该研究为后续蛋白质的双向电泳实验和分离差异蛋白质提供技术支撑。

关键词: 植物保护学 褐飞虱 类酵母共生菌 菌体蛋白质 提取方法

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双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度

浙江农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素(Po IFN-α)含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA)。通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆纯化抗体包被浓度为12.5μg·m L-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25μg·m L-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781~2.50μg·m L-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便。

关键词: 猪α-干扰素 双抗体夹心ELISA 定量检测

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大麦耐迟播高分蘖资源的鉴定与筛选

麦类作物学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为给耐迟播高产大麦育种提供基础材料,以505份大麦种质资源(农家品种131份,国内育成品种(系)271份,国外引进品种103份)为材料,通过对不同迟播日期下大麦资源分蘖特性的鉴定、迟播资源的亚群体划分及其入选的迟播高分蘖资源有效分蘖的鉴定等工作来筛选耐迟播大麦种质资源。结果表明,随着播期的推迟,大麦资源的分蘖数显著降低,但大麦资源分蘖的基因型差异很大。16个分子标记共检测到78个多态位点,根据分子标记检测结果,505份迟播资源被划分为8个亚群,各亚群中根据分蘖数选取耐迟播高分蘖资源,共选出55份资源,其中农家品种12份,育成品种(系)35份,国外品种8份。入选的55份高分蘖资源的有效分蘖数也有显著差异,有22份资源的有效分蘖数在两个播期下均显著高于对照,这些高分蘖资源的鉴定为改良大麦品种耐迟播特性提供了重要的基因资源。

关键词: 大麦 迟播 分蘖 群体结构 遗传多样性

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鸭坦布苏病毒基因组全长cDNA克隆构建与分析

浙江农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)ZJ-407株全基因组序列设计并合成4对特异的Infusion引物,应用RT-PCR技术分4段扩增了DTMUV全基因组c DNA。通过In-fusion技术将扩增的c DNA重叠片段A,B,C和D片段分别克隆到载体p BluescriptⅡKS(+)中,获得了DTMUV全长基因组c DNA克隆p SK-T7-DTMUV。在扩增5'末端时,引入T7启动子序列;在基因组3'末段引入SmaⅠ酶切位点,以供c DNA模板的线性化之用。核酸序列分析表明,DTMUV毒株基因组全长为10 990个核苷酸,与DTMUV ZJ-407 DF-1细胞分离株的同源性为99.9%;全长基因组中有9个核苷酸发生突变,其中7处为沉默突变,2处导致相对应的氨基酸发生改变,且这两处均位于非结构蛋白NS5。结果表明,本研究成功构建了DTMUV ZJ-407株基因组全长c DNA,为其感染性c DNA的拯救奠定基础。

关键词: 鸭坦布苏病毒 全长cDNA克隆 感染性克隆

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利用番茄废渣混菌固体发酵生产蛋白饲料

食品与发酵工业 2015 北大核心 CSCD

摘要:以番茄废渣为原料,以绿色木霉、黑曲霉、产朊假丝酵母、热带假丝酵母为出发菌种,通过单菌种和混菌种固体发酵实验,筛选出发酵产品蛋白质含量最高的菌种组合。实验结果表明,当绿色木霉∶黑曲霉∶热带假丝酵母=1∶2∶6时,发酵产品干物质中蛋白质含量高达35.00%,是较好的发酵组合。

关键词: 微生物发酵 菌体蛋白饲料 蛋白质 发酵产物

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潮土区小麦高产与环境友好的磷肥施用量研究

河南农业科学 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了确定河南省潮土区小麦合理的磷肥施用量,利用大田试验,研究不同施磷量处理对小麦产量、土壤有效磷残留量及磷肥利用率的影响。结果表明,施磷能够显著提高小麦籽粒产量及地上部吸磷量,但过量施磷抑制小麦产量提高。随着施磷量增加,小麦产量先增加后降低,以施磷(P2O5)量90 kg/hm2处理最高,180 kg/hm2处理次之,两者差异不显著;磷肥利用率逐渐下降,耕作层土壤Ca Cl2-P、Water-P、Olsen-P残留量增加,土壤磷素盈余量增加。综合考虑小麦产量、有效磷残留量及磷肥利用率,90~180 kg/hm2是小麦高产与环境友好双赢的磷肥施用量。

关键词: 潮土 磷肥 小麦 产量

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不同接穗长度和栽种时间对杨梅嫁接成活率及生长量影响的研究

中国农学通报 2015 CSCD

摘要:为提高杨梅嫁接成活率和接穗利用率,2014年开展了不同接穗长度、不同栽种时间对杨梅嫁接成活率和生长量影响的研究。结果表明:嫁接后6天、12天栽种的杨梅,5~6 cm短穗嫁接的成活率分别达87%和88%,略低于8~12 cm长穗嫁接的89%和90%,二者差异极不显著;嫁接后6天、12天栽种的杨梅成活率达87%~90%,极显著高于嫁接后1天栽种的成活率(20.2%~21%)。研究认为,在嫁接后遇下雨天气,根据天气情况,在接后6~12天内选择晴天栽种,可显著提高成活率;在接穗紧缺时采用短穗嫁接,可大大提高接穗利用率。

关键词: 杨梅 短穗嫁接 栽种时间 成活率 生长量

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铁皮石斛产地环境及产品中重金属的监测与污染评价

浙江农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:抽取浙江省乐清市大荆镇、淡溪镇、虹桥镇、仙溪镇、雁荡镇和芙蓉镇等地人工栽培铁皮石斛样品34份、基质样品27份和水样16份,分别检测其中Pb,Cd,Cu,Hg的含量。采用单因子综合污染指数和Nemerow污染指数法对铁皮石斛鲜条及铁皮枫斗进行污染评价。结果表明:铁皮石斛鲜条和枫斗的单因子综合污染指数和Nemerow污染指数均小于0.6,铁皮石斛产品均未受到重金属污染,水样总体表现良好,未受到Pb,As,Cd,Hg的污染。基质重金属Cd单因子综合污染指数为1.33,1.0

关键词: 铁皮石斛 产地环境 重金属 污染评价

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