科研产出
正交设计优化槟榔SSR-PCR反应体系及引物筛选
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：优化槟榔SSR-PCR反应体系,筛选适用于槟榔的SSR引物。以槟榔(Areca catechu L.)叶片DNA为模板,利用正交设计方法对槟榔SSR反应体系中的Mg~(2+)、TaqDNA聚合酶、dNTPs和引物等4种因子三个水平进行了优化,并通过比较模板DNA浓度对PCR扩增结果进行研究,确定了最佳反应体系。利用该体系筛选出适用于槟榔的SSR引物,对该体系稳定性进行验证。槟榔L9(34)正交试验设计的SSR反应体系的最优条件为,即20μL反应体系中含Mg~(2+)Buffer 2.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U、引物0.4μmol/L、模板DNA量为60 ng为最优的反应体系。利用6份不同地理来源的槟榔资源DNA样品对50对SSR引物进行筛选,得到条带清晰、多态性好的引物6对。优化后的槟榔SSR-PCR反应体系和筛选的多态性引物可应用于槟榔种质资源遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究。
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基于双向温度梯度系统的槟榔萌发及生理响应
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：本研究以‘热研1号’槟榔种子为供试材料,借助双向温度梯度系统控制面板设置49个昼夜温度处理(最高温区48℃,最低温区20℃),研究其对种子萌发率、生长状况及生理响应的影响。结果表明:槟榔种子萌发最佳昼夜温度组合为29/25℃,萌发率100%,生长态势最佳;20/20℃条件下槟榔种子有萌发,但发芽率为80%,种子长势一般;48/48℃条件下种子不萌发。根据长势状况,以及酶活(SOD、POD、GR)测定,明确了最适于种子萌发及生长的温度范围为25/20～34/25℃。另外种子萌发所需日积温560～744℃·h为宜,萌发总积温不宜超过24 864℃·h。实验还证实了槟榔种子变温处理比常温萌发效果更好。
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芒果MinSPS1基因的克隆及表达载体的构建
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase, SPS)既是调控蔗糖合成的关键酶又是限速酶,为了研究其在芒果果实中蔗糖合成的作用机理,本研究从芒果果肉中克隆得到一个与蔗糖合成相关的基因,将其命名为MinSPS1,其cDNA全长序列为3 344 bp,开放阅读框为3 168 bp,编码1 055个氨基酸,蛋白质分子量为118.13 k D,等电点为6.08,对MinSPS1基因编码的蛋白进行系统发育分析,发现其与柑橘具有较近的亲缘关系。采用qRT-PCR对该基因在后熟处理的贵妃芒果肉中的表达量进行分析,结果显示在完熟期贵妃芒果肉中表达量较高,而在青熟期表达量较低。本研究为深入了解芒果蔗糖合成的分子机理,进一步构建了p CAMBIA1301-MiSPS1过表达载体,为MinSPS1的功能鉴定提供理论依据。
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剑麻内参基因筛选与稳定表达分析
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选剑麻中稳定表达的内参基因,保证基因表达结果的可靠性,本研究以热麻1号为材料,采用实时荧光定量RT-PCR方法对来自剑麻转录组数据的8个内参基因(EF1α、MADH、ACT2、GAPDH、TUB、ACT54、CYP和EF1β)在烟草疫霉侵染、水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA)处理过程中的表达水平进行检测,并结合GeNorm、BestKeeper和NormFinder软件综合评价8个内参基因的稳定性.结果表明:8个内参基因在不同处理下的表达稳定性存在显著差异,其中在烟草疫霉侵染和茉莉酸甲酯处理过程中,EF1α表达最稳定,EF1β表达最不稳定.在水杨酸处理过程中,EF1α表达最稳定,ACT2表达最不稳定.在脱落酸处理过程中,GAPDH表达最稳定,ACT54表达最不稳定.该结果为剑麻基因的表达分析提供了可供选择的内参基因.
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橡胶林氮肥施用后在土壤中的残留、累积和迁移
《生态环境学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：氮肥在土壤中的残留是土壤氮库的重要补充,对于维持土壤氮水平和保证作物高产具有重要作用。目前人们对热带季风气候下橡胶林氮肥施用后的残留特征了解还很少。利用微区试验结合~(15)N示踪技术,研究了橡胶林酸性砖红壤中不同施氮水平下(0、100、200和400 kg·hm~(-2))氮肥的残留、累积和迁移。结果表明,不同施氮水平下肥料氮当年根层土壤(0-100cm)残留量为23.36-109.36 kg·hm~(-2),残留率为23.36%-31.85%,施氮量的升高显著增加了肥料氮的残留量;2年后,不同施氮水平下肥料氮根层土壤残留量仅20.45-41.78 kg·hm~(-2),残留率10.45%-20.45%,施氮量的增加显著降低了肥料氮残留率;试验第1年(枯水年),不同施氮水平下土壤硝态氮主要在根层土壤累积(24.61-172.47 kg·hm~(-2)),而淋洗迁移到深层土壤(100-200 cm)的硝态氮不多(13.89-51.66 kg·hm~(-2))。根层土壤硝态氮累积量与施氮量呈极显著正相关关系;试验第2年(丰水年),不同处理的根层土壤硝态氮累积很少(仅5.39-22.95 kg·hm~(-2))。3个氮肥处理的硝态氮均不同程度地迁移、淋洗到深层土壤,达53.36-201.42 kg·hm~(-2)。深层土壤中的硝态氮累积量与施氮量呈极显著正相关关系。综上,橡胶林氮肥施用后的土壤残留率较低,施氮量是影响橡胶林土壤硝态氮累积、迁移的重要因素。
关键词： 橡胶林 酸性砖红壤 ~(15)N标记尿素 硝态氮 残留
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不同刈割高度王草中叶绿素和叶绿醇含量在青贮前后的变动
《动物营养学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在探究不同刈割高度王草[Pennisetum purpureum Schumacher*Pennisetum glaucum (Linnaeus) R. Brow n]中叶绿素和叶绿醇含量在青贮前后的变动以及王草青贮中叶绿素和叶绿醇含量与发酵品质之间的关系.试验选定4个试验区,每个试验区有4个小分区,分别在草高50~80 cm(T1)、80~120 cm(T2)、120~180 cm(T3)和180~220 cm(T4)时对4个小分区中的1个进行刈割.将刈割的王草自然干燥至水分含量约为80%后,剪切至2 cm左右,制备青贮,发酵60 d.青贮开封后,测定pH以及有机酸、常规营养成分、叶绿素和叶绿醇含量,并解析其青贮前后变动情况.结果显示:无论是在青贮前还是在青贮后,王草中叶绿素和叶绿醇含量均随着刈割高度的增加而显著降低(P<0.05).在青贮后,王草中约有74%的叶绿素被分解,但叶绿醇的含量变化不大.尽管在不同刈割高度下王草青贮中有机酸含量表现出了显著差异(P<0.05),但并没有发现王草青贮中叶绿素、叶绿醇含量与发酵指标(pH以及乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量)存在相关性.综上可知,王草中叶绿醇在青贮过程中可被良好保存,并且王草青贮中叶绿醇含量与发酵品质之间不存在相关性.
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QuEChERS/UPLC-MS/MS法快速测定土壤中吡虫啉、啶虫脒与阿维菌素残留
《农药 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立了热带农业区水稻-辣椒轮作模式下辣椒种植季土壤中吡虫啉、啶虫脒与阿维菌残留同时快速检测方法。[方法]样品经乙腈-0.1%甲酸(V/V)提取、N-丙基乙二胺(PSA)与C_(18)混合分散剂净化,利用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)与基质溶液匹配的外标法定量分析。[结果] 3种目标农药线性范围均超过3个数量级;3种添加质量分数(1.0、10.0、100.0μg/kg),土壤中3种农药平均回收率为63.7%～89.9%,相对标准偏差(RSD,n=3)为0.1%～13.6%;方法检出限(LOD,S/N=3)为0.06～0.26μg/kg,定量限(LOQ,S/N=10)为0.21～0.89μg/kg,均低于中国、欧盟辣椒中推荐最大残留限量值检测浓度。[结论]方法快速、简便、灵敏度高、重现性好,可满足实际检测需求。
关键词： QuEChERS 超高效液相色谱串联质谱法 农药残留 水稻-辣椒轮作
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通过式固相萃取净化-液相色谱串联质谱法测定香蕉中14种杀菌剂残留
《分析试验室 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：建立了通过式固相萃取净化-超高效液相色谱串联质谱技术同时测定香蕉中嘧菌酯等14种杀菌剂残留量的分析方法.香蕉样品用乙腈提取后,加入柠檬酸缓冲盐促进有机相与水相分离,经通过式固相萃取小柱净化后,超高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱法测定.嘧菌酯等14种杀菌剂的质量浓度在5~200μg/L范围内线性良好,检出限在0. 02~0. 58μg/kg之间,相关系数均大于0. 99,平均加标回收率在71. 6%~108. 0%之间,相对标准偏差在0. 60%~13%之间.与石墨化碳黑/氨基固相萃取小柱和N-丙基乙二胺吸附剂相比,通过式固相萃取小柱具有净化效果好、有机溶剂使用量少、效率高等优点.方法学考察及实际样品的测定证明该方法可用于香蕉中嘧菌酯等14种杀菌剂残留量的检测.
关键词： 香蕉 杀菌剂残留 固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱
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甘草种质主要形态性状和化学成分的遗传多样性分析
《中草药 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：目的依据国内甘草种质主要的形态性状和化学成分,对其遗传多样性进行综合分析。方法收集移植于同一地点的42份多年生甘草种质的12个地上部分性状和5种化学成分含量,计算其遗传多样性指数和变异系数,运用聚类分析和主成分分析进行统计分析。结果 5种化学成分中,甘草苷含量的遗传多样性指数最高为2.05,异甘草苷含量的变异系数最大为99.50%,甘草苷含量与异甘草苷含量呈中度相关关系;在12个形态性状中,株高的遗传多样性指数最高为2.08,实际果序长的变异系数最大为37.09%,果型和株型性状的变异大于叶型性状;聚类分析将42份种质分为3类,第II类群种质品质较优;主成分分析将17个指标简化为6个因子,累积贡献率为72.96%,因子6为代表甘草酸、甘草苷、异甘草苷的因子。结论甘草种质主要形态性状和化学成分的遗传多样性较为丰富,筛选出V08、V10、V17、V34、V36、V38共6个品质优异的甘草种质。
关键词： 甘草 种质 形态 甘草酸 甘草苷 异甘草苷 遗传多样性
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