与猪流行性腹泻病毒M蛋白互作的宿主蛋白的鉴定

王瑞阳; 于瑞嵩; 陈冰清; 李凤平; 谢春芳; 司伏生; 董世娟; 李震; 《微生物学通报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：【背景】猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)膜蛋白(M)在病毒粒子的组装、膜融合和病毒复制等方面具有重要的作用,但M蛋白与宿主细胞的互作机制尚不清楚。【目的】利用免疫沉淀技术和液质联用技术筛选细胞内与PEDVM蛋白相互作用的蛋白,为揭示M蛋白在病毒增殖过程中发挥的功能提供研究基础。【方法】将MOI=0.1的PEDV DR13疫苗株接种于长成单层的Vero细胞,感染36 h后,收集细胞并进行裂解。利用抗M的单克隆抗体沉淀与M相互作用蛋白复合物,通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进行鉴定并利用细胞功能富集分析(Gene ontology,GO)对感染组鉴定到的细胞蛋白进行分析,确定两个细胞内源性蛋白为候选蛋白,进行免疫共沉淀(Co-IP)验证和共定位分析。【结果】基于鉴定蛋白的肽段数的方法分析显示,感染组与对照组相比,鉴定了218个与M蛋白相互作用的细胞内源性蛋白,分别与蛋白质合成、代谢、细胞信号通路转导等密切相关,选择细胞分裂周期蛋白42 (Cell division cycle 42,CDC42)、真核翻译起始因子3亚基L蛋白(eIF3L)为候选蛋白进行Co-IP(Co-immunoprecipitation)验证和共定位分析,结果证实CDC42、eIF3L蛋白分别与M蛋白在细胞内存在相互作用。【结论】鉴定出PEDV M蛋白能够与宿主细胞CDC42和eIF3L蛋白相互作用,并鉴定出其他可能与M蛋白发生相互作用的宿主蛋白60个,为开展PEDV与宿主细胞蛋白相互作用研究提供了重要理论依据。

关键词： 免疫共沉淀 猪流行性腹泻病毒 CDC42 eIF3L 膜蛋白 蛋白互作

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羧肽酶A抑制剂Latexin基因的原核表达与纯化

刘成倩; 李红; 高骏; 姚惠娟; 易建中; 孙凤萍; 《上海农业学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：根据Gen Bank上公布的Latexin基因核酸序列设计并合成引物,用RT-PCR方法扩增出Latexin基因,并将其克隆到T载体,转化构建到原核表达载体PET-30a上,得到重组质粒PET-30a-Latexin.将重组质粒转化大肠杆菌transetta(DE3)感受态细胞,并进行IPTG诱导表达、SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析.结果表明:所得重组蛋白大小约32 ku,以可溶形式存在,且该蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应.

关键词： Latexin基因 羧肽酶抑制剂 原核表达

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硝普钠对红掌愈伤形成及植株再生的影响

李水根; 李秀芬; 李记开; 朱建军; 《上海农业学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：以红掌‘阿拉巴马’的间接不定芽再生体系为基础,研究了不同浓度的硝普钠(SNP)对红掌叶片诱导愈伤组织发生、不定芽再生及植株生根的影响.结果 表明:在愈伤诱导培养基中添加SNP可一定程度上影响红掌愈伤组织的发生,其中20 μmol/L SNP处理可显著提高愈伤的发生频率和鲜重,当SNP的浓度为80 μmol/L时,愈伤的发生频率和鲜重均受到抑制.在不定芽分化培养基中添加SNP对不定芽的分化率没有显著影响,但40 μmol/L SNP处理可显著提高不定芽的数量.将植株转接到添加20 μmol/L SNP的生根培养基上,不定根的数量显著增加,但SNP处理对不定根的长度没有显著影响.综上,适宜浓度的SNP处理可促进红掌愈伤组织的诱导、不定芽再生和植株生根.

关键词： 红掌 愈伤发生 离体再生 硝普钠

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两种养殖密度下稻田宽体金线蛭生产效益分析

张莺莺; 谈永松; 曹建国; 涂尾龙; 王洪洋; 吴华莉; 吕巍巍; 周文宗; 《水产科学 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：将当年繁殖的同一批初始体长(2.63±0.24) cm、初始体质量(2.46±0.27) g的宽体金线蛭养殖在89.55 hm~2稻田中,以每块稻田环形沟面积计,密度分别为50尾/m~2和100尾/m~2,每组3个平行.放养后第10 d开始定时、定位、定质、定量投喂中华圆田螺,每5 d按119 kg/hm~2投喂,研究两种密度下宽体金线蛭的生长及效益.50 d的养殖试验结果显示,100尾/m~2组宽体金线蛭的最终体质量、特定生长率和质量增加率显著减小(P<0.05);50尾/m~2组宽体金线蛭各生长参数显著高于100尾/m~2组(P<0.05);两种养殖密度下水稻产量差异不显著(P>0.05),不考虑水稻效益,100尾/m~2组养殖密度宽体金线蛭的平均净产值(69 791元/hm~2)显著高于50尾/m~2组(57 015元/hm~2)(P<0.05).研究结果表明,50尾/m~2有利于促进宽体金线蛭的生长,但大规模养殖时,100尾/m~2养殖密度可取得更好的经济效益.

关键词： 宽体金线蛭 稻田养殖 生长性能 经济效益

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日光温室黄瓜叶片功能性状对施氮量的响应

蔡树美; 诸海焘; 徐四新; 张德闪; 杨业凤; 付子轼; 《土壤通报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：随着现代生态学的内涵延伸,植物个体功能性状在种群、群落和生态系统尺度上,都已成为明确植物个体和生态系统与环境协同变化规律的可靠途径.通过透射电镜法观察了黄瓜叶片的组织形态,并测定了黄瓜叶片化学组成和氮代谢相关酶活性.结果表明:黄瓜叶片的组织形态与化学组成之间具有协变关系.无氮和高氮胁迫条件下,黄瓜叶片中N, P, K含量较低,相对应的是叶绿体中片层结构混乱,脂质小球数量多,并且高氮条件下,叶肉细胞中淀粉粒数量显著增加(P <0.05).相关性分析结果表明,黄瓜叶片生理性状、养分组成与土壤理化性质之间均存在关联.黄瓜叶片酶活性与土壤碱解氮和pH相关性较强.CAT, NR和GS活性均与土壤碱解氮含量显著正相关,MDA活性与土壤碱解氮含量显著负相关(P <0.05),CAT和GS活性与土壤pH值显著负相关.研究以个体生态学特征为依据,明确了日光温室黄瓜叶片功能性状对不同施肥策略的响应规律,弥补了传统群体生态学应用方面的不足,对于提升日光温室农业生态服务功能具有指导意义.

关键词： 功能性状 氮素 叶片超微结构 酶活性

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香菇采后保鲜技术研究进展

陈冰洁; 乔勇进; 张国强; 董宗宗; 王晓; 《食用菌学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：新鲜香菇(Lentinula edodes)耐贮性差,采后短期内出现萎蔫、褐变等一系列不可逆的生理现象,影响商品价值及食用价值.笔者从贮藏温度的控制、冷杀菌、气调、保鲜剂和涂膜保鲜等方面,概述了香菇保鲜技术的研究进展,并对其发展方向进行展望,以期为香菇的保鲜研究和应用提供参考.

关键词： 低温 冷杀菌 气调 化学保鲜 生物保鲜 涂膜保鲜

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相对湿度对双孢蘑菇贮藏品质的影响

张国强; 乔勇进; 王晓; 庄海宁; 钟耀广; 《食品工业科技 》 2019 北大核心

摘要：为探明湿度对双孢蘑菇贮藏品质的影响,以双孢蘑菇A15为试材,温度为(1±1)℃,相对湿度分别为70%±5%、80%±5%和90%±5%下贮藏15 d,对失重率、质地、色度、褐变指数、多酚氧化酶(PPO)活性、丙二醛(MDA)含量及可溶性固形物含量(TSS)等指标进行测定。结果表明,双孢蘑菇在90%±5%相对湿度下失重率及TSS含量最低,白度仅下降了6.9%,硬度保持在较高水平,相比于70%±5%相对湿度,15 d时PPO活性降低41.5%,MDA含量降低35.9%,均得到有效抑制,说明高湿度环境对双孢蘑菇有一定的保鲜作用,90%±5%相对湿度有利于延长双孢蘑菇的贮藏期。

关键词： 双孢蘑菇 相对湿度 贮藏品质 褐变指数

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上海承包土地抵押贷款试点推广问题研究

王丽媛; 马佳; 马莹; 张孝宇; 《上海农村经济 》 2019

摘要：2014年,我国首次提出赋予农民对承包地经营权抵押及担保权能。次年,全国范围开展农地经营权抵押贷款试点,尽管上海并未进入全国232个试点地区,但上海市将金山区列入全市首个农村承包土地经营权抵押贷款(下称"农地抵押贷款")试点地区。一、上海承包地抵押贷款试点现状(一)上海承包地抵押贷款开展基础依据《上海农村土地经营权抵押贷款试点实施办法》的要求,上海农村土地经营权抵押贷款开展基础条件,主要包括以下三个方面:

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微生物发酵饲料对育肥猪生长性能及肉质的影响

陆扬; 雷胡龙; 宣海鹏; 涂尾龙; 曹建国; 陆乃升; 姜雪元; 夏东; 《畜牧与兽医 》 2019 北大核心

摘要：为了研究乳酸菌发酵饲料对育肥猪生长性能、肉品质的影响及其机理,选择体重约80 kg的杜×长×大三元杂交生长育肥猪320头,随机分为对照组和试验组,每组8个重复,每个重复20头猪,对照组饲喂基础饲粮,试验组饲粮中5%的原料经乳酸菌发酵处理后再与其他原料混合;试验预试期3 d,正试期4周,在第4周结束时,每组随机抽取6头猪进行屠宰,测定屠宰性能和肉质。结果显示:与对照组相比,饲喂发酵饲料对肥育猪的干物质采食量、平均日增重和料重影响差异不显著(P>0.05),猪血清中的生长激素和胰岛素样生长因子-I水平组间差异也不显著(P=0.11);试验组育肥猪的背最长肌pH_(45 min)和肉色评分显著增加(P<0.05),背最长肌肉剪切力显著降低(P<0.05);试验组血清谷胱甘肽还原酶活性有升高趋势(P=0.08)。结果表明:肥育猪饲料中添加5%发酵饲料原料可改善猪肉品质。

关键词： 发酵饲料 生长育肥猪 生长性能 肉品质 抗氧化

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上海青菜种植成本收益及其影响因素分析

张静怡; 马佳; 杨怀宇; 马莹; 《农业展望 》 2019

摘要：以上海市为例,采用成本收益法对青菜种植的成本与收益状况进行分析,利用生产函数对其影响因素进行回归分析,探索降低青菜种植成本和提高经济效益的途径。通过对2013—2017年上海市青菜投入产出关系进行研究得出以下结论:上海市青菜种植的土地费用、人工费用和物质费用与青菜产量之间存在长期稳定的关系,土地费用变化对青菜产量变化影响最大,其次是人工费用,物质费用对上海青菜产量的影响最小;上海市青菜种植成本稳定上涨,其中农药的增长幅度最大,达到14.40%,其次是人工费用和土地费用,增幅分别为10.67%和8.26%。对各项成本总增长率和年均增长率比较分析发现,农药费用增长率最高;其次是土地和人工费用,年均增长率分别为2.13%和1.65%。因此,青菜生产的主要制约因素是化肥、劳动力和土地的成本高。未来,建议在青菜生产中大力推广有机农业,减少农药费用投入支出;加强培训力度,使农民了解过度使用农药对土地以及蔬菜的危害;加大用地支持政策,出台鼓励青年人从事蔬菜种植的激励措施。

关键词： 青菜 种植规模 成本结构 成本收益 影响因素 上海

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