科研产出
柑橘衰退病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立一种反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermalamplification,RT-LAMP)检测柑橘衰退病毒(Ctrus tristeza virus,CTV)的一步法检测技术。【方法】根据CTV保守的p25设计2对特异性引物,对RT-LAMP体系的最佳反应条件、特异性、灵敏度等进行研究。【结果】建立了一种特异性检测CTV的RT-LAMP方法,该方法的灵敏度比RT-PCR方法高100倍,产物通过Acc I酶切得到验证,而且反应产物中加入SYBR Green I可直接观察样品是否感染CTV。【结论】RT-LAMP法检测CTV,其成本低、准确且快速,可满足基层、科研单位等对该病害检测的需要。
关键词： 反转录环介导等温扩增技术 柑橘衰退病毒 反转录聚合酶链式扩增技术 检测
镉胁迫对葡萄砧木5BB和99R组培苗生长的影响
《河南农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用组织培养技术,研究了不同质量浓度镉(Cd)(0、1、3、5 mg/L)对2个葡萄砧木品种(5BB和99R)的生长特性及Cd积累规律的影响.结果表明,随着Cd质量浓度的增加,2个葡萄砧木品种的生物量、株高、根系长度和表面积均呈现下降的趋势,且99R的下降幅度明显高于5BB.随着Cd质量浓度的增加,2个葡萄砧木品种Cd含量明显增加,在试验设置的Cd质量浓度条件下,5BB地上部和根系Cd含量均低于99R.2个葡萄砧木品种对Cd胁迫的反应虽然总体趋势一致,但5BB的生物量、株高和根系形态指标的下降幅度明显低于99R,表明5BB比99R具有较强的耐Cd特性.
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农杆菌介导磷高效转录因子OsPTF1转化大豆研究
《分子植物育种 》 2013 CSCD
摘要：本研究将水稻耐低磷基因OsPTF1基因构建植物高效表达载体pTF101.1-35S-OsPTF1-NOS,通过农杆菌介导法将OsPTF1基因转入黄淮海地区优良品种商豆1099子叶节中,成功获得转基因植株。大豆属于难转化作物,在本研究中,对大豆转基因中大豆萌发指标和侵染方式进行优化选择。结果表明:大豆转基因萌发时间以48 h为宜;大豆子叶节受体比大豆胚尖受体更容易转化。经过PCR分子初步检测,有3株转化植株整合有OsPTF1外源基因,表明OsPTF1基因已初步整合到大豆基因组中。
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利用Solexa测序技术鉴定甜橙miRNAs
《果树学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】预测鉴定甜橙miRNA及其作用机制和功能,为深入研究挖掘甜橙miRNA及其抗病相关miRNA的作用等提供翔实的基因信息。【方法】利用高通量测序技术、相关的生物信息学软件和数据库,构建甜橙小RNA文库,然后以甜橙基因组为参考基因组,进行甜橙miRNA鉴定和靶基因预测;利用GO和KEGG数据库对靶基因进行功能分析。【结果】成功构建了甜橙小RNA文库:获得12 617 944条小RNA序列分属于3 065 625种小RNA序列,获得序列中24 nt长的序列最多,占到序列的49.3%。鉴定出2 199 561条miRNA,其中已知miRNA638 722条,分属52种miRNA家族,候选miRNA1 560 839条,分属204种miRNA。已知的52种保守miRNA基因预测出927个靶基因位点,候选miRNA中有154种预测出1 777个靶基因位点。GO数据库对靶基因分类显示,甜橙miRNA调控的靶基因主要参与多细胞互作、转录本调控和细胞组成等生物学途经和分子功能方面。KEGG数据库中病原物与寄主互作亚库分析结果显示,靶基因主要与抗性蛋白、转录因子和抗病酶等关联。【结论】预测鉴定出一批甜橙miRNA及其调控的靶基因,为进一步研究提供了参考信息。
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河南省粮食作物育种方向的选择
《河南农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：优良品种是粮食增产的基础,而正确的育种方向对选育优良品种至关重要。根据河南省情和粮食生产实际,利用粮食生产统计数据,对河南省粮食生产现状和影响因素进行分析。结果表明,河南省粮食总产增长主要是依赖粮食单产的增长,而且主要是由小麦、玉米产量的增长实现的。气象灾害频繁,抗灾能力不强;化肥投入过量,物质转化效率下降,农业面源污染加剧。耕地质量和分布不平衡,中低产田具有增产潜力。作物育种过程中重视产量性状,忽视相关性状;种质资源狭窄,导致主导品种单一。由于农村劳动力转移,种粮人数减少,在此基础上,提出了高产性、高效性、适应性、抗逆性、专用性和安全性的作物育种方向。通过育种方向的调整,提高粮食作物育种水平,培育优良品种,实现粮食生产的土地集约利用、物质集约节本、劳动集约替代、环境集约减损、技术集约高效,促进粮食生产持续稳定发展。
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甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
《沈阳农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：依据甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针,经过对反应体系和反应条件的优化,建立了特异、灵敏、高效的SPFMV实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明:该方法能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.307和0.998,扩增效率为100.6%。最低可检测到约5.46个拷贝的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高2个数量级。建立的实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPFMV的早期预警和流行学研究提供了技术手段。
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EDTA对黄菖蒲和马蔺Cu吸收积累的影响
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用水培的方法研究了乙二胺四乙酸(EDTA)对2种鸢尾属Cu富集型植物(黄菖蒲、马蔺)对Cu的吸收和积累的影响。结果表明:在0.55 mmol·L-1(35 mg·L-1)Cu胁迫下加入EDTA(0.28,0.55 mmol·L-1)能够显著促进植物体对Cu的吸收,并促进Cu向地上部的转移,同时黄菖蒲、马蔺的地上和地下生物量也显著增加,缓解了Cu对2种植物生长的抑制作用。黄菖蒲和马蔺地上部脯氨酸(Pro)含量升高、MDA含量降低,也进一步表明一定浓度的EDTA能够减轻Cu对植物的毒害。但是,当溶液中EDTA浓度大于0.55 mmol·L-1时,其效果不明显,表现为抑制Cu在根部的吸附,进而降低Cu向地上部的转移,但与低浓度EDTA处理相比,高浓度EDTA(1.10 mmol·L-1)下的两种植物生物量显著下降,表明高浓度EDTA会产生毒害作用。
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大豆异黄酮生物合成途径中IFS1基因表达分析
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：在异黄酮合成途径中,异黄酮合酶(Isoflavone synthase,IFS)基因起着重要作用,为此,分析了IFS1基因(IFS基因的同源基因之一)在大豆中的表达特点。组织表达分析表明,IFS1基因在根、茎、叶、花、籽粒、豆荚和胚中均有表达,其中在较嫩的组织(萌发7 d的豆苗根、茎、叶)中表达量较高,在较老的组织(生长70 d的豆苗根、茎、叶)中表达量较低,在开花后25,45 d的籽粒和豆荚及花中表达量也较低,而在成熟胚中IFS1基因表达量较高,推测该基因在胚形成早期就已经完成了大豆异黄酮的积聚过程。不同非生物胁迫的诱导表达分析表明,IFS1基因不同程度地受IAA、ABA、PEG、NaCl、低温和创伤胁迫诱导表达,表明该基因参与了大豆的逆境应答。
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